广西地方标准《马尾松组培快繁技术规程》（征求意见稿）编制说明

广西地方标准马尾松组培快繁技术规程（征求意见稿） 编制说明 一、任务来源和起草单位 根据广西壮族自治区质量技术监督局关于下达 2015年第二批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知（桂质监函 2015 183 号）文件，由广西壮族自治区林业科学研究院负责起草广西地方标准马尾松组培快繁技术规程。本标准由广西壮族自治区林业厅提出，广西壮族自治区林业科学研究院林业生物技术研究所负责起草。 二、制定标准的目的意义 木材是仅次于石油、钢铁的第三大进口用汇产品，其安全问题已提上国家战略储备的重要议事日程。广西作 为首批获批的全国木材战略核心储备基地，根据广西壮族自治区国家林木战略核心储备生产基地规划，到 2020年广西计划建设木材战略储备基地 5000 万亩，净增森林蓄积量 2 亿立方米，将我区打造成面积最大、资源最多、质量最优的全国木材战略核心储备基地。 马尾松（ 系我国南方最主要的造林用材树种之一，其综合利用价值高、推广前景广阔。基于我国生态安生、资源安全与社会安全等问题，马尾松作为我国主要的工业用材树种树种，大力发展马尾松人工林很有必要。自 六五 国家科技攻关以来，我国在 马尾松良种选育和速生丰产栽培技术等方面取得了较大突破。由于气候和地理环境等自然条件的优势，马尾松在广西生长性状表现较佳。广西林科院多年来一直从事马尾松良种选育方面的工作，选育出的大批速生、优质、高产、高抗优良马尾松种源、家系，在全国很多省（区）均有引种栽培。然而，近年来马尾松种子园母树老化，种子产量急剧下降，良种匮乏，不能满足当前生产需要。为解决良种苗木供需矛盾，通过植物组培技术进行马尾松优良无性化壮苗繁育最为有效。 2014年依托广西林科院的院士工作站，在自治区政府和我院各级部门的高度重视与大力支持下，申 请立项了广西科学研究与技术开发计划的院士合作项目 “马尾松组培育苗关键技术创新与集成应用 ”。通过项目实施，突破了马尾松生根困难的世界难题，建了一套快速、高效的马尾松组培育苗技术体系，实现了马尾松组培无性化苗木的规模化生产，并在广西全区开展了马尾松组培无性化试验示范林营建。这标志着马尾松组培育苗技术正处于从实验室走向产业化的关键时期，有望引领广西马尾松无性化育苗产业发展，推动广西林业经济发展。 该标准符合国家产业政策和生态环境保护的要求，实用性、可操作性强，可为马尾松无性化育苗产业提供强有力的技术支撑，对如何大 规模繁育马尾松无性化苗木在广西少走弯路、提升马尾松良种壮苗的质量、加快推进马尾松产业发展起到指导作用，是实现马尾松无性育林健康、快速、可持续发展的重要基石。 三、国内外标准对比情况 马尾松组织培养困难，目前国内外尚未见任何有关马尾松组培苗生产与应用方面技术规程的发布。通过揭示马尾松不定根发生机理，本单位创建了高效、稳定的马尾松组培育苗技术体系，实现了马尾松组培无性化苗木的规模性生产，并在广西全区开展了广泛的推广与栽培应用示范，效果良好。现国内外并无马尾松组培育苗的标准，制定马尾松组织培养快繁的标准，对广西松 树产业的良性发展具有指导性意义；且与国内同类标准比较，本标准具有内容全面、系统性及可操作性强等特点。 四、送审稿编制过程 广西林科院生物所自 2014 年承担广西科技厅院士工作站项目马尾松组培育苗关键技术创新与集成应用项目以来，先后申请了马尾松组织培养方面的发明专利 11 件，获授权发明专利 5件： （ 1）一种促进马尾松组培继代芽生根方法（专利号： （ 2）马尾松组培苗瓶外生根方法（专利号： （ 3）马尾松优良单株无菌外植体制备及初始芽诱导 方法（专利号： （ 4）南方松丛芽诱导及继代增殖培养方法（专利号： （ 5）一种高脂松树茎段组培芽诱导和增殖培养的方法（专利号： 为马尾松组培快繁技术规程中外植体消毒、始芽诱导、继代培养与不定根发生等关键技术环节，提供了可靠而科学的参考。 按照广西壮族自治区质量技术监督局关于下达 2015年第二批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知（桂质监函 2015 183 号）文件通知精神，为做好标准的编制工 作，我单位成立标准起草工作小组；部署了制标工作方案和小组成员分工负责标准起草工作时间安排表，全面启动了我单位开展 马尾松 组培快繁技术规程广西地方标准的编制工作。 