【毕业学位论文】（Word原稿）光照强度和光照时间对铁皮石斛生长发育的影响-农业建筑环境与能源工程

中国农业大学学 士学位论文 摘要 毕 业 论 文 论文题目 光照强度与光照时间对铁皮石斛生长发育的影响 学 院 水利与土木工程学院 专业 年级 农业建筑环境与能源工程 05级 姓名 学号 次仁拉珍 指导教师 贺冬仙 职 称 副教授 （ 2009年 6月） 中国农业大学教务处制 中国农业大学学 士学位论文 摘要 摘要 铁皮石斛 （ 具有很高的药用和经济价值 ， 是 濒危灭绝的 国家 三级保护植物 。 现有的温室设施栽培虽然解决了人工栽培问题，但还存在生产周期过长、品质难以控制的缺点 ， 为此，非常需要开发一种能缩短生产周期的新型 人工栽培 模式 。本 研究以在温室 培育 1 铁皮石斛 栽培 苗 作 为试验材料 ， 以荧光灯为人工光照源设置了 光照强度 为 60、90、 120、 150 h 2 h 个人工光试验区 ，并 以双层保温玻璃 温室 培育的作为自然光对照试验区 ， 培育了 16周进行了光合特性和叶绿素荧光 特性 的测量 。 铁皮石斛 栽培 苗的净光合速率 在光照强度为 60与自然光对照区持平；在光照强度为 120这两个光照水平之间有显著性差异。光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛 的净光合速率 、叶绿素含量、茎节数、干物率等都没有影响；对叶片数和株数有显著性影响，光照时间为 12 h h 各试验区的 叶绿素荧光特性指标也表现出同样的趋势。 因此，选择 光照强度 1202 h 工 光照环境适于铁皮石斛栽培苗的生长发育 。 关键词： 叶绿素含量 叶绿素荧光 光照环境 净光合速率 中国农业大学学 士学位论文 摘要 毕 业 论 文 论文题目 光照强度与光照时间对铁皮石斛生长发育的影响 学 院 水利与土木工程学院 专业 年级 农业建筑环境与能源工程 05级 姓名 学号 次仁拉珍 指导教师 贺冬仙 职 称 副教授 （ 2009年 6月） 中国农业大学教务处制 中国农业大学学 士学位论文 摘要 is a as . t of of it is to a of to . in as 8 0, 90, 120, 150 h 2 h as to . 6 no 020of in PF of on of t on 202 h is to . 国农业大学学士学位论文 目录 目录 第一章 前言 . 1 究背景和意义 . 1 内外研究现状 . 3 究内容和技术路线 . 4 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛生长发育的影响 . 6 言 . 6 料与方法 . 7 果与讨论 . 11 章小结 . 16 第三章 铁皮石斛在不同光照条件下的荧光特性 . 17 言 . 17 料与方法 . 18 果与讨论 . 20 章小结 . 22 第四章 结论和建议 . 23 参考文献 25 致谢 26 中国农业大学学士学位论文 目录 图表 目录 图 1术路线 . 8 图 2绿素含量的测量 . 9 图 2皮石斛光合 作用 和荧光特性的测量装置 . 10 图 2照强度与光照时间对铁皮石斛的植株形态影响 . 12 图 2照强度与光照时间对铁皮石斛 的 净光合速率的影响 . 14 图 3照强度与光照时间对铁皮石斛的叶绿素荧光特性的影 响 . 21 表 2照强度和光照时间 的 试验区设置 . 7 表 2皮石斛人工栽培用营养液配 方 . 8 表 2照强度与光照时间对铁皮石斛生长发育的影响 . 