液质联用仪的应用

（三）质谱技术最新进展及其在中药领域的应用液质联用分析方法的建立：检查已有的色谱条件是否可以离子化、考虑用何种源、决定用正离子还是负离子、改用挥发性流动相或分离模式、优化离子源参数提高灵敏度、质谱不能检测没有离子化的物质。质谱提供的信息：（1）提供分子量，确定分子式：采用同位素丰度法或高分辨质谱求算分子式。 （2）提供化合物的结构信息：根据分子离子峰及裂解碎片推断官能团、辨认化合物类型和推导骨架结构等。 （3）复杂混合物的定性定量分析：GC-MS 法分析挥发油的化学组成，化合物的裂解在一定的条件下遵循一定的规律，故比较试样与标准品的质谱图，可为鉴定是否为同一化合物提供依据。随着新的离子源不断出现，LC-MS 法在结构研究方面发挥的作用越来越大，而且更加方便快捷。质量分析器：静态仪器有单聚焦磁质谱、双聚焦磁质谱；动态仪器有四极杆质谱、离子阱质谱、飞行时间质谱等。 （1）四极杆质谱：体积小，质量轻，价格低，最为广泛使用；扫描速度快，适合与色谱连用，定量方面有优势。但只能做到二级质谱（三重四极杆串联质谱） 。 （2）离子阱质量分析器：当射频电压的最高值逐渐增高时，质荷比从小到大的离子逐次排除并被记录而获得质谱图。离子阱质谱可以很方便地进行多级质谱定性分析，性能好，在剖析物质结构、药物代谢物研究等方面具有最强大的功能。 （3）飞行时间质量分析器：离子质量越大，到达接收器所用时间越长，离子质量越小，到达接收器所用时间越短，根据这一原理把不同质量的离子按m/z 值大小进行分离。可检测的分子量范围大，扫描速度快，仪器结构简单。 （4）高分辨质谱：生物质谱要求质量分析器的测定范围高于普通的有机质谱，多用 TOF。离子源常用 ESI 源和 MALDI 源（基质辅助激光解吸电离） 。 （5）静电轨道阱质谱：属于高分辨质谱。此外，分辨率即分开相邻离子的能力，分辨率越高，越能区分小的质量差。扫描功能：（1）Full scan：全扫描，指质谱采集时扫描一段范围，可以自己设定一个范围，如 1001000 amu。可测定未知物的分子量。也可通过二级 MS/MS 或多级质谱 MSn 获得所有碎片离子。（2）SIM：选择离子监测，单离子监测，即只扫描一个离子。对于已知化合物，为了提高某个离子的灵敏度，并排除其它离子干扰，可以只扫描一个离子。 （3）SRM：多级选择反应监测，针对二级质谱或多级质谱的某两级之间，即母离子选一个离子，碰撞后，从形成的子离子中也选一个离子。两次都只选单离子，所以噪音和干扰被排除得更多，灵敏度更高，尤其适用于基质复杂背景高的样品。（4）MRM：多反应监测，即多个化合物同时测定时，相当于多个SRM。其中定性鉴别可选 Full Scan，可获得全貌及更多离子，定量测定可用 SIM 或 SRM/MRM，可提高已知信号的强度。背景基质越复杂，SRM/MRM 越优选。液相色谱-质谱联用技术特点：（1）快速：不必过度依赖色谱分离效果，尤其适用于复杂基质样品的分析。 （2）灵敏：ng，p