2015年 1月至 3月，课题组对多年来的研究资料进行了汇合、分析和总结，并查阅了大量的国内文献资料，对原起草的企业标进行了完善、补充和进一步修订，确定了广西地方标准的基本内容和思路。并经过编制小组成员反复研讨，形成了 马尾松 组培快繁技术规程标准的编制原则及纲要。 2015年 9月，经编制小组成员的反复讨论和写作、修改，完成了 马尾松 组培快繁技术规程广西地方标准的征求意见稿。 2015年 10月至 12月，开展全社会广泛征求意见工作。 2016年 3月，收集到相关领域专家的修改意见，经编制小组成员的反复讨论和修改，完成了 马尾松 组培快繁技术规程广西地方标准的送审稿。 五、关键技术指标依据和来源 1、环境要求 组培实验室必须是具备有准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、出苗室以及缓冲间在内的标准化组培实验室。空气质量必须符合 境空气质量标准规定。操作过程中所用水符合 T 6682分析实验室用水规格和试验方法规定。 2、无菌 接种操作 工作人员在进入接种室前必须经过全面消毒，所用的一切器具必须经过消毒杀菌。必须配备有酒精、酒精灯、抗菌素、高温灭菌炉、紫外灭菌灯、臭氧发生器等灭菌药剂和设备。实验室大空间采用紫外线照射或甲醛和高锰酸钾熏蒸的方法进行灭菌，小空间采用紫外照射配合臭氧进行灭菌，器具采用 75%酒精擦拭或者酒精灯、高温灭菌炉灼烧等方式灭菌。外植体则采用 70%酒精浸泡结合 汞进行消毒。灭菌要求符合 1995 消毒与灭菌效果的评价方法与标准规定。 3、外植体的选择和处理 外植体选用健康无毒且性状稳定的 马尾松 成 熟 种子 、茎干进行组培。外植体收集回来后必须用无菌水清洗干净，然后进行消毒处理。来源参考 姚瑞玲，王胤，苏烜，雷军芳 . 马尾松优良单株无菌外植体制备及初始芽诱导方法 P. 国家知识产权局，专利号： 4、初代培养 将外植体接到添加有细胞分裂素的诱导培养基上进行始芽 诱导，使其逐步形成 丛芽 。来源参考 姚瑞玲，王胤，苏烜，雷军芳 . 马尾松优良单株无菌外植体制备及初始芽诱导方法 P. 国家知识产权局，专利号： 5、继代增殖培养 将初代培养所得芽、丛芽、嫩茎等培 养物切分，接到 继代 培养基上扩大增殖，培养 继代丛 苗。来源参考 吴幼媚，姚瑞玲，蔡玲 . 南方松丛芽诱导及继代增殖培养方法 P. 国家知识产权局， 专利号： 6、生根苗培养 利用添加有生长素的生根培养基对无根苗进行生根诱导。来源参考 姚瑞玲，吴幼媚，蔡玲 . 一种促进马尾松组培继代芽生根方法 P. 国家知识产权局， 专利号：7、练苗 选择生长良好的生根苗移到室外练苗，待适应环境后再移栽到生长基质中， 苗圃培育 一般需要 4 6 个月 ， 苗高 25 径 3.0 可用于生产 种植 。 育苗 过程遵守6000 主要造林树种苗木质量分级 ， 6001育苗技术规程 ， 药合理使用准则 和 1000 容器育苗技术标准要求实施。 六、标准编制原则及技术依据 1、编制原则。课题编制遵循 “科学、适度、可行 ”原则，考虑标准前瞻性又顾及生产实际，确保标准可以作为政府部门监督、指导生产的依据，在生产上切实可行。 2、技术依据。本标准按照 2009给出的规则要求编制，并根据前期研究成果及应用资料，符合国家产业可持续发展 的有关规定。 为做好 马尾松 组培快繁技术规程广西地方标准的修改和征求意见工作，力求编制标准内容切合实际，适合于 实际科研和生产中的 工作需要，编制组经过认真考虑选择了广西大学 、 广西农业科学院 、 广西药用植物园 、 广西林业厅种苗总站 、 南宁市林科所 、 广西南宁树木园 、 梧州市林业局 、桂林市林业学校 、 广西国有博白林场 、 广西国营 六万 林场 、广西国有黄冕林场作为标准征求修改意见单位，并于 2015年 10 月下旬向上述单位致函征求修改意见。到 2015 年 12月 31日止，上述 11 家单位全部填写修订意见表纸质文档反馈编制组，共收到来自上 述单位及专家提出的修改意见共 61条（目）。 2016 年 1 月至 2016 年 5 月，编写人员对收集到的修改意见内容进行讨论，并对征求意见稿进行修改和完善，在此基础上形成了 马尾松 组培快繁技术规程广西地方标准的送审稿。 七、结束语 该标准按国家标准化要