13 表 2照强度与光照时间对铁皮石斛叶绿素含量的影响 . 17 表 3光特性测量的参数设置 . 18 中国农业大学学士学位论文 第一章 前言 1 第一章 前言 究背景和意义 皮石斛的生物特性 铁皮石斛（ 别名铁皮兰、黑节草，是兰科石斛属（ 植物 ， 多年生草本植物 ， 其 生境独特，对小气候环境要求十分严格 。 铁皮石斛 主要生长在热带、亚热带原始森林及相类似的温暖湿润的环境 ， 在我国 主 要分布于陕西、四川、湖北、广东、广西、贵州、云南、台湾等省 区 1。铁皮石斛 常生于地形多是悬崖峭壁，下临深潭，并有斜射阳光反射，山岭重叠，沟壑纵横的小生境。自然分 布较多的地区，多属于温暖带和亚热带，海拔 在 600平均气温 为 12积温 达 3000生长季节温度 为 20相对湿度在 60之间， 最适光照为 20000无霜多雾，年均降雨量为 1000皮石斛常 附生于满布苔鲜树干上，以及少数上述环境的岩石上，地质基础多为白云岩和石灰岩土壤为富含有机质的腐殖土壤。生长地有经过林冠过滤的散射光以及从间隙透入的短暂的直射光斑，林间透光度在 30 %左右，为耐荫性的阴 生植物。 铁皮石斛的繁殖方式有分蘖繁殖和种子 繁殖，分蘖力较强，常丛状生长，具有无性繁殖的性能。在自然条件下，主要以分蘖繁殖 ， 且 生长、繁殖速度都很 慢 2。 种子 小 ，无胚乳，一般生长 3年后才能开花，植株也不断产生萌蘖，茎的基部或茎节在接触地面或在适宜的条件下能分蘖新芽， 便形成了新的个体 2。 皮石斛的 药用 价值 石斛在我国历史上是一种重要的中药材， 一直沿用于药用开发领域， 研究发现石斛的有效药用成分主要是多糖和生物碱类物质。 石斛中提取的两种菲类化合物是有抗人体肺癌、卵巢腺癌和前髓细胞白血病的作 用 3。近些年备受关注的石斛多糖也具有显著的免疫 增强活性和抗癌、防癌、抗衰老、抗辐射等多种功 效 4,而 铁皮石斛具有 抗癌和提高人体免疫力的功能， 有试验证实，铁皮石斛多糖能促进免疫系统淋巴细胞产生抑制因子，抵消环磷酰胺加入所引起的外周白细胞的剧烈下降，是一种很有价值的中药类免疫增强剂 ，在临床及中药复方中，铁皮石斛被广泛应用 56。铁皮 石斛 既是 我国名贵中药 ， 也是 美丽的观赏兰花， 具有很高的药用和经济价值，其需求量逐年增加 。在我国的 76种石斛属植物中，有近 40种作药用，且不少药用石斛品种长期出口 7。但是近年来由于环境污染和大量掠夺性采挖，铁皮石斛赖以生 存的野生生境遭到严重破坏，资源量骤减，已 被列为中国濒临灭绝的三级保护植物 ，严禁采挖，另外由于铁皮石斛在自然环境下生长缓慢，人工栽培的铁皮石斛资源远远不能满足药材市场的需求。 巨大的供需逆差和昂贵的价格导致该药材市场混乱，假冒伪劣泛滥，其主要原因是生产 时间长、 难度大、产量小、 投资回报周期长， 传统的生产方式不宜规模化生产，导致人工栽培成本远高于采收野生石斛， 因此为满足中药发展的需求，人工栽培铁皮石斛以扩大 铁皮石斛的 产量显得十分重要。所以，改进组培 +温室 /大棚栽培的现有生产模式，开发一种能够缩短栽培周期、控制药草质 量的新型生产模式将促进铁皮石斛人中国农业大学学士学位论文 第一章 前言 2 工栽培标准化、规模化、产业化发展，利用人工光型密闭式植物工厂技术明确铁皮石斛的生长发育与环境要素之间的动态关系，有效地调节人工光可控环境下铁皮石斛的生长发育、提高 其 药草品质。 照 环境 对铁皮石斛生长 发育 的影响 光照是影响植物生长发育的重要生态因子之一 ：是 植物进行光合作用的能量来源，影响组培苗光合作用和生长的内在因素 。 光环境因子包括光照强度、光周期、光质三个因子，这三个因子都与组培苗的生长发育有着密切的关系 。 