血小板血型基础与临床PPT课件

血小板血型基础与临床血小板血型基础与临床1主要内容主要内容l HPA及其相关实验诊断l 血小板血型的主要临床意义l PTR的对策2血型血型l 所有血液成分的遗传性标志。3血型的发现血型的发现l 红细胞血型： 1900年， Landsteiner发现ABO血型。l 血小板血型： 1959年， Van Loghem发现Zwa血型。l 白细胞血型：1960年， Lalezari发现 HNA1965年， Bassuat发现 HLA4血小板血型系统血小板血型系统 l 血小板血型抗原主要有二大类 血小板相关抗原血小板特异性抗原 5血小板相关抗原血小板相关抗原 l 血小板表面存在的与其他细胞或组织共有的抗原 。又称血小板非特异性抗原或血小板共有抗原。l 包括主要组织相容性抗原（ HLA）和红细胞血型系统相关抗原 。6血小板表面的血小板表面的 HLA抗原系统抗原系统 l 血小板表面存在 HLA-A、 HLA-B和 HLA-C位点等 HLA 类抗原 。l 未发现血小板表面存在 HLA-DR、 HLA-DP和HLA-DQ等 类抗原。l 但是经过细胞因子的刺激，在血小板表面能产生 HLA-DR抗原。 7血小板表面的红细胞血型系统血小板表面的红细胞血型系统 l 血小板表面存在 ABO、 Lewis、 I、 i和 P等红细胞血型系统抗原。 l 但不存在 Rh、 Duffy、 Kell、 Kidd和Lutheran等血型系统抗原。8血小板特异性抗原血小板特异性抗原 l 人类血小板抗原 （ Human platelet antigen, HPA） 是位于血小板膜糖蛋白 （ glycoprotein， GP）上的抗原表位。l 按发现时间顺序排列如下： Duzo、 PlA（Zw）、 PlE、 Ko（ Sib）、 Bak（ Lek）、Yuk（ Pen）、 Br（ Hc、 Zav）、 PLT、Nak、 Gov、 Sr等等。 9血小板特异性抗原系统国际命名血小板特异性抗原系统国际命名 l 血小板特异性同种抗原系统一律命名为人类血小板抗原系统（ HPA）。 l 不同的抗原系统按发现顺序用数字编号 l 对偶抗原按其在人群中频率由高到低，用字母命名，高的为 a，低的为 b 。l 1990年被国际输血协会确认的血小板特异性抗原有 5个系统共 10种抗原，正式命名为 HPA-1 HPA-5。10PNCl 2003年国际输血协会（ ISBT）和国际血栓和止血协会（ ISTH）建立的血小板命名委员会（ The Platelet Nomenclature Committee， PNC） 。1112血小板特异性抗原的分子生物学血小板特异性抗原的分子生物学 l 在已知其分子机理的 22个血小板抗原中，其基因多态性大多是由于相应血小板膜糖蛋白结构基因中的 SNP引起，而致相应位置的单个氨基酸变异所致，唯一的例外是 HPA-14w。l HPA-14w： 19091911delAAGK611del1314未命名的未命名的 HPAVaa、 Moua：前者被定位于 GP b/ a上， 后者尚未被定位。它们的等位基因结构多态性和蛋白结构多态性也也尚不了解故暂时未被归入 HPA命名法。Duzo抗原虽第一个被发现，但至今未发现第二例抗 -Duzo，其所在糖蛋白、蛋白结构和基因结构多态性均未知。15血小板血型相关实验技术血小板血型相关实验技术l 近年来，随着分子免疫学、分子生物学的发展和各种标记技术（如流式细胞术、荧光显微镜、免疫电镜等）在医学领域的应用，血小板血清学检测方法有了很大进展，一些分子生物学技术也开始应用于血小板血型分型。 l 除血小板特异性抗原 HPA外，血小板表面的HLA、 ABO等抗原也具有重要临床意义。由于ABO血型可用相关红细胞方便地检测，故临床上对血小板血型的检测主要集中在 HPA和 HLA的检测上。 16血清学试验血清学试验 l 血小板免疫荧光试验（ PIFT）l 血小板固相微板技术：又称为固相红细胞粘附法（ SPRCA）或混合细胞粘附试验（ MRCA） l 单克隆抗体特异的血小板抗原固定试验（MAIPA） l 改进的抗原捕获酶联免疫吸附试验（ MACE）l 流式细胞仪检测技术（ FCM）和珠子介导的血小板相关抗体检测法（ LifeMatchTM Luminex100 screening assay）l 微柱凝胶血小板定型试验 17HPA基因分型基因分型 l 由于目前所知的大部分 HPA等位基因多态性皆为单核苷酸多态性（ SNP），故HPA的基因分型方法与 SNP检测方法类似 。18HPA基因分型方法基因分型方法l PCR-RFLP ： Newman等（ 1989年）首先应用。 HPA-4（ Yuk）和 HPA-8（ Sr）系统缺乏合适的酶切位点，不能直接使用此法进行分型。 l PCR-ASO ： Mcfarland等（ 1991年）首先将此技术用于 HPA-1的分型。 l PCR-SSP ： Metcalfe和 Waters等首先将此技术用于 HPA-1的基因分型。 l PCR-SSCP ： Peyruchaud等（ 1995年）报道利用 PCR-SSCP对 HPA-1和 HPA-3进行基因分型 。l PCR-SEQUENCE 19其他基因分型方法其他基因分型方法l 寡核苷酸连接试验（ OLA）或连接酶链式反应 。l 同源双链优先形成试验（ PHFA） 。l 差异性解链曲线图分析 。l 5核酸酶分析（ TaqManTM分析） 。20血小板血型的主要临床意义血小板血型的主要临床意义l 免疫性血小板减少症 自身免疫性血小板减少症（ AITP)同种免疫性血小板减少症 药物诱导免疫性血小板减少症 (DIIT)21自身免疫性血小板减少症（自身免疫性血小板减少症（AITP)l AITP比自身免疫性溶血性贫血（ AIHA)更常见。分 3类： ITP，再次 ITP，急性病毒感染后血小板减少症。统称 ITP。l PAIgG检测是其最有价值的试验。但是PAIgG并非特异，其阳性诊断价值仅为46%，阴性诊断价值为 82%。22同种免疫性血小板减少症同种免疫性血小板减少症 l 新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 （ NAITP ）l 输血后血小板减少性紫癜 （ PTP）l 血小板输注无效 （ PTR）23新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜 （ NAITP ）l NAITP类似于红细胞血型系统的 HDNl 在白种人中， NAITP的发病率约为 1/10001/2000， 80%是由 HPA1a抗体引起的。l NAITP的死亡率约为 10%，第一胎的发生率约为 20 59%。l 产前诊断对预后非常重要。2425血小板输注无效血小板输注无效 l 约有 2050%白血病患者， 80%再障患者在长期输注血小板后，发生血小板输注无效。 26血小板输注血小板输注 l 目的：主要是防止出血。l 指征：血小板数量减少或功能异常患者。l 原则：手术或产科病人 : 50109/L时，一般需要预防性输注50 100109/L时，视病情而定100109/L时，通常不需输注l 输注剂量：一般 2 1011以上 27血小板输注血小板输注l 血小板功能障碍，近期有服用阿斯匹林等血小 板抑制药者 :即使计数 100109/L，在估计其治疗 中会有出血倾向时，也应输注血小板。l 大量使用制剂或全血 15 20单位以上者:应输注。l I、药物引起的血小板减少症等 :除非有大出血危险，一般不宜输血小板。 28血小板输注无效