红腺忍冬组培快繁技术规程(征求意见稿)

38 西壮族自治区 地方标准 2017 红腺忍冬组培快繁技术规程 （征求意见稿） 2017 - 布 2017 - 施 广西壮族自治区质量技 术监督局 发布 2017 I 前 言 本标准按照 2009 给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区卫生和计划生育委员会提出。 本标准由广西卫生标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区药用植物园 。 本标准主要起草人： 2017 1 红腺忍冬组培快繁技术规程 1 范围 本标准规定了红腺忍冬 （ 组培快繁 技术、病虫害防治、包装、运输、生产档案等内容 。 本标准适用于广西 壮族自治区 境内 红腺忍冬的组培 快繁 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 285 农药安全使用标准 5569 农业植物调运检疫规程 6001 育苗技术规程 2306 花卉种苗组培快繁技术规程 3 组培快繁技术 植体材料 以红腺忍冬实生 幼嫩 苗 （具 4片 6片真叶） 为 组织培养的 外植体。 植体材料的准备 子取材 于当年 10月底 11月初采 集 红腺忍冬成熟浆果 ， 常温环境下带回组培室 。 录 每份种子 材料 记录品种名称、种植地点、海拔高度 、生长 环境概况、取材时间、取材人等 信息 ，建立档案 信息。 子发芽 床选址 、构建及灭菌 选择背风向阳、排灌良好的地方搭建育苗大棚，配备 70 80 遮阳网和防虫网。 发芽床宽 1 m，长 10 m 15 m。 用泥碳土、菜园土、珍珠岩按比例为 2:1:1搅拌均匀后作为 基质 ，对基质淋施 0.5 g/.8 g/行消毒 ， 15 d 20 准备好的 基质装进 300 整齐摆放于苗床上 备用。以上苗床面积符合 6001的规定， 农药使用符合 285的规定。 00 种子 浸泡液 ）配 制 2017 2 200 种子 浸泡液 ） 的 配 制： 准确称取 .2 g(精确至 g)， 加少量 无菌 水溶解后 ， 再加 无菌 水定容至 1 000 可得 200 子前处理 将采集到的红腺忍冬 成熟浆果 经 4 低温 贮藏 5 出 饱满 种子， 用自来水 漂洗 掉 杂质 ， 于 200 种子 浸泡液 ） 中 浸泡 种子 24 出 ， 稍微沥干种子表面水分 后 及时播种 。 种 将 种子及时播种于 苗床上 营养杯装基质中， 并 覆盖一层 0.3 40目筛的细河砂 ， 喷浇足够 水分，大 棚 室内自然环境培养。培养至第 110 ， 得到 具 4片 6片真叶的 实生苗 作为组织培养外植体。 植体 灭菌消毒 菌 消毒液配置 升汞 ： 准确称取升汞 （ 1 g， 加少量 无菌 水溶解后 ,再加 无菌 水定容至 1 000 可。 75 的酒精： 750 5 的酒精加水定容至 950 植体 灭菌 消毒 前 处理 剪取 发芽床上 具 4 片 6 片 真叶的 实生苗 为外植体 ，取 下胚轴以上部分 枝叶 ， 用 洗洁精水 轻轻 刷 洗 表面灰 尘杂质 后， 于线状自来水 下流水 冲洗 30 接着 沥干 外植体 表面水分， 放入灭菌玻璃瓶内，每瓶材料所占空间不超过瓶子容积的 1/3。 菌 消毒 于超净工作台上 用 75 酒精 浸泡 30 无菌水冲洗 3 次 ， 接着用 添 加有“吐温 等表面活性剂的 泡 5 菌水冲洗 6 次， 之后 用无菌吸水纸 吸干表面水分 。 植体 接种 于超净 工作台上剪掉 灭菌 消毒 后 的 外植体 旧切口 及 多余的叶片以防污染 ， 将新切口端斜插入 外植体 诱导培养基 （参见附录 A 的 中 ， 芽 与腋芽 端 朝上， 拧紧瓶盖 。 