全国艾滋病检测技术规范

全国艾滋病检测技术规范篇一：全国艾滋病检测技术规范修订说明附件 2 全国艾滋病检测技术规范修订说明 本次全国艾滋病检测技术规范简称规范修订根据我国目前 HIV 检测的检测需求，结合发达国家使用的指南，主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善： （1）完善了不同的检测策略，并将其整合为独立的新的一章（艾滋病病毒实验室检测策略） 。将 09 版 HIV 抗体检测一章中检测流程全部放进本章，规范了流程图；增加了疫情监测的 HIV 匿名无关联试验流程；将 09 版阴性反应和阳性反应改为无反应和有反应（更科学） ；修改 09 版HIV 抗体筛查流程，增加了一种试剂检测有反应时，可以用原有试剂双孔双份复检程序（简化流程） ，对复检结果有反应或者一有反应一无反应的情况，增加了可以选择核酸诊断的策略（满足医院的和血站需求） ，既可以选择抗体确证，也可选择核酸诊断； 修改 09 版核酸检测流程，将 WB 不确定结果随访由 4 周改到 2-4 周（试剂敏感性提高） ，并可以进行核酸检测；新增加抗原检测流程图（发现可能的早期感染者） ；新增核酸检测流程图；修改 09 版高危人群 VCT检测流程，将 S/CO 值定义值 6 取消， （目前试剂比较多，S/CO 比值不同，无法硬性规定） ，新增高危人群快速试剂检测策略和快速+酶联试剂的检测策略（云南和我科室的研究资料支持不用 WB 在高危人群中确证 HIV 感染） ；增加了血液筛查两个流程，血液 HIV 血清学筛查试验流程和血液核酸 HIV 试验流程（血站在用的，可以了解血站的检测流程） ；修改了 09 版艾滋病感染产妇所生儿童 HIV 感染早期感染检测流程，出生后 6 周采集血，制备干血斑，而不用 EDTA 抗凝的全血（简化运输危险性和费用） 。（2）增加了 HIV-1 新发感染检测一章（原来规范里的内容简单，本次充实内容，增加了新的亲和力检测新发感染的方法） 。 （3）新增补充试验概念,其内容包括抗体确证试验（WB，RIBA/LIA）和核酸试验（定性和定量试验） 。 （4）完善 HIV-1 抗原检测一章，细化了定性试验的种类，完善了相应检测方法的质控。 （5）完善了检测报告。将抗体筛查和复检报告整合为 HIV 抗体筛查检测报告，增加 HIV-1 核酸检测报告和婴儿感染早期诊断检测报告， 取消了流行病检测 HIV 抗体检测报告单、艾滋病病毒抗体检测数和阳性人数统计报表、艾滋病职业暴露个案登记表和艾滋病防治工作人员职业暴露事故汇总表。 （6）取消实验室生物安全一章和艾滋病检测实验室质量管理一章。所有附表的检测报告仅供使用实验室参考。（已经有相关的文件可以参考） 。 篇二：疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范疾病预防控制中心艾滋病检测技术规范 为了加强对我县艾滋病检测工作的管理，规范检测技术，提高检测工作质量，根据 全国艾滋病检测技术规范 ，特别制定本单位的艾滋病检测技术规范。 一、检测机构及人员 由检验科承担检测任务，检测人员有：赵卫华（专职）李德顺.张力争.田雅莉均 为兼职，主要承担 HIV 抗体检测初筛工作。 二.样品的采集和处理 1 血清样品的采集和处理 用一次性注射器（或真空采血管）抽取约 3ml 静脉血，室温下放置 12h，待血 液凝固.血块收缩后，再用 3000r/min 离心 15min,吸取血清备用。 2.抗凝血样品的采集和处理 用加有抗凝剂的真空采血管（或一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的 试管） ，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 3.采集样品注意事项 采集样品时应注意安全，以避免直接接触血液；直接接触 HIV 感染者/艾滋病 (AIDS)病人血液/体液的操作，应戴双层手套。 4 样品的保存 用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于-20以下，短期（一周）内进行检 测的样品可存放于 2-8 5 样品的接收 核对样品与送样单，检查样品管有无破损和遗漏。如发现遗漏应立即将存留的样 品移出，对样品管和盛器进行消毒。同时报告有关领导和专家。 检查样品的状况，记录有无溶血，微生物污染，血脂过多以及黄疸等情况，如果 污染过重或者认为样品不能接收，则应将样品完全废弃。并将样品情况立即通知送 样人。 打开标本容器时要小心，以防内容物泼溅。样品处理时若内容物可能溅出，则 应在安全柜中戴手套进行。同时应戴口罩，防护眼镜，以防皮肤或黏膜污染。 6.接收样品时应填写样品接收单。 三.抗HIV 检测的方法和程序 1.常用筛查方法是:酶联免疫吸附试验(ELISA)； 原理:双抗原夹心法(略) 实验准备: 实验开始前将试剂盒和样品放置在室温(1823),按实验室 SOP 做好试剂准备。 2.实验操作程序: 1) 设空白对照 1 孔,阴性对照 3 孔,阳性对照 2 孔。 2) 加阴.阳性对照.待检血清，加样量均为 50ul,混匀，封板，置 37 温 育 30 分钟后，洗板 5 次，拍干板孔内洗涤液。 3) 除空白对照外,每孔加入酶标记物 50ul,置 37温育 20 分钟后,洗板 5 次,拍干各孔内洗涤液。 4) 每孔加入显色液各 50ul,混匀,3710 分钟,每孔加入 50ul 终止液。 5) 用波长 450/630nm,比色定量.(打印出实验结果)。 