光照时间影响植物的光合作用和形态建成。根据植物光照时间可 把植物分为长日照植物、短日照植物和中性植物。光照时间越长越能促进生长发育的植物属于长日照植物，如萝卜、菠菜等。光照时间越短越能促进生长发育的植物属于短日照植物，如水稻、玉米等；对光照时间不敏感的植物属于中性植物，如番茄、月季等；还有一类植物称为中间植物，它们只有在最适的光照时间下才能保持旺盛的生长速度，其他光照时间下则会抑制其生长。现阶段的研究中，对石斛栽培的光照时间几乎设置为 12小时，少有人对石斛生长的光照时间长短进行研究，有待进一步研究。 因此，了解铁皮石斛对光照时间的需求规律和植物在不同光照强度下的生理 变化，找出铁皮石斛生长所需的适宜光照强度范围，在铁皮石斛的的栽培过程中选择适宜的光照时间和强度，对促进铁皮石斛的生长和品质提高有重要意义。 光照强度对植物生长的影响主要是通过影响植株的光合作用，进而影响到有机物的积累，而有机物是植物生长的物质基础；而且光对植物的生长有抑制作用，这与光对生长素的破坏有光。因此，若光照强度 较低，光合产物积累较少， 对 植物的生长 产生了抑制作用 ；若光照强度过高，可能出现光抑制现象而降低光合速率，造成植物生长速率下降，甚至死亡。 光照强度对石斛新生茎、新生叶干物质重量的影响：强光照条件 下 ,石斛可以充分利用光能 ,加强 它的光合能力 ,促进了石斛生长发育 ,石斛的新生茎和新生叶生长旺盛，它的干物质重量显然要 比弱光照高 ， 光照强度对金钗石斛根部生长的影响：弱光照条件下 ,虽然石斛地上部生长缓慢 ,但它的地下部根系生长速度较快 ,它的根系的干物质量 ,弱光照比强光照多。所以石斛在生长过程中必须保证一定的光照强度 ,才能有利于石斛吸收营养液和木屑培养基质中的氮素 ,充分利用光能进行光合作用 ,促进石斛生长发育而达到生长旺盛 ,积累更多的干物质 ,提高它的产量。 光照强度对铁皮石斛叶绿素的影响 ： 叶绿素从光中吸收能量 并 被用来将 二氧化碳转变为碳水化合物。 因此，叶绿素是 与光合作用 (有关的最重要的色素 。光强过强，叶绿素会受到光氧化而被破坏； 光强太弱会影响叶绿素的形成，使植株呈黄白色，叶片发黄。在 环境因素 基本 相同的情况下，铁皮石斛组培苗的叶绿素 a、 b 及叶绿素总含量随着光照强度的增强而显著增加，同时叶片变小，叶色加深。 同样 ,光照强度影响石斛吸收木屑培养基质中氮素，石斛除了从营养液中吸收氮素外 ,还从木屑培养基质中吸收氮素 , 由于强光照石斛吸收营养液和木屑培养基质中的氮量均高于弱光照 ,所以 石斛在强光照条件下 吸收总氮量也明显高于弱光照。 另外， 铁皮石斛光 的 光 合特性是受 光照强度 影响的 一个光生物化学反应 ， 净光 合 速率是反映铁皮石斛组培苗生长最重要的指标。 在一定范围内 ,光合速率随光照强度的增加而加快， 但光照过强会抑制光合作用 ， 致使光合速率下降 、 光合产物减少 ， 并最终影响药用有效成分的含量。 中国农业大学学士学位论文 第一章 前言 3 然而 在自然界中 ， 光照条件随纬度、海拔高度、坡向、昼夜和季节变化的影响而不同，在自然光下 , 随着光强的增加 , 石斛发生严重光抑制 ； 在室内进行植物栽培和组织培养时 ， 光照条件可以人工控制 ，为保持旺盛的生长速度调节最适的光照时间和光照强度 8。 内外研究现状 国内很多专家学者的研究都表明光照强度对铁皮石斛的生长有很重要的影响作用，适宜的光照强度能够促进铁皮石斛的快速生长和繁殖，从而能够缩短生长周期降低成本，获得 人工 种植的最大收益。 