蒸发光散射检测器

UM-3000蒸发光散射检测器Evaporative Light Scattering Detector, ELSD产品背景l 国家 “十五 ”项目，于 2004年开始研发以国际最先进仪器指标为参考，自主研发l 2006年完成样机并提供给企业及高校试用针对市场需要优化仪器性能和硬件设计l 2007年 5月正式通过国家科技部验收l 是唯一自主研发的国产化蒸发光散射检测器ELSD仪器特点l 通用型检测器样品无需具有光吸收特性，可解决 HPLC的检测难题，如磷脂、糖类、未衍生的脂肪酸和氨基酸等，无需柱前、柱后衍生；l 质量型检测器信号响应与样品质量相关，可获得 未知物 的质量信息l 广泛的溶剂和梯度兼容性多溶剂梯度可获得稳定的基线，无溶剂峰干扰，受温度影响小l 分离复杂样品时，流动相中可适当添加改性剂如：醋酸铵、冰醋酸、甲酸、 TFA，氨水、三乙胺等上海通微 UM 3000 ELSD 特点l 低温雾化和蒸发 减少化合物的挥发，同时检测半挥发性和不挥发性化合物 对热不稳定化合物亦可有较好的灵敏度 高灵敏度和低噪音l 专利技术检测光锥设计l 辅助载气提高灵敏度，避免检测池污染l 采用质量流量计进行高精度气体流量控制，保证雾化的稳定性和重现性；l 高精度温度和压力控制，保证分析精度l 高精度信号采集l 精密电源 可以满足仪器稳定工作的要求l 可与任何 HPLC系统相联 UM 3000 ELSD提高灵敏度的技术l 辅助气路，使样品聚集；l 雾化管和蒸发管设计，保证流动相被完全蒸发，噪音低；l 采用激光光源，能量高；l PMT的使用，灵敏度高；ELSD结构原理图 蒸发室Evaporation Chamber雾化室Nebulization Chamber雾化器Nebulizer载气入口Gas Inlet虹吸管Siphon光源Light Source光阱Light trap排气口Exhaust vent探测器Detector流动相入口Mobile Phase inlet辅助载气Auxiliary Gas雾化蒸发检测雾化过程UM 3000 ELSD通过对气压的精确控制，确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸发所需要的温度大大降低。液体流动相在载气压力的作用下在雾化室内转变成细小的液滴，从而使溶剂更易于蒸发。液滴的 大小 和 均匀性 是保证检测器的灵敏度和重复性的重要因素。液体入口气体入口蒸发过程载气把液滴从雾化室运送到漂移管进行蒸发。在漂移管中，溶剂被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。UM 3000 ELSD采用 低温 蒸发模式，对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的灵敏度。 检测过程溶质颗粒气流从漂移管出来后进入光检测池，在检测池发生光散射作用，通过光电倍增管进行收集溶质颗粒在进入光检测池时被辅助载气所包封，避免溶质在检测池内的分散和沉淀在壁上，极大增强了检测灵敏度，降低了检测池表面的污染。l 蒸发温度和雾化温度的温控处理l 气路流量的闭环控制l 外部命令和参数的实时接受、 判别和解析 处理l 显示的实时性处理，键盘的响应实时性处理l 温度、压力、流量、 PMT信号的数据采集和数据处理控制软件的主要功能注意事项l 只能使用可挥发流动相l 样品挥发性要低于流动相操作条件 15C 35C，相对湿度 90% 蒸发区温度范围 室温 130C温度控制精度 1C气体要求 氮气或空气溶剂流速 10 l 3 mL/min气体输入压力 2 5 bar 气体压力测量精度 0.01bar气体消耗量 1 4 L/min电源要求 220VAC, 50Hz光源 650nm激光二极管检测元件 PMT检测极限 1 ng （葡萄糖，直接进样）噪音水平 0.1 mV (1ml/min ) 计算机接口 RS232显示 LCDUM 3000 ELSD 性能指标企业名称 UNIMICRO ALLTECH EUROSEP SOFTA SEDEX SFD PL ESA产品型号 UM3000 ELSD 2000ES DDL31 Model 400 SEDEX 75 ZAM 3000 ELSD2100 Chromachem光源 激光二极管 激光二极管 卤素灯 激光器 卤素灯 卤素灯 发光二极管 卤素灯波长 650nm 650nm 650nm检测元件 光电倍增管 硅光电二极管 光电倍增管 硅光电 二极管 光电倍增管 光电倍增管 光电倍增管 光电倍增管 蒸发区温度范围室温 130 室温 120 最高 150 室温 120C 室温 80 室温 80 室温 120 最高 150 ，温度变化增量1 1 1 1 1气体消耗量 1.0 4.0 l/ min 4.0 l/ min 6.0 l/min 约 2.5 l/min 3.0 l/min 3.25 l/min 1.0 2.0l/min气体压力范围2 5 bar 4.5 5.5 bar 1 2 bar 4.0 5.5 bar 2.0 