天然维生素E软胶囊中维生素E的含量测定

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 天然维生素 E 软胶囊中维生素 E 的 含量测定 摘要 目的 应用高效液相色谱 法（HPLC）建立天然维生素 E 软胶囊 的含量测定方法。 方法 采用 Alltima C18 色谱柱（150 mm 4.6 mm，5 m） ， 以甲醇为流动相，流速 1.0 mL/min，检 测波长 285 nm。 结果 在本方法中，维 生素 E 的线性关系良好，线性相关系数 为 0.9999；专属性强，精密度和稳定性 良好，相对标准偏差（RSD）分别为 0.17%和 0.87%；平均加样回收率（n = 6）为 100.8%，加样回收率良好。含量 测定结果显示 3 个批号样品中维生素 E 的含量分别为标示量的 101.2%、100.8%、102.7% 。 结论 该方 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 法准确、简单、快速，可用于天然维生 素 E 软胶囊的含量测定。 中国论文网 /6/view-12954781.htm 关键词 天然维生素 E 软胶囊； 维生素 E；高效液相色谱法；含量测定 中图分类号 R927 文献标识码 A 文章编号 1673-7210（2017） 10（c）-0136-04 Determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules XU Wenfeng XU Shuo HE Xiaorong JIANG Wenqing WU Xuejun KUANG Yongmei JIN Pengfei Department of Pharmacy， Beijing Hospital National Center of Gerontology， Beijing 100730， China Abstract Objective To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） method for the determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules. Methods An Alltima C18 column （150 mm 4.6 mm， 5 m） -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 was used for the separation， with methanol as the mobile phase at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 285 nm. Results The method showed good linearity with correlation coefficient of 0.9999 for vitamin E. The assay method showed good specificity. The precision and stability were satisfactory with the relative standard deviations （ RSD） of 0.17% and 0.87% respectively. The average spiked recovery was 100.8% （n = 6） ， the recovery rate was good. The determination results was 101.2%， 100.8% and 102.7% of the labeled amount of the three batches of samples respectively. Conclusion The established method is accurate， simple and fast， and can be used for determination of narural vitamin E in Natural Vitamin E Soft Capsules. Key words Natural Vitamin E Soft Capsules； Natural vitamin E； -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 HPLC； Determination 维生素 E 为微黄色至S 色澄清 的黏稠液体，几乎无臭，遇光色渐变深， 不溶于水，溶于无水乙醇、丙酮等有机 溶剂，在空气中会缓慢氧化，紫外线照 射可使其分解。维生素 E 分为合成型或 天然型，合成型为 dl-生育酚醋酸酯， d-生育酚醋酸酯 1。大量研究表明， 维生素 E 具有抗氧化、调节机体免疫力、 促进生育、抗衰老、细胞保护等生物学 功能2-5 。维生素 E 属于人体必需的植 物源脂溶性维生素，机体不能合成，必 须从膳食中获取。植物油中富含天然维 生素 E，是膳食维生素 E 的主要来源6 ， 同时维生素 E 也常被作为药品、营养保 健品和食品添加剂使用。维生素 E 的定 量方法有气相色谱法1，7-11、气相色 谱-质谱法 12-13、高效液相色谱法14- 17、高效液相色谱- 质谱法18 、毛细 管电泳法19 、红外光谱法20 等。杨 红娟等21采用高效液相色谱法对天然 维生素 E 软胶囊中 -生育酚的含量测定 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 进行了研究，但高效液相色谱法测定天 然维生素 E 软胶囊中 d-生育酚醋酸酯 的含量尚未见报道。本实验应用高效液 相色谱技术建立了天然维生素 E 软胶囊 中维生素 E 含量测定的方法，对于补充 其质量控制具有一定参考价值。 1 仪器与试药 1.1 仪器 1260 型高效液相色谱系统，配有 四元梯度泵（型号：G1311C） ，自动进 样器（型号：G1329B） ，柱温箱（型号： G1316A） ，DAD 检测器（型号： G4212B） （安捷伦科技有限公司，美国） ；Mettler XP-205 型电子天平（精密度 为十万分之一，梅特勒-托利多集团， 瑞士） ；KQ-800KDE 型超声仪（昆山市 超声仪器有限公司，中国） ；Milli-Q 超 纯水系统（密理博中国有限公司，美国） 。 