GB 5009.7-2016 食品安全国家标准 食品中还原糖的测定

016 前 言本标准代替008食品中还原糖的测定、55132008粮油检验 粮食中还原糖和非还原糖测定还原糖部分、17512009甜菜还原糖的测定。本标准与008相比,主要修改如下:标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中还原糖的测定”;将008与55132008还原糖部分进行了同类合并。0161 食品安全国家标准食品中还原糖的测定1 范围本标准规定了食品中还原糖含量的测定方法。本标准第一法、第二法适用于食品中还原糖含量的测定。本标准第三法适用于小麦粉中还原糖含量的测定。本标准第四法适用于甜菜块根中还原糖含量的测定。第一法 直接滴定法2 原理试样经除去蛋白质后,以亚甲蓝作指示剂,在加热条件下滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(已用还原糖标准溶液标定),根据样品液消耗体积计算还原糖含量。3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的三级水。酸(酸铜(甲蓝(石酸钾钠(氧化钠(酸锌2乙酸(铁氰化钾N)63酸溶液(1+1,体积比):量取盐酸50水50 碱性酒石酸铜甲液:于水中,并稀释至1000 碱性酒石酸铜乙液:称取酒石酸钾钠50解于水中,再加入亚铁氰化钾4g,完全溶解后,用水定容至1000存于橡胶塞玻璃瓶中。酸锌溶液:冰乙酸3水溶解并定容于100 亚铁氰化钾溶液(106g/L):水溶解并定容至100 氢氧化钠溶液(40g/L):称取氢氧化钠4g,加水溶解后,放冷,并定容至1000162 萄糖(0度99%。糖(7度99%。糖(含水)(2O)989度99%。糖(7度99%。萄糖标准溶液(准确称取经过98100烘箱中干燥2水溶解后加入盐酸溶液5用水定容至1000 果糖标准溶液(准确称取经过98100干燥2水溶解后加入盐酸溶液5用水定容至1000 乳糖标准溶液(准确称取经过9498干燥2水)1g,加水溶解后加入盐酸溶液5用水定容至1000水)。化糖标准溶液(100具塞锥形瓶中,加盐酸溶液56870水浴中加热15置至室温,转移至1000 平:浴锅。调温电炉。式滴定管:25 淀粉的食品:称取粉碎或混匀后的试样10g20g(置250水20045水浴中加热1h,并时时振摇,冷却后加水至刻度,混匀,静置,沉淀。慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。精饮料:称取混匀后的试样100g(置于蒸发皿中,用氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积的1/4后,移入250慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。0163 酸饮料:称取混匀后的试样100g(蒸发皿中,在水浴上微热搅拌除去二氧化碳后,移入250水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶,加水至刻度,混匀后备用。他食品:g(混匀后的液体试样5g25g(置25050慢加入乙酸锌溶液5水至刻度,混匀,静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。150水10入玻璃珠2粒4粒,从滴定管中加葡萄糖(或其他还原糖标准溶液(约9制在2热以每2秒1滴的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标准溶液(,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖(或其他还原糖标准溶液)的总体积,同时平行操作3份,取其平均值,计算每10性酒石酸甲、乙液各5性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(或其他还原糖)的质量(注:也可以按上述方法标定40、乙液各半)来适应试样中还原糖的浓度变化。水10入玻璃珠2粒4粒,控制在2持沸腾以先快后慢的速度,从滴定管中滴加试样溶液,并保持沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以1滴/2至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样品溶液消耗体积。注:当样液中还原糖浓度过高时,应适当稀释后再进行正式测定,使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近,约10果按式(1)计算;当浓度过低时则采取直接加入10去加水10用还原糖标准溶液滴定至终点,记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10果按式(2)计算。于150水10入玻璃珠2粒4粒,从滴定管滴加比预测体积少1制在2持沸腾继续以1滴/2至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积(V)。