圆环、蓝耳概述

圆环、蓝耳付应舟Q1163659782E-mail 一、 PCV2病原学l 90年代 PK-15细胞培养污染面的 PCV成为PCV1（非致病性病毒）l 99年 新出现的 PCV命名为 PCV2（致病性病毒） l PCV2属于圆环病毒科 圆环病毒属 l 病毒粒子直径为 14-17nm，为已知最小的动物病毒之一一、 PCV2病原学l 呈 20面体对称结构，无囊膜l 含有共价闭合的单股环状负链 DNAl 基因大小为 176kbl 核苷酸数为 1767-1768个l 全球这种病毒的抗原决定簇核苷酸序列的同源性高达 93%一、 PCV2病原学l 对外界理化因子抵抗力相当强l 病毒耐酸，在 PH为 3的环境下仍可存活l 耐氯仿， 70 的环境下可存活 15分钟l 市售消毒剂如：双氯苯双胍己烷、福尔马林、碘酒、酒精等作用下 10分钟，病毒滴度有所下降，但不能完全灭活l 可使动物红细胞凝集，无血凝活性二、 PCV2流行病学l 在自然界广泛存在l 猪科动物是自然宿主，猪科外动物不易感l 口鼻接触是 PCV2的主要自然传播途径，经鼻内接种妊娠母猪或人工授精方式尝试使胎儿感染 PCV2，结果感染效果不确切l PCR法可检测到 PMWS感染猪粪便和分泌物及田间 28周龄猪血清中的 PCV2核苷酸l 去势后的公猪教母猪易感 PMWSl PMWS虽由多种原因引起的疫病，但与 PCV2感染分不开l 不同品种的遗传性有影响，长白猪较杜洛克、大白猪更易感三、 PCV2致病机理l 目前尚未得知体内支持 PCV2复制的细胞l 但在猪巨噬细胞和树突状细胞中发现大量的 PCV2抗原，据推测是聚集场所而不不能确认为复制场所l PCV2对免疫系统的影响具有重要的作用l 实验表明：一些病毒或非感染因子刺激或激活 PCV2感染猪体内免疫系统后， PCV2的复制水平提高，同时血清组织中的抗体滴度升高，淋巴组织病变显著提高，导致 PMWSl 发病后，淋巴组织细胞动力学改变，发生免疫抑制状态三、 PCV2致病机理l感染 PMWS后， PCV2与猪天然干扰素分泌细胞（ NIPC）相互作用，使干扰素分泌持续减少，体内干扰素含量持续下降，导致非正常的免疫应答l目前认为，高滴度的 PCV2会发生PDNS四、 PMWS临床症状与病理变化l PMWS较易侵袭 1-4月龄的猪，发病率一般为 5-30%（有时达 50-60%）发病猪死亡率 5-30%l 症状：消瘦、皮肤苍白、呼吸困难、有时腹泻、黄疸、在早期出现皮下淋巴结肿大，更早期呈现淋巴结大小正常或萎缩，胸腺也常常发生萎缩l 淋巴结组织病理学变化特征：淋巴细胞减少、大量组织细胞及多核巨噬细胞浸润、胸腺皮质萎缩、组织细胞及树突状细胞内通过显微观察可见胞内病毒包涵体四、 PMWS临床症状与病理变化l间质性肺炎、支气管周围纤维化、肝脏肿大或萎缩、变白变硬、表面有颗粒状物覆盖、显微下可见大面积细胞病变及炎症l疫病后期无明显特征的黄疸四、 PDNS病理变化l猪肾皮质表面出现白点（非化脓性间质性肺炎）l表现为坏死性脉管炎l死于 PDNS的猪病理变化一般为双侧肾肿大，肾盂水肿，肾小球肾炎，脾脏梗死五、 PCV2免疫学特征l猪群感染 PCV2后，血清转化一般发生在感染后 14-28天六、 PCV2诊断要点l PMWSl 生长缓慢、消瘦、持续呼吸困难、腹股沟淋巴结肿大、有时发生黄疸l 淋巴结组织呈现病变l 病变淋巴结组织或其他组织有中等以上 PCV2抗原六、 PCV2诊断要点l PDNSl 