儿童EBV感染及相关疾病的诊断 ppt课件

儿童 EBV感染 相关疾病及诊断 1 常用名 正式命名 所属亚科 生物学特性 单纯疱疹 V-1型 人疱疹 V1型 在感染 N节中潜伏 单纯疱疹 V-2型 人疱疹 V2型 在感染 N节中潜伏 水痘 -带状疱疹 人疱疹 V3型 在感染 N节中潜伏 EBV 人疱疹 V4型 在淋巴细胞中潜伏 CMV 人疱疹 V5型 在淋巴细胞及分泌腺 体中潜伏 人疱疹 V6型 人疱疹 V6型 同上 人疱疹 V7型 人疱疹 V7型 同上 人疱疹 V8型 人疱疹 V8型 同 EBV 人类疱疹病毒人类疱疹病毒 2 Burkitts lymphoma in Kenya Epstein-Barr virus (EBV) 1964, discovered from Burkitts lymphoma tissue by Epstein, Achong, and Barr 1968, the etiologic agent for infectious mononucleosis 1970, nasopharyngeal carcinoma 1980, non-Hodgkins lymphoma 3 EBV n 双链 DNA病毒，疱疹病毒科， 亚科，基因组 Genome: 172282 bp，有环状和线性两种形式 n 人群感染率高，我国 35岁儿童 95%已血清转 化 n EBV原发感染在婴幼儿及学龄前儿童主要为亚 临床感染，在青少年和成人致 IM（国外） n EBV与许多疾病相关 4 Circular form of the EBV genome (latent infection) Linear form of the EBV genome (lytic infection) 5 EBV 相关疾病 n 传染性单核细胞增多症（ Infectious mononucleosis， IM） n 慢性活动性 EB病毒感染（ Chronic active EBV infection， CAEBV） nEB病毒相关性嗜血细胞综合征（ EBV- associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS) 6 EBV相关疾病 n 伴性淋巴增殖综合征 （ X-linked lymphoproliferative syndrom ） n 鼻咽癌（ Nasopharyngeal carcinoma） nBurkitts 淋巴瘤（ Burkitts lymphoma） n 何奇金淋巴瘤（ Hodgkins lymphoma） 7 B CD21 gp350 MHC-II EBV Asymptomatic infection Symptomatic infection（ IM) Primary EBV Infection Latent infection EBV-related other diseases 8 Saliva Oropharynx Lymphoid tissue and peripheral blood Resting B cell Epithelium Lytic EBV-infected B cell EBV-infected B-cell blast Reactivated EBV-infected B-cell Lytic EBV-infected B cell EBV EBV Latently infected, resting memory B cells Cytotoxic T cell Cytotoxic T cell Natural killer cell LMP-1 LMP-1 LMP-2 LMP-2 LMP-2 LMP-2 Primary infection Persistent infection EBNAs EBNAs EBNA-1 Cohen, JI N Engl J Med 343:481-492, 2004 Model of EBV infection in humans 9 传染性单核细胞增多症（ Infectious mononucleosis， IM） 10 IM IM 嗜异白细胞阳性： EBV 嗜异白细胞阴性： EBV CMV Rub HHV6 Adv 11 EBV-IM的临床表现 n 发热： 约 1周，严重者 2周或更久，幼儿可不 明显 n 淋巴结肿大：任何淋巴结，颈部最易受累 n 咽炎： 50有渗出物 ， 25上腭有瘀点 n 脾肿大：病程 2 3周， 50出现 n 肝炎：肿大 10 15，而 GPT升高 80 n 皮疹：红斑、斑丘疹或麻疹样疹， 50可有眼 睑浮肿 12 EBV-IM的临床表现 n 其它： 1.间质性肺炎 2.CNS: 脑炎、格林巴利综合征等 3.心肌炎 4.血液系统：溶血性贫血、再障、粒细胞减少 5.肾炎 6.关节炎 7.胰腺炎 13 IM的诊断 nIM的拟诊：临床表现（发热 +渗出性咽峡 炎 +淋巴结肿大、脾肿大） +异型淋巴细 胞升高（ 10） 14 EBV-IM的诊断 n 嗜异白细胞凝集抗体 n 特异性 EBV抗原的抗体检测 :衣壳抗原（ CA） IgM n 荧光定量 PCR检测外周血中 EBV-DNA 15 嗜异白细胞抗体 nIgM抗体 nIM病人的血清在经吸收几内亚猪肾抗原 后引起山羊红细胞的凝集 n 第 1 2周出现，持续约 6个月；小于 5岁 者，很可能阴性 16 外周血中 EBV-DNA检测 n 普通 PCR n 荧光定量 PCR：荧光定量 PCR检测 EBV -DNA（血清、血浆、全血、外周血单核 细胞），急性期（病程 10天内）敏感性 和特异性 100 17 衣壳抗原（ CA） IgM n 一般情况下：一周左右升高，持续存在 4 8周，类风湿因子和 IgG抗体可致结果 假阳性 n 临床要注意以下情况： 1、有的病人抗 EB病毒 CA-IgM产生延迟 2、少部分病人感染 EBV后， CA-IgM持续 阴性 3、也有的病人 CA-IgM持续几个月阳性 18 抗体亲合力检测 n 机体在受到病原体入侵时首先产生低亲 合力抗体，随感染的继续和进展，抗体 亲合力升高。因此，低亲合力抗体的检 出提示原发性急性感染。 