丑敏霞等 （ 2000） 研究了 光照强度对铁皮石斛生长的影响 ： 不同光强下 ， 石斛鲜重的增长大多以 25 处理更快 ， 繁殖力则以 20 与 25 处理较高 ； 各光强下的 均以 25 最低 20。 证明了 高温和弱光照条件有利于石斛的株高生长 ， 会使石斛茎杆相对纤弱 ， 利于产量和质量提高， 当生长在较高的 温度范围内时需要较高的光照强度 ， 保证较高的光合强度供给生长的需要 。 张世筠 等 （ 1987） 也说明 了 石斛 是喜温植物 ， 在保证光强和相对湿度的条件下对高温具有一定的耐受力 。 徐云鹃等 (1993) 对霍山石斛的光合特性进行了研究 ， 认为其生长要求低光强和散射光 ， 石斛的生长需要半阴半阳的气候环境 。 据查资料 石斛的光呼吸和暗呼吸相等 , 两者共占 1/2 总光合 , 而一般植物的呼吸占总光合的1/10 1/20。 由此 可见 , 石斛同化物被呼吸消耗较多 , 影响积累 , 因而生长慢 , 生物产量低 , 这也许是石斛净光合速率低的主要原因。此 外 , 从石斛生长的潮湿、背光的野生环境来看 , 其对光的需求是长期系统发育的结果 , 属阴性植物对光的反应 。这种低光照需求也是造成光合作用低的原因之一 20。 西南农业大学生理生化实验室及华南师范大学兰花中心有关人员研究了光照强度对石斛生长和繁殖、叶绿素 含量、净光合速率、呼吸速率及可溶性总糖含量等的影响 24。研究表明， 光强对石斛生长的影响表现在增高和增重两方面，就光照强度 为 80 20 40 杆、叶片都受 光照强度影响， 证 明了 320 绿素含量随光照强度的增加而先增后降。净光合速率随光照强度的升高也先升后降 , 与叶绿素含量高低呈正相关，呼吸速率则随光强升高而升高。推测高光强下 (如 640 石斛净光合速率的降低可能是高光呼吸作用所致。高光照强度有利于石斛可溶性糖的合成 , 而低光照强度有利于蛋白质的合成。 各种光强下的暗呼吸速率均随温度升高而增大 。 在不同的光照条件下 ，石斛生长的适宜温度均在 25 左右 。 光温处理引起石斛生理生化过程明显的相应变化表现出 ； 高温和弱光照条 件有利于石斛的株高增长 ， 但不利于产量和质量提高。 蔡永萍 等 (2005) 对 霍山石斛叶片光合速率和叶绿素荧光参数的日变化 进行了研究 2。研究表明 ,霍山 3种石斛的光饱和点为 270400 补偿点为 4050 饱和点低，光补偿点和 光合速率、表观量子效率较低，石斛为阴生植物响应型。 研究指中国农业大学学士学位论文 第一章 前言 4 出 ， 霍山 3种石斛光合作用的适宜光强在 400 苏文华等 (2003) 对铁皮石斛叶片光合作用的碳代谢途径进行了研究 18。在晴 天和阴天条件下分别测量 铁皮石斛叶片 24究发现， 光照强度在 500 当光照强度超过 500 着光强的增加 孔导度也明显下降，表现出光抑制现象。 了光照强度的影响外 还受温度的影响。 在 500 20时 在夜里无光的条件下， 25出现 过 25时 。 。研究还指出，铁皮石斛为兼性 着环境条件的变化，其光合作用在景天酸代谢途径（ 时他们也对金钗石斛的光合途径进行了研究，发现金钗石斛表现出与铁皮石斛相同的途径，对温度和光照强度的响应也相似。 此外， 西南农业大学张明等 (1999) 应用 324。结果表明 ,25和 40处理植株吸磷量分别为 10处理的 2. 3和 2. 5倍。 25处理 , 茎中 32P 放射性比活度最高。在中度光 (20,000 和高光强 (50,000 下 ， 植株吸磷量较弱光 (5,000 相比 分别 增加 74%和 23%。