皮肤出血或坏死、主要出现在后肢及会阴区域；肾肿大、发白及皮质大面积出血l 全身有坏死性脉管炎，坏死性及纤维素性肾小球肾炎六、 PCV2诊断要点l 繁殖障碍性疾病l 怀孕后期的流产或死胎，有时可见明显的心肌肥大l 心肌损伤，表现为大面积的纤维组织增生或坏死性心肌炎l 心肌损伤及其它死胎组织检测到 PCV2七、 PCV2检测方法l 原位杂交法（ ISH）l 免疫组织化学（ IHC）l 血清学检测法存在的问题：因为感染 PMWS猪和非感染猪的血清转化形式非常相似八、 PCV2主要危害lPMWS；lPDNS；lCT；l繁殖障碍九、 PCV2的预防和控制l 控制环境和其它细菌及病毒感染可降低 PMWS发生率l 研究证明，免疫激活在引发 PMWS中是一个重要因素l 实际生产中，停止使用有效疫苗的风险比导致较低比例的 PMWS的风险大得多，免疫激活的因素不能消除l 研究结果表明增加母源抗体可使 PMWS的发生率下降，饲料中增加亚油酸、 VE、 Se也有效l 某些猪场哺乳仔猪皮下注射成年猪血清也有效，但带来严重的生物安全问题l 疫苗的免疫接种（最有效、也切实可行）十、 PCV2 疫苗类型l 全病毒灭活疫苗l 重组疫苗l DNA疫苗l 嵌合感染性 DNA克隆疫苗l 基因工程 Cap亚单位疫苗PRRSV概述l PRRSV属套病毒目成员，动脉炎病毒科l 有囊膜正链小 RNA病毒l 直径 50-65nml 表面相对平滑l 立方体核衣壳核心直径 25-35nm一、病毒基本生物学特征l 基因多样性： RNA序列差异l 对肺泡巨噬细胞 (PAM)有强亲嗜性l 抗体依赖性增强作用 (ADE)l 在 PH6.5-7.5条件下稳定l 具有高度的宿主依赖性l 母体病毒穿透胎盘垂直传播l 持续感染且与猪只年龄无关二、 PRRSV的基因测序研究l 一个农场可能存在多种基因型的 PRRSVl 不同基因型的蓝耳病毒重组的可能性较大l 研究表明全病毒弱毒疫苗毒力可能返强l 使人们更好地理解了 PRRSV毒力减弱或毒力返强的分子基础l 研究发现毒力基因，基因反向遗传技术进行PRRSV基因功能研究，确立毒力基因三、 PRRSV致病机理l 主要在肺泡巨噬细胞及其它组织的巨噬细胞中生长繁殖，也能在公猪的睾丸生殖细胞（精细胞、精母细胞、多核巨细胞）中生长繁殖l 主要通过内吞作用进入宿主细胞： PRRSV通过核衣壳以出芽方式进入滑面内质网、高尔基体或者两者的管腔而完成装配过程，装配完成后，病毒粒子在囊膜内聚集并迁移到细胞膜，经过膜融合后释放，在一步生长条件下培养 10-20小时，滴度可达 107.3四、 PRRSV基因组结构l 基因组长为 15Kb，含有 8个开放性阅读框（ORFS）l ORF1a和 1b占整个基因组的 80%，并编码所必需的 RNA复制酶l NSPS为 ORF1a和 1b的翻译产物，在 PRRSV的复制中发挥作用外，在该病的诊断和宿主的免疫反应中有一定作用l NSP2含有大量的抗原决定簇，可以被感染宿主的免疫系统所识别四、 PRRSV基因组结构1996年 -2006年在我国流行毒株为 经典美洲毒株 NSP22006年以来流行毒株为高致病性毒株NSP2缺少 90个核甘酸四、 PRRSV基因组结构四、 PRRSV基因组结构NSP2缺失 360个核甘酸（包含主要毒力基因）NSP2缺少 90个核甘酸易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株五、 PRRSV结构蛋白l PRRS