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文档简介

第五章 细菌的遗传分析 一、 细菌的一般特性及基因组细菌的培养方式大 肠 杆 菌n E.coli 4.6Mb. 4288genesn E.coli K12 DNA sequence, 1997 n 90% encode proteinn 8 locations of remnants of bacteriophage genomes.n Insertion sequences (IS)大肠杆菌基因组结构二、大肠杆菌的有性生殖1、 F质粒的结构( 1)转移区( transfer region)( 2) 复制区( replication region)( 3) 插入区( insertion region)2、 F质粒在细胞内的存在形式三、大肠杆菌的突变型及其筛选四、接合与染色体作图A B C D A B C DA B C D杂交 实验Lederberg 和 Tatum 1946 , E.coli K12U型管实验排除转化2、 F+ F-3、 Hfr F-4、 F F-五、 中断杂交试验( interrupted mating experiment) 和基因定位1957, Wollman and Jacob六、转化( transformation) 和转导作图(一)转化概念:转化是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的 DNA而使受体的基因型和表型发生相应变化的现象。1、自然转化感受态的出现双链 DNA的接合和进入DNA的整合2、人工转化PEG介导的转化电穿孔法基因枪法(三)利用转化绘制遗传图(二)、转导概念:以噬菌体为媒介,将供体菌的部分DNA转移到受体菌内的现象。1、普遍性转导( generalized transduction)( 1)转导现象的发现1951年, J.Lederberg 和 N.Zinder沙门氏菌用 Phe- trp- tyr- his 与 Phe trp tyr his-原养型菌落 10-5回复突变率为 10-8 U型管实验型管实验A:Phe- trp- tyr- his 与 B: Phe trp tyr his-可滤因子( FA)FA与沙门氏菌的温和噬菌体 P22在生物学特性上的一致性:(1)P22的侵染力与和 FA的遗传力均可被 脱氧核糖核酸酶和胰蛋白酶 破坏(2)用 抗 P22或用加热的处理 均可使 P22的侵染力和FA的遗传能力失活,失活速率相同。(3)用 抗 P22的菌株作亲本 进行上述混合培养, FA丧失侵染能力,不能出现重组体。(4)P22和 FA在 大小和质量上相同 。FA的生物学特性普遍性转导( generalized transduction)A 细菌B 细菌进入裂解周期时,由于噬菌体颗粒的错误包装 ,将 A菌部分染色体片段包装入噬菌体,形成转导噬菌体 。普遍性转导的应用共转导是指两个处在同一个转导片段上的基因一起整合进受体染色体中。共转导频率越高,两个基因间的距离越近,连锁越紧密。共转导判断基因间连锁关系2、局限性转导(

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