n 原发 EBV感染， 100的病人在第一个月 内可检测到抗 EB病毒 CA-IgG低亲合力抗 体 19 原发性 EBV感染后的免疫抗体反应 IM 20 EBV抗体四项 nVCA-IgG nVCA-IgM nEA-IgG nNA-IgG nVCA-IgG亲合力 21 EBNA-IgG 阴性 VCA-IgG阳性 VCA-IgG阴性 未感染 VCA-IgM阳性 原发感染 VCA-IgM阴性 EA IgG强阳性 原发感染（ VCA-IgG 低亲合 力）、感染后复发、或感染晚 期抗 EBNA抗体降低（ VCA- IgG 高亲合力） EA IgG阴性 感染后复发或感染晚 期抗 EBNA抗体降低（ VCA-IgG 高亲合力） 22 EBNA-IgG阳性 仅 VCA-IgG阳性 晚期感染 VCA-IgG阳性 和 EA-IgG强阳性 或 VCA-IgA强阳性 或 VCA-IgM阳性 感染后复发 23 Cervical lymphadenopathy 24 Cervical lymphadenopathy 25 Hepatosplenomegaly 26 Eyelid edema 27 Palatal petechiae 28 Atypical lymphocytes 29 慢性活动性 EBV感染 30 CAEBV is characterized by severe, chronic or recurrent infectious mononucleosis-like symptoms after a primary EBV infection, and has a high morbidity and mortality from hepatic failure, lymphoma, sepsis, or hemophagocytic syndrome. 1. Unusual pattern of anti-EBV antibodies (high levels of IgG anti-VCA and EA, absence of anti- EBNA) 2. High EBV viral load in peripheral blood 3. Clonal expansion of EBV-infected T cells and NK cells 31 Historical milestones of CAEBV n 1948, Issacs: prolonged fever, malaise, lymphadenopathy, hepatosplenomegaly n 1975, Horwitz et al:such clinical manifestations with mildly or moderately high or positive IgG against VCA and EA n 1982, Tobi et al: similar atypical illness associated with serological evidence of persistent EBV infection 32 Historical milestones of CAEBV n 1984, Dubois et al: criteria for such cases termed chronic mononucleosis syndrome:(1) disabling fatigue and malaise;(2) low-grade afternoon fever;(3) variable other nonspecific symptoms: myalgias, sore throat, depression,lasting 6 months or longer, with EBV serologies of (1)VCA-IgG160, (2)EA- IgG 5, (3) postive anti-EBNA, (4)absent VCA -IgM, (5) absent Paul-Bunnell heterophil antibody. 33 发病机制 nEBV感染的 T细胞或 NK细胞克隆性增殖 n 存在的问题： 1.如何感染 T细胞或 NK细胞 2.如何引起临床症状 34 EBV-infected cells in Japanese patients with CAEBV 35 临床表现 n 发热：间断性发热 n 淋巴结肿大 n 肝脾肿大 n 间质性肺炎 n 贫血 n 肝炎 n 眼葡萄膜炎 36 37 38 Diagnostic criteria of CAEBV I. Severe illness of greater than 6 months duration that: 1. Began as primary EBV infection OR 2. Is associated with grossly abnormal EBV antibody titers (IgG to VCA1:5,120; antibody to EA1:640; or antibody to EBNA 1:2), AND (Straus S.E.) 39 II. Histological evidence of major organ involvement, such as: 1. Interstitial pneumonia 2. Hypoplasia of some bone marrow elements 3. Uveitis 4. Lymphadenitis 5. Persistent hepatitis 6. Splenomegaly, AND III. Detection of increased quantities of EBV in affected tissues by 1. Anticomplementary immunofluorescence for EBNA, or 2. Nucleic acid hybridization Reproduced from Straus S.E. (1988, J. Infect. Dis. 157:405_/412) 40 CAEBV CEBV: persistent IM-like illness with relatively good prognosis