在中度光下 ,茎中 32是药用植物必需营养元素之一 ， 是许多重要有机化合物的组成成分 ， 并积极参与各种代谢过程 , 被称为“能量元素”。因此 ,促进药用植物对磷素的吸收 ,具有重要意义。温度、光强和磷素吸收关系密切 ,在所采用的几个处理中 ,最适宜金钗石斛吸收磷素的温度为 25 ,光强为中度光 (20,000 中国农业大学 （ 2005在人工光型密闭式植物工厂中，针对光照强度对铁皮石斛组培苗生长发育的影响 进行了研究 ， 但是该研究在光照 环境对铁皮石斛栽培苗的生理、生长代谢的影响方面没有作进一步研究 。该研究取鲜重约 300 铁皮石斛单腋芽作为外植体在温度 241、湿度 65 5%、光照时间 12 h/d、及光期 00 50 环境条件下，设置光照强度为 37、 68、 92、 120 4 组试验区。 在人工光型密闭式植物工厂中培育92d 后，对培育后的组培苗的生理和生长指标进行检测，研究结论显示铁皮石斛组培苗的生长发育和生理活性在光照强度为 68 最佳，超过 92 呈现明显的光抑制 ; 多糖含量随着光照强度的增强而增加，超过 92 呈下降趋势，但是 68 和 92 照强度试验区的多糖含量没有显著性差异。研究结论指出铁皮石斛组培苗在人工光型密闭式植物工厂内培育的适宜光照强度 60 2。 国外对石斛的研究，主要侧重于观赏石斛，如通过转基因技术改变石斛的花色等 6。近年来，石斛作为观赏植物在世界上发展迅速，已成为新兴的独立产业。但是观赏石斛的栽培技术与药用石斛的差异较大，依靠国外的石斛生产来满足我国药用石斛的大量需求是十分不实际的，因此只有依靠我们自己的研究，弄清楚药用石斛的生理特性，探讨药用石斛生长的适宜环境，使其像观赏石斛一样走上产业化发展的道路，解决药用原材料缺乏的矛盾 。 究内容和技术路线 中国农业大学学士学位论文 第一章 前言 5 查阅 文献 并确定研究目标 前期预备实验 并确定试验方案 进行不同光照强度 与光照时间 下栽培的铁皮石斛对比试验，确定适宜的 光照条件 明确光照环境对铁皮石斛生长发育的影响 撰写毕业论文，准备毕业答辩 进行铁皮石斛在不同光照条件下的荧光特性对比试验 为此，本课题通过测量在人工光型密闭式植物工厂中的人工光可控环境下不同 光照强度 和光照时间 对铁皮石斛 栽培 苗生长发育 、光合速率、叶绿素荧光特性的影响，并与在温室的自然光栽培的相对比， 明确铁皮石斛栽培苗在人工光可控环境下对光环境的响应机制，从而 为确定铁皮 石斛在人工光 下栽培的 适宜光照强度 和光照时间提供理论依据和数据支持。 术路线 图 1术路线 1on 中国农业大学学士学位论文 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛的生长发育的影响 6 第二章 光照强度 与 光照时间 对 人工光下栽培的 铁皮石斛生长发育的影响 言 光是植物光合作用的动力，是影响苗生长的重要因素，也是形成叶绿素、叶绿体及正常叶片的必要条件。光照时间影响植物的光合作用和形态建成，能够调节光合酶的活性与气孔开度，可直接 制约着光合速率的高低。光照时间与纬度、坡向、季节有密切关系 , 如在一定范围内 ,随纬度的升高 , 日照时间相应延长 ,对于药用植物的某些有效成分 ,延长光照时间对提高其含量有积极的影响，因此，不同地区人工控制光照时间，成为提高药用植物的有效成分含量的途径之一，而现阶段的研究中，对石斛栽培的光照时间几乎设置为 12h，少有人对石斛生长的光照时间长短进行研究。 绿色植物通过光合作用制造有机物 ,经过植物体内的运输和转化产生各级代谢产物 ,因此 ,光照对有效成分的形成和积累是必须的。