支原体课件

第19章 支原体 (mycoplasma),1.最小原核细胞型微生物 2.能独立生活 3.能在人工培养基中生长 4.二分裂繁殖 5.无细胞壁 6.多形态性,“油煎蛋样”菌落,第一节 概述,分类,柔膜体纲(Mollicutes) 支原体目(MycoPlasmatales) 下分3个科： 支原体科(MycoPlasmataceae) 2个属: 支原体(Mycoplasma)，119种 脲原体(Ureaplasma)，7种 无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae) 生长时不需要外源性胆固醇 螺原体科(Spiroplasmataceae) 生长至一定阶段呈螺形。,人体分离: 20种， 其中8种是致病或条件致病菌: 肺炎支原体(M.pneumoniae,Mpn) 生殖支原体(M.geuitalium,Mg) 人型支原体(M.hominis,Mh) 发酵支原体(M.fermentants,Mf) 穿透支原体(M.penetrans,Mpe) 梨支原体(M.pirum,Mpi) 关节炎支原体(M.arthritidis,Mart) 解脲脲原体(U.urealyticum,Uu),一、生物学性状,1. 形态与结构 最小0.2-0.3um 无细胞壁，呈球形、 长丝状、分支状 细胞膜:三层 1.蛋白质+糖类 2.脂质(胆固醇较多) 3.蛋白质+糖类特殊结构: 荚膜，顶端结 构，微丝,支原体,支原体粘附于呼吸道黏膜上皮,染色方法：Giemsa染色 淡紫色或篮色 革兰染色阴性,核酸:环状双链DNA， 分子量较小， 二种(DNA和RNA) G+C mol%低,2.培养 营养要求高，需加血清等。多数支原体能 在鸡胚绒毛尿囊膜或细胞培养中生长。 PH 7.8-8.0，PH7.0死亡。解脲5.5-6.6 气体环境:5CO2或5CO2与90N2 二分裂或出芽繁殖 生长缓慢，37,3d10d,菌落小10-600m，呈荷包蛋样。,3.生化反应 人类主要支原体生物学性状,支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 pH 吸附细胞 肺炎支原体 + - - 7.5 RBC人型支原体 - + - 7.0 - 生殖器支原体 + - - 7.5 RBC穿透支原体 + + - 7.5 RBC CD4+T解脲脲原体 - - + 6.0 RBC,4.抗原结构 由蛋白质和糖脂组成，交叉较少。 (1)蛋白质:ELISA检测 P1蛋白抗原:表面抗原 致病:粘附 (2)脂质中的糖脂:补体结合试验检测 血清抗体: 生长抑制抗体-生长抑制试验GIT 代谢抑制抗体-代谢抑制试验MIT,5.抵抗力,比细菌敏感，易被消毒剂灭活对醋酸铊、结晶紫抵抗力强于细菌对青霉素等耐药对干扰蛋白质合成抗生素敏感如红霉素、四环素、链霉素等对低渗透压敏感对热与细菌相似,二、致病性与免疫性,1.致病性(1)黏附素:顶端结构 (2)荚膜或微荚膜(3)毒性代谢产物: (4)超抗原,2.免疫性： IgM，IgG，可增强吞噬细胞功能，IgA抵御再次感染 细胞因子：TNF-, IL-1，IL-6均可发挥作用。,病原体 致病性 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、 表面感染 支气管炎人型支原体 泌尿生殖道感染 表面感染生殖器支原体 泌尿生殖道感染 表面感染穿透支原体 多见于艾滋病 入血解脲脲原体 泌尿生殖道感染 表面感染,3.所致疾病,支原体与细菌L型比较,第二节 主要致病性支原体,一、肺炎支原体 原发性非典型性肺炎 primary atypical pneumonia 病理性变化以间质性肺炎为主,1.