SCEBV: rather severe manifestation with generally poor prognosis 41 Diagnostic criteria of a case definition for SCAEBV Category Criteria Clinical Hematologic Virological Other Intermittent fever, lymphadenopathy, and hepatosplenomegaly Anemia, thrombocytopenia, lymphocytopenia or lymphocytosis, neutropenia, and polyclonal gammopathy Elevated antibody titers and positivity for antibodies to EBV- related antigens (VCA IgG5,120; VCA IgA, positive; EA D IgG640; EA D IgA, positive; and EA D and EA R IgG640) and/or detection of EBV genomes in affected tissues Chronic illness which cannot be explained by other known disease processesb Reproduced from Okano M., et al. (1991, Clin. Microbiol. Rev. 4:129_/135) (Okano M) 42 Revise of Criteria of CAEBV n 2001,Kimura et al. extremely high antibody titers against EBV-replicative antigens are not absolutely necessary, but demonstrated significantly increased circulating EBV-DNA n Revised virological criteria: either or both extrmely against EBV-repicative antigens and/or increased genome copies in tissues. 43 伴性淋巴增殖综合征 （ X-linked lymphoproliferative syndrom） 44 历史 n1975年， Purtilo等发现一个家系中， 18 个男性有 6个人出现良性或恶性淋巴细胞 增生和组织细胞增加等征候，取名 Duncan病 n1998年，缺陷基因被确定： SH2D1A/DHSP or SAP (SLAM-associated protein） 45 Called “Duncans disease” after the family name 46 SH2D1A n 编码含 128个氨基酸的蛋白质 - SAP (signaling lymphocytic activation molecule SLAM-associated protein), n 表达于活化的 T和 NK细胞表面，通过与 SLAM及其他免疫球蛋白超家族如 2B4等 结合，参与信号传递，调节 CTL的功能 ，如产生 IFN-gamma 的能力 47 48 临床表现 n 家族史，仅见男性 n 发病年龄从 6个月 22岁（原发性 EBV感染后 ） n IM样症状：发热、咽峡炎、淋巴结和肝脾肿大 、异型淋巴细胞增加 n 免疫球蛋白异常：无 球蛋白血症、多克隆 性高 球蛋白血症 n 高 IgM的免疫不全症 n 患者血清中 EBV抗体阴性 49 临床分型 n A型：属于急性致死性 IM,多发病 4周后死亡，占 55 n B型：同时有急性致死性 IM和恶性淋巴瘤，占 15 n C型： EBV感染后免疫机能不全、低 球蛋白 血症、骨髓增生低下、 EBV抗体能力产生低下 ，占 15 n D型：无明显 EBV感染表现而发生的恶性淋巴 瘤，占 15 50 诊断标准（ Hamilton） n 6个月至 22岁男性有 2个以上下述表现型 1. 增殖性改变 （ 1）有致死性或慢性 IM （ 2）有 B免疫母细胞性淋巴肉瘤 （ 3）有非何杰金氏淋巴瘤 （ 4） IM继发高 IgM免疫不全症 2. 非增生性改变 （ 1）粒细胞缺乏症或再生障碍性贫血 （ 2） 球蛋白异常：获得性无或低 球蛋白血症 3. 先天异常 （ 1）心血管系 （ 2）中枢神经系 51 诊断标准 n 在母系直系亲属中有 2人以上具备上述表现型 者，可诊断本征 n 本征男性的 B淋巴细胞体外感染 EBV后，能自 发的发育增殖；患者的唾液可使脐带血中的淋 巴细胞发生形态改变；患者血清中缺乏 EBV抗 体 52 鉴别诊断 nCAEBV: chronic active EBV infection nGLPD: granular lymphoproliferative disorder nALPS: autoimmune lymphoproliferative syndrome 53 CAEBV GLPD XLP ALPS Heredity ? ? X-linked AD(AR) Sex M & F M & F M M & F Gene localization ? ? Xq25 10q23 Responsible gene ? ? SH2D1A/S AP Fas/FasL/caspa se 10 Clinical manifestation LPD LPD FIM/LPD/A GL LPD VAHS + + + + Lymphadenopathy +/malig benign +/malig benign +/malig +/ benign malig Immunoglobulin High High Low High Autoimmune disease + - - + EBV-antibodies High High Low Normal-high EBV-genome High High High Normal-high