6 分析结果的表述试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)按式(1)计算:X=V/2501000100(1)式中:X 试样中还原糖的含量(以某种还原糖计),单位为克每百克(g/100g);碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各半)相当于某种还原糖的质量,单位为毫克(m试样质量,单位为克(g);F系数,、测定时平均消耗试样溶液体积,单位为毫升(250定容体积,单位毫升(0164 1000换算系数。当浓度过低时,试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)按式(2)计算:X=10/2501000100(2)式中:X 试样中还原糖的含量(以某种还原糖计),单位为克每百克(g/100g);标定时体积与加入样品后消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于某种还原糖的质量,单位为毫克(m试样质量,单位为克(g);F系数,、0样液体积,单位毫升(250定容体积,单位毫升(1000换算系数。还原糖含量10g/100算结果保留三位有效数字;还原糖含量10g/100算结果保留两位有效数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。8 其他当称样量为500g。第二法 高锰酸钾滴定法9 原理试样经除去蛋白质后,其中还原糖把铜盐还原为氧化亚铜,加硫酸铁后,氧化亚铜被氧化为铜盐,经高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐,根据高锰酸钾消耗量,计算氧化亚铜含量,再查表得还原糖量。10 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的三级水。酸(氧化钠(酸铜(酸(酸铁。石酸钾钠(0165 酸溶液(3):量取盐酸30水稀释至120性酒石酸铜甲液:适量水溶解,加水稀释至500精制石棉过滤。性酒石酸铜乙液:称取酒石酸钾钠173适量水溶解,并稀释至500精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。氧化钠溶液(40g/L):称取氢氧化钠4g,加水溶解并稀释至100酸铁溶液(50g/L):称取硫酸铁50g,加水200慢加入硫酸100后加水稀释至1000制石棉:取石棉先用盐酸溶液浸泡2d3d,用水洗净,再加氢氧化钠溶液浸泡2d3d,倾去溶液,再用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时,用水洗净。再以盐酸溶液浸泡数小时,以水洗至不呈酸性。然后加水振摇,使成细微的浆状软纤维,用水浸泡并贮存于玻璃瓶中,即可作填充古氏坩埚用。准品高锰酸钾(722级纯或以上等级。准溶液配制高锰酸钾标准滴定溶液c(1/5:按601配制与标定。11 平:浴锅。调温电炉。式滴定管:255空泵。12 淀粉的食品:称取粉碎或混匀后的试样10g20g(置250水20045水浴中加热1h,并时时振摇。冷却后加水至刻度,混匀,静置。碱性酒石酸铜甲液10水至刻度,混匀。静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。精饮料:称取100g(匀后的试样,置于蒸发皿中,用氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积的1/4后,移入250水50匀。加碱性酒石酸铜甲液10水至刻度,混匀。静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。酸饮料:称取100g(匀后的试样,试样置于蒸发皿中,在水浴上除去二氧化碳后,移入250用水洗涤蒸发皿,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀后,备用。0166 他食品:混匀后的液体试样25g50g(置250水50匀后加碱性酒石酸铜甲液10水至刻度,混匀。静置30干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用。500入碱性酒石酸铜甲液25烧杯上盖一表面皿,加热,控制在4精确煮沸2热用铺好精制石棉的古氏坩埚(或滤,并用60热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚(或回原500硫酸铁溶液2525玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。同时吸取水50入与测定试样时相同量的碱性酒石酸铜甲液、乙液、硫酸铁溶液及水,按同一方法做空白试验。13 分析结果的表述试样中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量,按式(3)计算:)c(3)式中:试样中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量,单位为毫克(V测定用试样液消耗高锰酸钾标准溶液的体积,单位为毫升(试剂空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积,单位为毫升(c高锰酸钾标准溶液的实际浓度,单位为摩尔每升();1c(1/5)相当于氧化亚铜的质量,单位为毫克(根据式中计算所得氧化亚铜质量,计算试样中还原糖含量,按式(4)计算:X=1000100(4)式中:X试样中还原糖的含量,单位为克每百克(g/100g);位为毫克(试样质量或体积,单位为克或毫升(V测定用试样溶液的体积,单位为毫升(250试样处理后的总体积,单位为毫升(还原糖含量10g/100算结果保留三位有效数字;还原糖含量10g/100算结果保留两位有效数字。