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课件制作 陆曙梅 非发酵菌 是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利 用糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰 阴性杆菌 课件制作 陆曙梅 非发酵菌主要种类 铜绿假单胞菌 不动杆菌属 产碱杆菌属 莫拉菌属 黄杆菌属 金氏杆菌属 土壤杆菌属等 课件制作 陆曙梅 非发酵菌主要特点 氧化酶:;不动杆菌属除外 O/F试验 : O/ 动力试验:多数有鞭毛,但半固体动力 试验不明显,常采用镜检或鞭毛染色 课件制作 陆曙梅 葡萄糖氧化发酵试验( O/F) O/F培养基 (半固体高层) 指示剂:溴麝香草酚蓝 培养基 pH: 7.0 O/F: O O/F: F 课件制作 陆曙梅 葡萄糖氧化发酵试验( O/F) O/F: OO/F: F O/F: 课件制作 陆曙梅 肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别 鉴 定 试验 肠 杆菌科 非 发 酵菌 弧菌科 氧化 酶 葡萄糖氧化 / 发 酵( O/F) F O F 鞭毛 周鞭毛 单 、 丛 、周 单 、 丛 课件制作 陆曙梅 假单胞菌属 假单胞菌科细菌根据 rRNA-DNA同源性 分为 5群,其中 群属于假单胞菌属,共 7种细菌,代表菌种为铜绿假单胞菌。 多为条件致病菌,是医院感染的主要病 原菌 课件制作 陆曙梅 假单胞菌属共同点 革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或 丛鞭毛 专性需氧 营养要求不高 氧化酶: O/F: O Mac生长: 产生水溶性色素 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 形态染色 革兰阴性杆菌,无芽孢、无荚膜,单或 丛鞭毛 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 培养特性 专性需氧、营养要求不高 最适温度 35 , 42 生长, 4 不生长 产生荧光素和蓝绿色水溶性的绿脓素, 培养物呈蓝绿色。 培养物有生姜气味 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 菌落特征 典型菌落:扁平湿润,边缘不规则,菌 落和培养基灰绿色,表面有金属光泽 大肠菌样菌落:菌落圆形凸起,似大肠 杆菌 黏液型菌落:菌落凸起,呈粘液状 侏儒型菌落:细小,无光泽 在血平板上形成透明溶血环 在 SS、 Mac上形成不发酵乳糖菌落 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 生化反应 氧化酶 O/F: O 枸櫞酸盐利用 精氨酸双水解 乙酰胺酶 明胶液化 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 抗原结构和抵抗力 抗原结构 O抗原:包括外膜蛋白和脂多糖 H抗原 S抗原 抵抗力: 对外界环境抵抗力强 对多种抗生素不敏感 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 临床意义 致病物质:内毒素、外毒素、胞外酶、 菌毛、荚膜 所致疾病 条件致病菌 医院感染的重要病原菌 大面积烧伤创面感染的重要病原菌 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 检验程序 标本 增菌 分离培养(血平板) 最后鉴定 可疑菌落(性状、色素) 初步鉴定 涂片 染色镜检 血标本 涂片镜检 氧化酶 菌落特征 绿脓素 气味 色素鉴定 生化反应 42 生长 分型 O/F: O 枸櫞酸盐利用 精氨酸双水解 乙酰胺酶 明胶液化 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 检验方法 显微镜检查:标本直接涂片革兰染色镜 检;鞭毛染色镜检 培养:标本接种血平板、 Mac平板分离 培养,血标本先增菌,再转种 