HPLC法测定甲硝唑片的溶出度

38 安徽医药012 6(1) 超 (安徽省阜阳市食品药品检验所，安徽阜阳236015) 摘要：目的建立甲硝唑片溶出度的高效液相测定方法。方法色谱柱为6 50 m)，流动 相为甲醇0：80)，流速为10 ml检测波长为320 温为30。结果 甲硝唑在005090 gL 浓度范围 内呈良好线性关系(r=10)，平均回收率为1002(n=9)，9。结论该方法准确、可靠，可用于甲硝唑片的溶 出度测定。 关键词：高效液相色谱法；溶出度；甲硝唑片 f f A 36015) o of m 6 50 a of 0：80)at 0 ml20 nm of 0he in 05090 r=10) 002SD 39(n=9)is be of 硝唑是目前临床中常用的一种广谱强效抗菌杀虫药 临床上广泛用于痤疮，脂溢性皮炎，酒渣鼻，毛囊炎及其它多 种细菌性皮肤感染的治疗和预防。中国药典)2010年版 二部对甲硝唑制剂的含量测定做了较大的改变，均由原来的 紫外分光光度法改为高效液相色谱法，而甲硝唑片的溶出度 测定仍然采用紫外分光光度法，近年来也未见硝唑溶出度的相关报道 “ 。本文用高效液相色谱法对 甲硝唑片的溶出度进行测定，并进行了方法学考察，同时对三 家药厂的甲硝唑片的溶出度，用高效液相色谱法与中国药典 规定的检验方法进行比较，结果一致。本方法操作简便、专属 性高、重现性好，可以替代紫外分光光度法。 1仪器与试剂 11仪器998紫外 检测器、国 大天发科技有限公司制造)。 12试剂与药品 甲醇为色谱纯，盐酸为分析纯，水为超纯 水。甲硝唑对照品(批号：100191国药品生物制品 检定所)、甲硝唑片，规格均为每片02 g( 号：1006111；号：1003121；公司，批号20100532)。 2方法与结果 21 色谱条件及系统适应性试验按甲硝唑片含量测定项 下的色谱条件 J，色谱柱为6 150 m)；流动相为甲醇一水(20：8O)，流速为10 检测波长为320 温为30，进样量为1O l。 理论塔板数按甲硝唑峰计算不低于2 000。见图1。 A流动相 B溶出介质 C对照品溶液 D 供试品溶液 图1 甲硝唑) 22溶液的制备 221 对照品溶液的制备 精密称取甲硝唑对照品约 11 50 流动相溶解并稀释至刻度，摇 匀，作为对照品溶液。 222供试品溶液的制备取本品，照溶出度测定法(中国 药典2010年版二部附录，以(91000)盐酸 溶液900 速为100 r依法操作。 经30 溶液适量，滤过(045 取续 滤液作为供试品溶液。 223空白溶液测试取流动相、溶出介质过滤后进样。结 安徽医药012 6(1) 39 果表明，空白溶液对测定无干扰。 23线性关系考察按“21”色谱条件，取对照品溶液，分 别进样2、5、10、15、20、25、30、40 l，注入液相色谱仪，记录色 谱图。测得的峰面积分别为1 265 164、3 338 407、6 871 349、 10 380 075、13 885 242、17 425 780、20 937 513、27 737 188，以 浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标进行线性回归，得回 归方程为A：31 231 02121，r=10。结果表明，甲 硝唑在005090 gL 浓度范围内，其浓度与峰面积呈良 好的线性关系。 24进样精密度试验按“21”色谱条件，取对照品溶液， 重复进样6次，每次1O l，注入液相色谱仪，记录色谱图，其 峰面积分别为6 833 924、6 858 854、6 861 108、6 867 677、6 870 842、6 867 672，测得0。结果表明，本方 法精密度良好。 25稳定性试验按“21”色谱条件，取的对照品溶液，分 别在03 6 9、12、24 h，每次10 l，注入液相色谱仪，记录色 谱图，其峰面积分别为6 872 624、6 878 511、6 879 028、6 889 746、6 873 378、6 875 303，测得0。结果表明， 甲硝唑在24 26精密度号为 1006111)5份，加溶出介质900 声20 过(045 取续滤液，按“21”色谱条件测定。每次10 l，注入液相色谱仪，记录色谱图，其峰面积分别为6 655 279、6 551 486、6 518 325、6 597 139、6 559 147，测得其平均溶 出量的0。结果表明，本方法重现性良好。 27回收率试验按甲硝唑片(规格：02 g)的50、80、 100分别精密称取甲硝唑原料适量，与相应的辅料混合均 匀，分别加900 声20 过 (045 取续滤液10 l，注入液相色谱仪，记录 色谱图；另取对照品溶液同法操作，按外标法计算回收率，得 平均回收率为1002，39，具体结果见表1。结 果表明，本方法回收率良好。 表1样品回收率试验 28高效液相色谱法与紫外分光光度法测定结果比较取 对照品溶液与供试品溶液各10 l，注入液相色谱仪，记录色 谱图，按外标法以峰面积计算溶出量，并与中国药典规定的紫 外分光光度法(定的结果比较。结果见表2。 表2样品溶出度测定结果比较 3讨论 本文建立的现性好， 准确度高。所使用的紫外检测器为二极管阵列检测器。有相 关报道 高效液相色谱条件，多选用不同比例的甲醇和水， 检测波长在220 虑杂质峰等干扰多发生 在低波长区，本文选择检测波长320 有效避免杂质干 扰，主峰吸收也很强。本文流动相比例能使主峰在较短时间 内出峰，且分离度好。 甲硝唑在水中微溶，影响其溶出度的因素较多。 ，采 用高效液相色谱法直接测定甲硝唑片的溶出液，可与甲硝唑 片的含量测定在同一色谱条件下同时测定，简单易行，省时省 力，且甲硝唑线性关系良好，适应的浓度范围宽，提高了溶出 度测定结果的精度与准确度，与中国药典紫外分光光度法测 定的结果无明显差异，可用于甲硝唑片的溶出度测定。 参考文献： 1国家药典委员会中国药典：二部s北京：中国医药科技出 版社，2010：1536，附录857 2 陆广武，袁杰，洪田谷待因含量J安徽医药，2010，14(11)：12823 3何琳吡罗昔康片溶出度考察J安徽医药，2009，13(12)： 15001 4 秦影乙酰吉他霉素颗粒溶出度检查方法研究J安徽医 药，2010，14(7)：7746 5焦素文J中国医药指南，2010，8(19)：734 6 张玉玺，姚晓颖，刘春鹤，等高效液相色谱法测定甲松涂剂中 甲硝唑和维生素中国现代药物应用，2010，4 (13)：89 7 谢沐风，操洪