根据植物对光照强度的要求不同 ,可将其分为阳生植 物、阴生植物和中间类型的耐阴植物。阳生植物物要求充足直射日光 ,才能生长或生长良好 ,阴生植物要求适宜生长在荫蔽环境中 ,在完全日照下生长不良或不能生长 9，而光照对 阴生植物而言，成为了决定其分布、生长发育和有效成分含量的重要条件。 对于光照强度，过去采用 照明领域的 光照强度进行度量，单位为 克斯 )。这是在 380对人眼视觉效应最强的 555人眼的视觉效应对不同波长的光区别计算进行度量的。 进一步研究表明，植物光合作用强度与所吸收的光量子数量有关，因此更合理的单位是单位时 间、单位面积上照射的光合有辐射范围的光量子数，称为光合有效光量子流密度（ 简称 ,单位为 植物的光合作用是 两种生理活动是同时进行的，所以光合器官叶片内外的 为净光合速率，其中的呼吸速率则是暗呼吸速率和光呼吸速率的总和，净光合速率常用单位 光照强度不仅 与组培苗的生长发育有着密切的关系 ，它也是影响植物光合速率的重要因素。 当光照强度为 0时， 净光合速率等于当时的暗呼吸速率；当光照强度的增强，净光合速率逐步增加，当净光合速率为 0，此时的光合速率等于呼吸速率，称此时的光照强度为光补偿点；随着光照强度的增强，当净光合速率不再增加时，这个现象叫光饱和现象 (此时的光照强度叫做光饱和点 (当光照强度减弱时，光合速率随之降低，当光照强度减弱到光合作用所吸收的时的光照强度成为光补偿点 (当光照强度超过光饱和点时，植物会引起抑制作用 。所谓光抑制即为植物在生长发育过程中，光照过高，超过光和机构作用所能吸收的利用的光能，导致植株光合活性降低的现象。 若植物处于光补偿点之下，有机物消耗多于积累，作物生长缓慢，严重时会导致植株枯死。 因此，有效地调控植物适宜的光照强度范围 ,能促进植物的快速健康生长。 中国农业大学学士学位论文 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛的生长发育的影响 7 料与方法 物材料 本试验选用位于浙江省金华市的浙江枫禾生物有限公司于 2008年 4月中旬提供的在组培苗驯化后在温室培育了 1 验区 设置与环境 条件 （ 1） 试验区设置 本试验 采用 了培育 1双层保温玻璃 温室 培育的作为自然光对照试验区，以荧光灯为人工光照源培育的设置了 光照强度 为 60、 90、 120、 150 h 2 h 个人工光试验区。人工光照试验区的环境条件为 温度 24 1 、相对湿度 60 5%， 室内采用 风机和内、外遮阳网进行粗放的环境控制。 各试验区的铁皮石斛苗培育 16周后各取 每区 8钵 植物 对其生长发育 和 光合特性指标进行测量。 表 2照强度和光照时间试 验区设置 he of 照强度 光照时间 9（ h 12（ h 60 0 20 50 照区 990(自然光 ) 121212：1) h H） ； 2)； 3） 然光 下（温室）栽培作为对照区。 （ 2）共通的栽培条件 1) 试验地点： 中国农业大学水利与土木工程学院 5 楼 温室和密闭式植物工厂参观间。 2) 栽培容器： 10*12 营养钵 3) 栽培基质：松磷（粒径 5磷（ 3-8 松磷粉末：蛭石：木屑按照 1:1:1:1:水高温发酵后使用 。 4) 栽培时间： 16 周（ 2009 年 2 ） （ 3） 肥水管理 中国农业大学学士学位论文 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛的生长发育的影响 8 铁皮石斛自然生长速度较慢，所以要提高铁皮石斛生长速度，必须适时适量地提供养分。