鉴定: 初步鉴定:菌落特征、水溶性绿色色素 、生姜气味、氧化酶、 O/F 全面鉴定:色素不典型者需全面鉴定 课件制作 陆曙梅 铜绿假单胞菌 分型检查 血清学分型 噬菌体分型 质粒指纹图谱分析 脉冲场凝胶电泳 分型检查意义:对医院感染的流行病学 调查有重要意义 课件制作 陆曙梅 荧光假单胞菌 革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛 专性需氧 营养要求不高,普通平板、 Mac平板可生长 最适生长温度 25 30 , 4 生长, 35 、 42 不生长 产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿脓素 氧化酶; O/F: O;卵磷脂酶;明胶液化 具有嗜冷性,可在冰箱储存血中繁殖 课件制作 陆曙梅 恶臭假单胞菌 革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛 专性需氧 最适生长温度 25 30 , 4 生长, 35 、 42 不生长 产生水溶性荧光素(青脓素),不产绿 脓素;陈旧培养物有腥臭味 氧化酶; O/F: O;卵磷脂酶;明胶 液化 课件制作 陆曙梅 斯氏假单胞菌 革兰阴性杆菌,单端丛鞭毛或侧生鞭毛 最适温度 35 , 42 生长, 4 不生长 菌落特征:干燥、粗糙、皱缩,可产生 黄色色素,无绿脓素和荧光素 课件制作 陆曙梅 产碱杆菌属 粪产碱杆菌 木糖氧化产碱杆菌 木糖氧化产碱杆菌 氧化亚种 木糖氧化产碱杆菌 脱硝亚种 课件制作 陆曙梅 产碱杆菌属 主要特征 革兰阴性杆菌、有周鞭毛、无芽孢、无 荚膜 专性需氧 营养要求不高,普通平板和 Mac平板上 可生长 氧化酶、 O/F: K、不分解任何糖 是医院感染病原菌之一,粪产杆菌多见 检验程序 课件制作 陆曙梅 产碱杆菌属 鉴定要点 革兰阴性杆菌 氧化酶 O/F: 硝酸盐还原;亚硝酸盐还原 KIA:底层斜面不变色 注意与不动杆菌鉴别 课件制作 陆曙梅 不动杆菌属 主要特征 现已命名 6个生物种,代表菌为醋酸钙不 动杆菌 革兰阴性球杆菌,成双排列,无鞭毛, 动力阴性 专性需氧,营养要求不高,普通平板、 Mac平板上可生长 氧化酶; O/F: O;硝酸盐还原 临床标本分离率仅次于铜绿假单胞菌 检验程序 课件制作 陆曙梅 不动杆菌属 鉴定要点 革兰阴性球杆菌 无动力 氧化酶 硝酸盐还原 KIA:底层斜面不变色 注意与形态相似的奈瑟菌鉴别 注意与不分解糖的产碱杆菌鉴别 课件制作 陆曙梅 嗜麦芽窄食黄单胞菌 革兰阴性杆菌,丛鞭毛 专性需氧、营养要求不高,普通平板生 长良好,麦康凯平板可生长 氧化酶 葡萄糖 O/F: 麦芽糖 O/F: 赖氨酸脱羧 明胶液化 课件制作 陆曙梅 黄杆菌科 革兰阴性杆菌,无鞭毛 专性需氧、营养要求不高,普通平板上 生长,形成黄色色素 麦康凯平板上不生长 氧化酶 O/F: O 课件制作 陆曙梅 莫拉菌属 革兰阴性球杆菌 ,不易脱色,成双排列 (与奈瑟菌相似),无鞭毛,部分菌株 有荚膜 专性需氧,营养要求高,普通平板上不 生长 氧化酶 O/F: 课件制作 陆曙梅 非发酵菌 检验程序 标本 增菌 分离培养(血平板、麦康凯) 可疑菌落 涂片 染色镜检 血标本 涂片 动力观察 革兰染色 鞭毛染色 氧化酶 O/F 硝酸盐还原 KIA斜面底层不变色 其他生化反应 课件制作 陆曙梅 测验 1 关于铜绿假单胞菌,错误的是 A 革兰阴性杆菌 B 氧化酶、触酶 C 硝酸盐还原 D 产生水溶性蓝绿色素 E 菌落有金属光泽 课件制作 陆曙梅 测验 2 下列哪项是非发酵菌的主要特征 A 需氧或兼性厌氧 B 革兰阴性杆菌 C 营养要求不高 D 无芽孢 E 不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖 课件制作 陆曙梅 测验 3 对革兰阴性杆菌出现下列哪种特征,可 怀疑为非发酵菌 A 氧化酶 B 发酵葡萄糖 C 动力阴性 D 触酶 E 氧化利用麦芽糖 课件制作 陆曙梅 测验 4 假单胞菌属中营养要求不高,新分离菌株在培 养基上形成特征性

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