6) 报告: 对呈阴性反应的结果,出具 HIV 抗体阴性报告; 对阳性反应的 样品不能出具阳性报告结果,可出具“HIV 抗体待复检”报告.同时附试验测试 OD 值。 3.初筛试验呈阳性反应样品的转送 填写“HIV 抗体复查送检单”经检测者和技术审核者签字后。将样品一同送 市艾滋病中心实验室，再转送确认实验室，或在本实验室复检后直接送确认实 验室。 抗体筛查检测流程图 四.质量控制;1.质控血清的制备和保存 1) 内部对照质控血清以试剂盒内提供的阴性和阳性对照血清为内控血 清。而且只能同批号的试剂盒中使用。 2) 外部对照质控血清以省确认实验室获取，要严格按有关要求条件保存备用。 2.质控图参数的建立和绘制（参照规范第 42-44 页实施） 五实验室安全防护： 1.个人防护及保健 1) 艾滋病实验室应配备一次性手套，口罩，专用的工作鞋，一次性鞋套， 安全防护眼镜及冲洗眼睛的装置。 2) 高标准的个人保健对减少感染的危险性非常重要。对有皮肤损伤，患 病者均不得从事抗HIV 检测工作。 2.进入实验室要摘除首饰。修剪长的带刺的指甲，以避免刺破手套。 3.进入实验室应穿隔离衣，戴手套。如果接触物传染性大，则应戴双层手套和防护眼镜。 4.离开实验室前必须脱去隔离衣，并洗手。 5.严禁在艾滋病实验室内进食，吸烟和化妆。 六.废弃物处置和消毒 1.废弃物处置 从艾滋病实验室出来的所有物品，包括不在需要的样品，吸头，试剂盒和其他物品，均应视为感染性废物，应置于专用的密封防漏容器中，并进行高压消毒（121,20分钟）后，将废弃物交医疗垃圾回收站再行处理。 长用的消毒方法 1) 高压蒸汽消毒：121保持 1520 分钟。 2) 含消毒剂次氯酸钠（含有效氯：XX5000mg/l）.84 消毒液。75% 乙醇，保持 1030 分钟。 七.艾滋病的职业暴露后预防 1.急救处理 1) 刺激出血：职业暴露的紧急处理，只要情况允许，应实行急救。如 皮肤有伤口或不小心被采血针刺人皮肤，应反复轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液。 2) 清洗：用肥皂和清水反复冲洗伤口或玷污的皮肤。如果是黏膜暴露， 应以生理盐水（或清水）反复冲洗。 3) 受伤处的消毒与 包扎：清洗后的伤口应用消毒液（如 75%酒精， XXmg/L 次氯酸钠，%碘伏等）浸泡与涂抹消毒，并包扎伤口。 4) 由于暴露后无采取急救措施对职业暴露后 HIV 感染有一定影响，故 应尽量为受伤者到就近二级以上医疗机构，以求正确护理伤口和暴露后补救处理。 2.登记、检测 1) 职业暴露登记制度：职业暴露事故发生单位应建立“艾滋病职业暴露 人员个案登记表” （附表七） ，对职业暴露情况进行登记保存和上报。 2) 监测暴露源：如果暴露源没有阴性或阳性的血清检验结果，应立即检 测，先用快检，因其结果可在几十分钟内得到。 3) 检测职业暴露者：将其血清样送省 HIV 检测确认实验室检测职业暴露 者的 HIV1/2 抗体（包括快检） ，该血清留样备用。 3.保密和报告制度： 1) 保密制度：对职业暴露者，均应注意做好保密工作。没一个得到信息 的机构话个人不得泄露职业暴露者事故所有信息，否则按相关要求处理。2) 报告制度：职业暴露者有县疾病预防控制中心及时将填报的“艾滋病 职业暴露人员个案登记表”报至省疾病预防控制中心。篇三：艾滋病检测点标准操作规程(参考范本)HIV 抗体检测标准操作规程（SOP 文件） 1、目的： 为了规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行，保证艾滋病抗体检测的准确，确保实验室生物安全，特制定本操作规程。 2、适用范围： 适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。 3、职责： 各检测工作人员按标准操作规程进行艾滋病抗体检测，本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。 4、标准操作程序： 样品的采集和处理 样品的采集： 血清样品采集：用真空采血管抽取 5mL 静脉血，室温下自然放置 1-2 小时，待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp 离心 15min，吸出血清备用。 抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 采样注意事项： 采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。 采集标本时应注意安全，直接接触 HIV 感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。 样品的保存： 用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20以下，短期（1 周）内进行检测的样品可存放于 2-8。 样品的运送： 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。 将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 样品的接收： 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。 