14 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。0167 15 其他当称样量为500g。第三法 铁氰化钾法16 原理还原糖在碱性溶液中将铁氰化钾还原为亚铁氰化钾,还原糖本身被氧化为相应的糖酸。过量的铁氰化钾在乙酸的存在下,与碘化钾作用下析出碘,析出的碘以硫代硫酸钠标准溶液滴定。通过计算氧化还原糖时所用的铁氰化钾的量,7 试剂除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的三级水。5%乙醇。乙酸(水乙酸钠(酸(酸钠(氰化钾N)6。酸钠(化钾(酸锌(化钾(氧化钠(溶性淀粉。酸缓冲液:后稀释至1000酸钠溶液(:性铁氰化钾溶液():酸盐溶液:后缓慢加入200用水稀释至1000匀。化钾溶液(10%):加一滴饱和氢氧化钠溶液。粉溶液(1%):少量水润湿调和后,缓慢倒入100续煮沸直至溶液透明。代硫酸钠溶液():按601配制与标定。0168 18 析天平:荡器。管:约18浴锅。炉:2000W。量滴定管:59 样制备称取试样5g(100斜锥形瓶以便所有试样粉末集中于一侧,用5醇浸湿全部试样,再加入50酸钠溶液,在振荡器上混合振摇5混合液过滤,弃去最初几滴滤液,收集滤液于干净锥形瓶中,此滤液即为样品测定液。同时做空白实验。化:精确吸取样品液5精确加入5合后立即将试管浸入剧烈沸腾的水浴中,并确保试管内液面低于沸水液面下3热20即用冷水迅速冷却。定:将试管内容物倾入100255化钾溶液,混匀后,硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色,再加1续滴定直至溶液蓝色消失,记下消耗硫代硫酸钠溶液体积(白试验:吸取空白液5下消耗的硫代硫酸钠溶液体积(20 可查得试样中还原糖(以麦芽糖计算)的质量分数。铁氰化钾溶液体积(式(5)计算:0)(5)式中:铁氰化钾溶液的体积,单位为毫升(硫代硫酸钠溶液的体积,单位为毫升(硫代硫酸钠溶液的体积,单位为毫升(c硫代硫酸钠溶液实际浓度,单位为摩尔每升()。计算结果保留小数点后两位。:还原糖含量以麦芽糖计算。0169 21 精密度在重复性条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第四法 奥氏试剂滴定法22 原理在沸腾条件下,还原糖与过量奥氏试剂反应生成相当量的却后加入盐酸使溶液呈酸性,并使后加入过量碘溶液进行氧化,用硫代硫酸钠溶液滴定过量的碘,其反应式如下:萄糖或果糖 络合物 葡萄糖酸 酒石酸钾钠 氧化亚铜2222 2)+2此差值便可计算出还原糖的量。23 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的三级水。酸(酸铜(石酸钾钠(水碳酸钠(乙酸(酸氢二钠(2化钾(酸锌2铁氰化钾N)63溶性淀粉。状碳酸钙(酸溶液(6):入已装入30慢加水稀释至100酸溶液(1):入已装入200慢加水稀释至100001610 氏试剂:石酸钾钠300g,释至1000细孔砂芯玻璃漏斗或硅藻土或活性炭过滤,贮于棕色试剂瓶中。化钾溶液(250g/L):于水,移入100水稀释至刻度,摇匀。酸锌溶液:冰乙酸3水溶解并定容于100铁氰化钾溶液(106g/L):水溶解并定容至100粉指示剂(5g/L):冷水10拌下注入90微沸2却。溶液于使用前制备。代硫酸钠(772级纯或以上等级。(5532190级纯或以上等级。化钾(681级纯或以上等级。代硫酸钠标准滴定储备液c(:按601配制与标定。也可使用商品化的产品。代硫酸钠标准滴定溶液c(:精确吸取硫代硫酸钠标准滴定储备液(入100水稀释至刻度。校正系数按式(6)计算K=(6)式中:c硫代硫酸钠标准溶液的浓度,单位为摩尔每升()。溶液标准滴定储备液c(:按601配置与标定。也可使用商品化的产品。标准滴定溶液:c(。精确吸取碘溶液标准滴定储备液(入100水稀释至刻度。24 平:浴锅。调温电炉或性能相当的加热器具。式滴定管:255 备检样品清洗干净。取100g(品,放入高速捣碎机中,用移液管移入100不低于12000r/的匀浆。取匀浆样品25g(于500加水调整体积约为200802水浴保温30间摇动数次,取出加入乙酸锌溶液5却至室温后,转入25001611 容至刻度。摇匀,过滤,澄清试样溶液备用。样品还原糖含量较高时,可适当减少取样体积,并补加水至20试样溶液中还原糖的量不超过20加入250分混合,用小漏斗盖上,在电炉上加热,控制在3锥形瓶静置于冷水中冷却至室温。氧化反应取出锥形瓶,不断摇动下,数量以确保碘溶液过量为准,用量筒沿锥形瓶壁快速加入盐酸15即盖上小烧杯,放置约2时摇动溶液。定过量碘用硫代硫酸钠标准滴定溶液滴定过量的碘,滴定至溶液呈黄绿色出现时,加入淀粉指示剂2续滴定溶液至蓝色褪尽为止,记录消耗的硫代硫酸钠标准滴定溶液体积(白试验按上述步骤进行空白试验(除了不加试样溶液外,操作