导培养 将接种好的材料做好 信息 记录，及时放入培养室 的培养架上 培养。在接种 3 d 5 查培养材料有无真菌和细菌污染。待 外植体新 长出 3片 以上功能叶时进行是否带毒检测，及时清除带病小苗。 生 芽 培养 将诱导培养出的 生长健壮的 一定高度的 无菌 组培 苗 芽 ， 剪取带一个腋芽的茎段及顶芽 ， 以微扦插法 接种于 丛生芽诱导 培养基 （参见附录 中 培 养 。 代 培养 将诱导培养出的 一定高度 生长健壮的无菌 组培 丛生 芽 ，剪取带一个腋芽的茎段及顶芽 ， 以微扦插法 接种于 继代 培养基 （参见附录 中培养。 根 培养 2017 3 将 一定高度 生长健壮的继代 组培 苗芽 及诱导 组培 苗芽 ， 剪取带一个腋芽的茎段及顶芽，以微扦插法 ，接种于 生根培养基（参见附录 中培养。 伤组织培养 剪取 一定高度 生长健壮的 组培 苗 未木质化部分的 无腋芽茎段 ，横放于愈伤组织诱导 培养基 （参见附录中培养。 伤组织不定芽诱导培养 剪取 一定高度 生长健壮的 组培苗未木质化部分的 无腋芽茎段 ，横放于愈伤组织 不定芽 诱导 培养基 （参见附录 中 培养。 养条件 参考 2306中的培养室环境要求，红腺忍冬 培养室 温度为 25 3 ，相对湿度为 50 75 ，光照为 12 h/d，光照强度为 2 000 3 000 培苗培育 床选址 、构建及灭菌 参见 苗 选择具 5张以上完全叶， 根数 3条，根长 2 长健壮 、 叶色浓绿 的 带根瓶苗，在室温为 24 26 ， 光照强度为 2 000 3 000 室大棚中 封口培养 2 d 3 d，之后 打开瓶盖，加入 高于培养基表面 0.5 来水 ， 每天早、中、晚对所炼 的苗各进行 1次喷雾保湿，此条件下炼苗 5 d 7 培苗逐渐适应自然环境 ，炼苗过程中污染 株应 剔除 。以上育苗技术符合 6001规定。 苗 轻 轻 取出 经过 炼 苗 阶段 的组培苗， 用 24 26 自来水 轻轻漂洗干净组培苗表面的培养基 等 杂质 。 栽 将 洗好的经过炼苗阶段的组培 苗移栽至苗床上的 杯装 移栽 基质中， 移栽 基质以刚盖过组培苗基部为宜，稍压实， 苗不倒即可， 浇透 定根水，并标记材料名称及移栽日期。 间管理 境条件 移栽初期， 温室大棚 温度控制在 20 30 、相对湿度为 80 95 、光照强度为 2 000 3 000 终稳定在 50 60 的自然光照强度下培育苗木至出圃。 水 施肥 移栽后，移栽基质表面发白时即可喷淋浇水， 移栽 3周 后的 生长季节 里，每周 喷施 的复合肥 1次 。移栽 6周 时 统计成活率。 4 病虫害防治 2017 4 移栽后，根据病虫害实际发生情况，按 285的规定选用合适的杀虫、杀菌剂品种进行防治。 5 包装 出圃苗按苗高整齐分装入规格统一、高出苗顶面 5 上的竹筐或塑料筐内，并及时浇透水，在装载物外表面 贴上标签， 标注有品种名称、质量指标、 等级规格、数量、产地、 生产日期、 目的地、 种苗经营许 可证编号、检疫证明编号、生产单位名称、 地址 、联系人等 。以上检疫符合 5569规定。 6 运输 运输前做好植物检疫， 向外调运应附有病虫害检疫合格证书，手续随车同行；苗有序叠放，不能 过度挤压、随意堆叠；长途运输应有防风、防晒、防雨措施， 运输过程中温度保持 10 25 以 免高温烧苗。 7 生产档案 对组培快繁技术 、病虫害防治 的各环节所采取的措施进行详细记录，建立生产档案。 2017 5 附 录 A （资料性附录） 培养基配方 植体诱导 培养基 1/2 糖 30 g/L +琼脂 6 g/L+.2 （ 生芽诱导培养基 糖 30 g/L+琼脂