检验方法和步骤 快速检测法（胶体金法） 原理 采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定血清样本中的 HIV1+2 抗体。 操作步骤 将标本平衡至室温。 将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上并编号（与样本编号相对应） 。用微量加样器取试剂说明书规定的样本血清或血浆，加到测试卡的加样处。 在试剂说明书规定的时间内观察结果。 结果判定： 阳性：在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。如果检测区的条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他厂家的试剂确认。 阴性：只在对照区出现一条紫红色条带。 无效：对照区未出现紫红色条带。 注意：在规定的时间内不论测试区内的色带颜色深浅与否均应判为阳性。 仪器的使用和维护 设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转；根据使用情况更换必要的部件：(来自: 小龙文 档网:全国艾滋病检测技术规范) 冰箱 定期检查温度并作好记录，必须每天检查和记录冷冻和冷藏室的温度。 定期检查其他仪器设备。 HIV 抗体筛查结果的记录、解释与报告 筛查试验呈阴性反应出具 HIV 抗体阴性报告。 筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV 抗体待复检”报告，不能出阳性报告。同时应尽快进行以下处理： 填写 HIV 抗体筛查报告，经检测者、复核者和签发者审核签字。 尽可能重新采集受检者的血样。 将二份血样（或仅原血样，特指无法采集受检者血样时）连同 HIV 抗体筛查报告一并送当地艾滋病筛查实验室。做好检测后咨询。 保密程序 要有专人负责妥善保存各种实验记录，不得擅自修改和销毁。严格遵守保密制度，未经省级卫生行政部门许可，不得向无关人员或单位提供任何情况。 检测的阳性结果不是最终结果，应及时做进一步确认，HIV 抗体检测点不能出具 HIV 抗体阳性的结果报告，更不能告知受检者本人。 实验室的清理和消毒 带入和带出实验室的物品 对所有带入实验室的物品都应进行检查。含有测试样品的包裹应在实验室的专用实验台上打开。 将 HIV 测试样品转送其他实验室时，应防止对人员和环境的污染。护送样品的人应明确接收地点和接收人，实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品已送达指定的实验室，被转入安全位置并得到妥善处理。 污染或可能造成污染的材料在带出实验室前应进行消毒。 减少利器的使用 尽量避免在实验室使用针头、刀片等利器，如果必须使用，在处理或清洗时应采取措施防止刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒处理。 最好不使用玻璃制品。 尽量使用安全针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。应将用过的针头直接放入坚固的容器内，消毒后废弃。 实验室常用物品的消毒方法： 废弃物缸：10%（v/v）次氯酸钠（含 10000 ppm 有效氯） 。 工作台面和仪器表面：75%乙醇。 溢出物：10%次氯酸钠（w/v） 。 实验室：甲醛蒸气熏蒸。福尔马林和水加热沸腾，其体积根据实验室的大小而定。 污染的台面和器具：40%甲醛水溶液，也可以用过氧化氢或过氧乙酸。 艾滋病检测实验室安全防护 建立安全制度 实验室的设备、建筑和设施的安全性应通过专家的评审。 建立安全标准操作程序，该程序应适用于现有的实验条件，并与实验室其他规章制度一致。 无论是否发生意外事故，每年都要对安全标准操作程序及其实施情况进行检查。 制定意外事故处理预案，建立意外事故的登记和报告制度。实验室主任要按照规定，对突发事件和职业暴露事故进行调查、处理和报告。 人员管理 实验室主任应了解所有工作人员。在安排工作区域时，要根据人员的工作种类和所涉及的生物材料，对实验室环境做安全检查。 新调入人员、外来合作、进修和学习的人员在进入实验室之前必须经过实验室主任的批准。非实验室人员和非实验室物品不得进入实验室。 严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体和备案制度，工作人员血清应长期保留。 所有工作人员必须经过 HIV 检测技术和实验室安全培训，包括上岗培训和复训，并接受实验室管理人员的监督。实验室的安全责任人要对工作和环境的安全负责，所有工作人员都有责任保护自己和他人的安全。 必须告知新上岗人员实验室工作的潜在危险，进行安全教育，直至有能力后方可单独工作。 HIV 检测技术人员必须参加上级单位组织的生物安全培训，并考核合格。 个人保健 高标准的个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险。皮肤的伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。 进实验室前要摘除首饰，修剪长的带刺的指甲，以免刺破手套。 进入实验室应穿工作服，戴手套。如果接触物传染危险性大，则应戴双层手套和防护眼镜。 离开实验室前必须脱去工作服并洗手。 严禁在实验室内进食、饮水、吸烟和化妆。 实验室职业暴露及应急处理 皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥皂和大量流水冲洗，