4.5 bar 4 7 bars 1 2 bar流动相流速 0.01-3 ml/min 0 5ml/min 4ml/min 0.05 5ml/min 0.1 5ml/min 5ml/min 0.02 4ml/min检测限 1ng葡萄糖 1ng葡萄糖 2ngGlucopyranoside0.1 ng(HPLC)1ng 1 ng 葡萄糖噪音水平 0.1mV 1mV 1mV 1 mV各品牌 ELSD性能对比与其他检测器的比较l 示差折光检测器（ RI）l 紫外检测器（ UV）l 荧光检测器（ FLD）l 质谱（ MS）与示差折光检测器比较示差折光检测器 蒸发光散射检测器基线受温度影响 不受周围温度影响正向反向峰同时出现 通常为正向峰不能使用梯度 可进行梯度洗脱流动相影响检测 对流动相无响应灵敏度低 纳克级灵敏度与紫外检测器比较紫外检测器 蒸发光散射检测器检测有紫外可见光吸收的样品 检测挥发性低于流动相的样品对样品的检测受吸光系数影响 不同样品信号响应系数接近低波长基线随梯度变化产生漂移 梯度变化基本不影响基线流动相选择受紫外吸收限制 可使用所有挥发性流动相与荧光检测器的比较荧光检测器 蒸发光散射检测器具有荧光集团或对样品进行衍生样品无需衍生与质谱比较质谱 蒸发光散射检测器高价格高运行成本 低价格低运行成本操作复杂 操作简单维护费用高 维护费用低结果侧重结构信息 更多准确的量化信息常用检测器的对比ELSD UV RI MS应用范围 通用 有光吸收的化合物 通用 通用响应 质量相关 化学相关 折光度相关 质量相关灵敏度 高 高 低 高未知物检测 能 不能 能 能梯度相容性 好 一般 差 好溶剂兼容性 好 一般 差 好基线稳定性 好 较好 差 好中国药典 2005版规定须使用 ELSD检测的药品产品名 检测化合物 药典中所在页数 1 黄芪 黄芪甲苷 一部 P212 2 炙黄芪 黄芪甲苷 一部 P213 3 银杏叶制剂中萜类内酯 白果内酯 一部 P220 4 银杏叶提取物 银杏内酯 A，银杏内酯 B，银杏内酯 C，白果内酯 一部 P2815 银杏叶片 白果内酯 一部 P5976 地肤子 地肤子皂苷 Ic 一部 P817 知母 菝葜皂苷元 一部 P1488 浙贝母 贝母素甲，贝母素乙 一部 P2059 路路通 路路通酸 一部 P24810 薏苡仁 甘油三油酸酯 一部 P26011 乙肝宁颗粒 黄芪甲苷 一部 P29012 三金片 羟基积雪草苷 一部 P32613 玉屏风口服液 黄芪甲苷 一部 P40914 补中益气丸（水丸） 黄芪甲苷 一部 P480中国药典 2005版规定须使用 ELSD检测的药品产品名 检测化合物 药典中所在页数 15 硫酸卡那霉素 卡那霉素 二部 P725 16 硫酸卡那霉素注射液 卡那霉素 二部 P725 17 硫酸卡那霉素滴眼液 卡那霉素 二部 P725 18 注射用硫酸卡那霉素 卡那霉素 二部 P726 19 硫酸依替米星 依替米星 二部 P741 20 硫酸依替米星注射液 依替米星 二部 P741 21 注射用硫酸依替米星 依替米星 二部 P742 22 硫酸庆大霉素 庆大霉素、小诺霉素 二部 P731 23 硫酸庆大霉素片 庆大霉素、小诺霉素 二部 P731 24 硫酸庆大霉素注射液 庆大霉素、小诺霉素 二部 P731 25 硫酸庆大霉素颗粒 庆大霉素、小诺霉素 二部 P732 26 硫酸庆大霉素滴眼液 庆大霉素、小诺霉素 二部 P732 应用实例UM3000 蒸发光散射检测器HPLC-ELSD分析黄芪甲苷色谱柱： Unimicro C18 流动相：乙腈：水 流速： 1 ml/min蒸发温度： 40 载气流速： 3 L/min中药复杂体系， ELSD均能检出！黄芪甲苷HPLC-ELSD分析银杏色谱柱： unimicro C18 流动相：正丙醇：四氢呋喃：水 =1： 25： 74 流速： 1ml/min 柱温： 30 蒸发温度： 100 载气流量： 2.5 L/min银杏内酯 白果内酯 银杏内酯A银杏内酯BHPLC-ELSD分析卡那霉素 硫酸庆大霉素庆大霉素小诺霉素C1a C2C2aC1HPLC-ELSD分析未衍生 20种氨基酸1、甘氨酸（ Gly）， 2、丝氨酸、（ Ser）， 3、天冬氨酸（ Asp）， 4、谷氨酰胺（ Gln）， 5、苏氨酸（Thr）， 6丙氨酸、（ Ala）， 7、谷氨酸（ Glu）， 8、半胱氨酸（ Cys）， 9、胱氨酸（ Cys）， 10、脯氨酸（ Pro）， 11、赖氨酸（ Lys）， 12、组氨酸（ His）， 13、缬氨酸（ Val）， 14、精氨酸（ Arg）， 15、甲硫氨酸（ Met）， 16、酪氨酸（ Tyr）， 17、异亮氨酸（ Ile）， 18、亮氨酸（ Leu）， 19、苯丙氨酸（ Phe）， 20、色氨酸（ Trp） HPLC-ELSD分析糖类流动相： 乙腈：水 =70： 30 流速： 0.6mL/min 柱温： 40 载气流量： 2.5L/min 蒸发温度： 100 果糖 葡萄糖蔗糖HPLC-ELSD分析油脂类化合物色谱柱： Kromasil 硅胶柱 流动相：正己烷：异丙