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文档简介
实 验 四一、血沉测定二、 HCT测定及贫血分类三、 Ret计数*四、红细胞平均直径测定一、血沉测定n概念 红细胞沉降率简称血沉( ESR),指在规定的条件下,离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。 血沉测定实际上是测量单位时间内红细胞下沉后血浆段的距离。临床意义n 血沉测定对临床诊断有一定的参考价值,但并无特异性。 1、生理性增快:年龄(新生儿偏低, 50岁以上 FIB , ESR );性别(女大于男);月经期、妊娠 3个月以上, FIB , ESR 2、病理性增高: ( 1)动态观察病情变化(风湿热、结核病活动期或静止期 ); ( 2)良性肿瘤与恶心肿瘤鉴别的参考(良性时多正常,恶性时多增快,晚期或转移明显增快); ( 3)功能性病变与器质性病变的鉴别(心绞痛多正常,心肌梗死时增快 )3、 血沉减慢: 真心红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、充血性心力衰竭、红细胞形态异常等。影响因素1、 RBC本身的因素(大小、形态、 HB含量 ) :大红细胞、红细胞贫血等2 、血浆因素: Fbg 、 CHOL、 TG、 r- Globulin、 a、 - Globulin均 ESR。3、 药物、病毒、代谢物等均 ESR4、 标本溶血、血沉管倾斜、温度过高5、 Albumin 、卵磷脂均 ESR。 实验操作过程 1、实验器材准备 2、试管中加入 106mmol/l枸橼酸钠 0.4ml 3、静脉抽血 1.6ml加入试管中,轻轻混匀; 4、用血沉管吸取抗凝血至 “0”刻度,擦去 管外附着的血液,将血沉管直立于血沉架上; 5、室温静置 1小时,读取血浆段的高度, 报告方式: mm /h参考值 男 0 15 mm / 1h 女 0 20 mm / 1hHCT(红细胞比积)又称红细胞压积1、方法:温氏法二、红细胞压积测定及贫血分类 2、原理:将定量的抗凝血液置于温氏管中,用一定速度和时间离心沉淀,即得红细胞和血浆的比例,从而得知每升血液中红细胞所占体积的比值( 升 /升)。 HCT主要与红细胞的数量及大小有关,常用于帮助诊断贫血并判断贫血程度,也用于红细胞各项平均值的计算。1 根据 MCV、 MCH、 MCHC对贫血分类类型 MCV(fl) MCH(pg) MCHC (%) 病因 大细胞性贫血 100 34 32-36 巨幼贫等正常细胞性贫血 80-100 27-34 32-36 急性失血等小细胞低色素性 80 26 32 缺铁贫等 贫血单纯小细胞性 80 26 32-36 慢性感染、 贫血 中毒等贫血的形态学分类根据 MCV RDW的贫血形态学分类MCV RDW 贫血类型 常见疾病增高 正常 大细胞均一性贫血 再生障碍性贫血增高 大细胞非均一性贫血 巨幼细胞贫血 MDS正常 正常 正常细胞均一性贫血 急性失血性贫血增高 正常细胞非均一性贫血 再生障碍性贫血减低 正常 小细胞均一性贫血 珠蛋白生成障碍性贫血增高 小细胞非均一性贫血 缺铁性贫血 3、操作: ( 1)静脉采血 2ml,注入 EDTA-K2 3mg(干粉),立即混匀,即为抗凝血; ( 2)用细长的毛细滴管吸取混匀的抗凝血液,插入温氏管底部,然后将血液慢慢注入至刻度“10”处,注意防止气泡产生。 ( 3) 3000转 /min离心 30分钟 ( 4)读取读数:读取红细胞段高度,以还原红细胞层表面为准,再以 3000转 /min离心 5分钟,如读数不变,表明红细胞已压实,即可按此数值计算 HCT; 5) HCT 红细胞段高度的 mm数 0.01, 即得每升血液中红细胞体积的升数,单位以升 /升表示。三、 网织红细胞计数一、实验原理网织红细胞胞浆内残存有嗜碱性的 RNA物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后 RNA中负电荷基团与带正电荷的有色基团结合,凝聚成颗粒呈浅蓝或蓝黑色的点状、丝状或网状结构,可在显微镜下识别。计数 1000个红细胞中所有的网织红细胞数直接报告其百分比,或 红细胞计数结果报告其绝对值。网织红细胞( Ret)网织红细胞 是 晚幼红细胞脱核后到成熟红细胞间的过渡细胞,是 尚未完全成熟的红细胞,其胞浆内残存有嗜碱性的 RNA物质。 嗜碱性物质与染料凝聚成蓝色颗粒,颗粒与颗粒连缀成线,线连接成网,故而得名。 分型:丝球型、网型、破网型、 点粒型 。( 、 、 、 型)网织红细胞计数方法1、普通光学显微镜法:活体染色后推片镜检2、网织细胞计
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