移栽后前 2 周用喷雾 ,保持叶面湿润状态 ,切勿浇水。移栽 2 周后浇水 ,按照保持基质湿润的原则，每周施 1 次营养液，每 2d 底面灌水一次。本试验用的营养液根据山崎园艺 草莓 配方 修改后 配备 （表2，按照 1： 500 比例稀释后浇灌 。 表 2皮石斛人工栽培用 的 营养液配方 . 营养液 配方 中化学肥料的浓度 （ g/L） 硝酸钙 硫酸镁 磷酸二氢钾 硝酸铵 量参数及 方法 在 不同光照时间 和不同光照强度 下进行管理 20周后测量各实验区中铁皮石斛栽培苗的生长参数如 有株高、茎粗、茎节数、叶 片数、 干物率 ，生理参数如有叶绿素含量和净光合速率的 变化。 测量过程及需使用的仪器有如下 ： 1）形态参数 的测量 铁皮石斛栽培苗的株高用直尺测量，茎粗采用 游标卡尺 (0量， 鲜重用测量天平（ 量后，放于 80的烘箱中烘 72小时 后，再用同一天平称量其干重。叶片的活体叶绿素含量由 便携式叶绿素仪（ 本美能达公司，日本）测量叶绿素相对含量 2）测量叶绿素含量 根据朗伯 色溶液的光密度值与其中溶质浓度成正比，即： =为比例常数。当溶液浓度以白粉浓度为单位，液层厚度为 1种有色物质溶液在不同波长下的比吸 收系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的光密度而求得。 如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的光密度等于各组成份在相应波长下光密度的总和，这就是光密度的相加性。 本实验中，欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素、的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的光密度值，并根据叶绿素、在该波长下的比吸收系数即可求出其浓度。在测定叶绿素、时，为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光选择叶绿素在红光区（ 550 最大吸收峰。 已知叶绿素、在 1： 1的乙醇 663和 645 知在波长 663 绿素、在该溶液中的系数分别为 波长 645 据加和性原则列出以下关系式： 1 1中国农业大学学士学位论文 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛的生长发育的影响 9 式（ 1（ 1 665为叶绿素溶液在波长为 663 45 为叶绿素 a、 mg 解方程组（ 1和 （ 1 经 单位换算后得： 11将 绿素总量 T= b=1据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度值，计算出提取液中各色 素的含量（图 2本实验中叶绿素含量测定选取与测定光合作用相同位置和发育阶段的叶片 碎后加入 1： 1的乙醇 容至 25 黑暗中常温浸提 72小时然后将提取液摇匀，倒入干净的比色皿中，用分光光度计（ o., 别测量其在 663 645 645， 照 叶绿素 a（ mg =V/1绿素 b（ mg =V/W 1绿素总量（ mg =V/1中 L）， 图 2绿素含量的测量 2he of 3）光合速率的测定 光合作用是绿色植物利用光能将其所吸收的 释放出氧气的过程。 本中国农业大学学士学位论文 第二章 光照强度与光照时间对人工光下栽培的铁皮石斛的生长发育的影响 10 试验 通过测定 作用，即测定植物在生长过程中， 降量，这个下降量即为某段时间内植物光合作用所