传播途径：飞沫传播2.易感人群：发病率以青少年最高(5-15岁)3.发病季节：夏末秋初，3-5年一次流行4.潜伏期：2-3周，起病慢5.所致疾病： 占非细菌性肺炎的1/2，症状较轻，发热、持续顽固的咳嗽、胸痛。病人带菌、排菌状态可持续6W8W。 有时有肺外合并症（神经系统、消化系统及心脏等）发病率高，严重者可致死,6.微生物学检查法,(1)病原分离:缓慢，阳性率差,标 本:咽拭子或痰液培养基:双相培养基(含马血清、酵母浸液) SP-4培养基(提高分离率3040)可疑菌落： 1.糖发酵 2.溶血性 3.血细胞吸附 4.特异抗血清生长抑制试验等,(2)血清学诊断(抗体),补体结合试验（CFT）： 双份抗体效价升高4倍以上诊断间接血凝试验（IHA）： 测抗体, 2-3周高峰酶联免疫吸附试验(ELISA)： 测IgM、IgG和IgA 敏感性高间接免疫荧光试验： 检测IgM、IgG 特异性较强,(2)血清学诊断(抗原),方法1:间接法或直接法 抗体:荧光标记多克隆抗体或单克隆抗体 标本:呼吸道分泌物中抗原，86%可阳性 方法2:双抗体夹心酶联免疫吸附试验 标本:呼吸道分泌物中抗原 可检出105 CFU/ml 方法3:酶联免疫吸附试验捕获法 检测标本:P1蛋白 可检出104CFU/ml 特异性强,3小时即可,方法4 冷凝集试验,辅助诊断非典型肺炎针对红细胞膜抗原冷凝集素属IgM 5d10d出现，2W3W高峰辅助诊断效价: 64128倍以上 双份效价升高4倍以上特异性和敏感性较低,(3)特异核酸的检测,聚合酶链反应(PCR)： 优点：特异性好,敏感性高,快速、简便 靶基因：16S RNA基因,P1蛋白基因 基因探针 根据碱基严格互补配对的特性 特异性强，敏感性不如PCR技术,7.防治,药物:四环素类(近年来耐药性增加) 大环内酯类:首选 (红霉素、克拉霉素、阿奇霉素) 喹诺酮类疫苗:减毒活疫苗 基因工程疫苗,二、解脲脲原体（U.urealyticum,Uu),1954年从NGU患者的病灶处分离,能水解尿素，我国86年首次分离。,(一) 生物学性状,形态:圆形或球杆状染色:革兰染色阴性T和pH: 37, pH 5.5-6.5菌落:很小称T株（Tiny colony strain）敏感性: 敏感: 四环素、氯霉素、庆大霉素、 卡那霉素、0.05% 醋酸铊等 不敏感:青霉素生化特性:水解尿素产氨,(二)致病性,存在:人和动物的口腔、呼吸道、泌尿生殖道血清型:解脲脲原体(Uu)有14个血清型传播途径:性接触传播、母婴传播所致疾病:(STD) 泌尿生殖道感染: NGU中占第二位，且常与 淋球菌合并感染（2.16 倍）、盆腔感 染、宫颈炎、阴道炎、输卵管炎、慢性 前列腺炎、附睾炎、男女不孕症、反复 流产、早产、死胎 新生儿疾病:呼吸道病变、肺炎、脑膜炎,引起男性不孕的原因： Uu吸附于精子表面， 使其运动受阻， 并蔽盖了精子识别卵细胞的部位 Uu产生神经氨酸样物质， 干扰精子与卵细胞结合。 Uu与精子膜有共同抗原， 从而产生抗精子抗体,98年，NGU中，解脲脲原体31.4%，衣原体35.9%，二者混合感染力65.2%自然流产：1-8次，阳性率68% 4次，阳性率80%对照组：阳性率10.5%不孕：阳性率55.0%对照组：阳性率26.6%,三、人型支原体、生殖器支原体,传播途径：垂直传播、性传播NGU、流产、出生缺陷、死胎、不孕(育),生殖支原体,与泌尿生殖道感染有关,人型支原体,能引起渗出性咽炎及尿道炎，也与卵巢脓肿、产褥热等有关。,四、穿透支原体,穿透支原体为1990年发现的新型支原体为条件致病性支原体具有黏附与穿入细胞作用，引起细胞损