豚鼠过敏试验与中性粒细胞吞噬功能实验小吞噬_第1页
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文档简介

主讲:张莉莉E-mail:sqjcbwm 126.com病原生物学与免疫学教研室主讲:张莉莉E-mail: zhanglili1912126com病原生物学与免疫学教研室掌握豚鼠过敏实验的原理;2 熟悉超敏反应的分类。1超敏反应 Hypersensitivity速发型超敏反应I型超敏反应超敏反应分型II型超敏反应III型超敏反应 型超敏反应细胞毒型超敏反应免疫复合物型超敏反应迟发型超敏反应 型超敏反应 又称为 速发型超敏反应 ,是由特异性的IgE抗体 介导的,其主要特征为:出现快,消退也快;出现功能紊乱性疾病,不出现严重组织细胞损伤;有明显个体差异和遗传背景。静息肥大细胞 激活后 5 分钟 激活后 60 分钟荨麻疹 哮喘病发作患儿1、豚鼠:体重 200g左右的幼小豚鼠;2、变应原:马血清、鸡蛋清;3、其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒精、棉球等。1.取豚鼠三只,编号标记 ; 抓取方法 :先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部,抓住其肩胛下方,以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起 。2.致敏:按 1: 10分别稀释马血清,按照下表操作腹腔注射 0.1ml。第一次注射1 2 3马血清 生理盐水马血清3.发敏:按 1: 10分别稀释马血清,鸡蛋清,按照下表,心内注射 2ml。2-3周后第二次注射1 2 3鸡蛋清 马血清马血清豚鼠 1在注射马血清 1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃,症状严重者在数分钟内死亡。而豚鼠 2、 3无任何症状。将死亡豚鼠解剖,可见肺脏极度水肿,胀满整个胸腔。1、心脏注射时,首先要固定好动物,然后于心跳最明显之处进针,感觉有搏动、注射器内有回血时再注射过敏原;2、由于动物个体反应性不同,有的反应较轻,可幸免死亡。如果再注射马血清也不出现反应,此称为脱敏状态。但脱敏状态是暂时的,大约 2周后又处于致敏状态。 熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法 通过本实验理解机体的非特异性免疫机制 吞噬作用( phagocytosis):是指细胞从周围环境摄取固体颗粒(如:微生物或较大的细胞残片)的活动。 血液中的中性粒细胞是一种小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部分。 吞噬细胞( phagocyte):主要包括中性粒细胞( neutrophil)和单核吞噬细胞(mononuclear phagocyte)两类。大吞噬细胞小吞噬细胞 大吞噬细胞 来源: 单核巨噬细胞 存在部位: 血液(单核细胞 )、全身结缔组织及小血管的基底膜组织(巨噬细胞) 功能基础: 富含溶酶体及线粒体 功能: 吞噬病原微生物(寄生虫等),死亡细胞 反应时间及寿命: 反应时间长( 48h),寿命长小吞噬细胞 来 源: 血液的中性粒细胞 存在部位: 血液、炎症部位(全身) 功能基础: 溶酶体,过氧化物酶及杀

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