1.2 试药 无水乙醇（分析纯，批号： 20141113，国药集团化学试剂有限公司） ；甲醇色谱纯，批号：164787，赛默 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 飞科技（中国）有限公司；实验用水 为纯净水；甘油批号：20851101，国 药控股星鲨制药（厦门）有限公司； 大豆油（批号：20170519，益海嘉里食 品营销有限公司） ；维生素 E 对照品购 自中国食品药品检定研究院（批号： 100062-201110，含量为 97.7%） ；天然 维生素 E 软胶囊 每粒含有天然维生素 E 400 IU（相当于维生素 E 294.1 mg） 22，批号： 450279-12、442049- 17、423022-11，美国“ 天然素 ”药厂。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱选择十八烷基硅烷键合硅 胶为填充剂（Alltima，150 mm 4.6 mm，5 m） ；甲醇为流动相；检测波长 为 285 nm；流速为 1.0 mL/min；进样体 积为 10 L；28。所用溶液进样前均 经 0.22 m 孔径尼龙滤膜过滤。 2.2 对照品溶液的制备 避光操作，取维生素 E 对照品约 250 mg，精密称定，置于 50 mL 量瓶中， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 加适量无水乙醇，振摇使溶解，加甲醇 稀释并定容至刻度，摇匀，即为维生素 E 储备液（5.0 mg/mL） 。精密量取维生 素 E 储备液 1、2、3、4、5 mL，分别 置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻 度，摇匀，获得维生素 E 质量浓度分别 为 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL 的对 照品溶液。取中间浓度（1.5 mg/mL） 的对照品溶液用作含量测定时的对照品 溶液。 2.3 供试品溶液的制备 避光操作，精密称取天然维生素 E 软胶囊内容物约 0.1 g（约相当于维生 素 E 75 mg） ，置 50 mL 容量瓶中，加适 量无水乙醇，振摇使溶解，甲醇稀释并 定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 2.4 阴性对照溶液的制备 取说明书中的辅料，制备不含维 生素 E 的阴性空白 悠罚 按“2.3”项下 操作，得到阴性对照溶液，用于本实验 的专属性研究。 2.5 专属性及系统适应性实验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 分别取阴性对照溶液、维生素 E 对照品溶液和供试品溶液进样分析，考 察样品中辅料及其他成分对维生素 E 色 谱峰的干扰。上述 3 种溶液的色谱图 （图 1）显示，样品辅料和其他成分不 干扰维生素 E 的测定。理论板数按维生 素 E 计算应4000。 2.6 线性和灵敏度 对“2.2”项下系列对照品溶液进样 分析，记录峰面积，以维生素 E 的质量 浓度（mg/mL）和对应的色谱峰面积进 行线性回归，维生素 E 在质量浓度 0.49762.4879 mg/mL 范围内呈良好线 性，回归方程为 Y = 2264.22X - 1.75， 线性相关系数（r）为 0.9999。 将低浓度的对照品溶液以甲醇逐 级稀释后进样分析，当信噪比（S/N） 约为 3.0 时，确定该方法维生素 E 的最 低检出限（LOD）为 0.12 g/mL；当 S/N 约为 10.0 时，测得该方法维生素 E 的最低定量限（LOQ）为 0.50 g/mL。 2.7 精密度实验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 取“2.2”项下中间浓度对照品溶液， 重复进样 6 次，维生素 E 色谱峰面积的 RSD 为 0.17%，表明仪器精密度良好。 2.8 重复性实验 取同一批天然维生素 E 软胶囊样 品 6 份（批号：450279-12） ，分别制备 供试品溶液，照含量测定项下方法进样 分析，6 份样品测定结果分别为标示量 的 100.9%、101.4%、102.2% 、100.4% 、1 01.4%、 100.6%（平均值为标示量的 101.2%） ，结果维生素 E 含量的 RSD 为 0.65%，说明方法的重复性良好。 2.9 稳定性实验 取同一供试品溶液（批号： 450279-12） ，置于仪器自动进样器内， 分别在 0、2、4、8、12、24 h 分析测定 其含量，结果显示含量基本不变，24 h 内维生素 E 色谱峰面积 RSD 为 0.87%，表明供试品溶液在 24 h 内稳定。 2.10 加样回收率实验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 在 50 mL 容量瓶中加入批号为 450279-12 的天然维生素 E 软胶囊内容 物约 0.1 g，精密加入维生素 E 储备液 5 mL，加适量无水乙醇，振摇，用甲醇 定容，摇匀，过滤，进样测定。共制备 6 份样品，计算加样回收率和 RSD。 2.11 样品含量测定 应用建立的方法对批号为 450279-12、442049-17、423022-11 的天 然维生素 E 软胶囊进行含量测定，每个 样品制备 3 份，取平均值。测定结果显 示批号为 450279-12、442049- 17、423022-11 样品中维生素 E 的含量 分别为标示量的 101.2%、100.8%、102.7% 。 3 讨论 本实验采用高效液相色谱建立了 天然维生素 E 软胶囊含量测定的方法， 该方法操作简单，重复性好，结果准确 可靠，可用于维生素 E 软胶囊的质量控 制。 3.1 提取溶剂的选择 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 适用于天然食品中的维生素 E 测 定方法的现行国家标准，都需要将不同 构型的微生物 E 皂化转化为生育酚的形 式，预处理操作繁琐14 。 中国药典 中维生素 E 的含量测定为气相色谱法， 样品提取溶剂为正己烷1，不适用于反 相高效液相色谱。维生素 E 在无水乙醇 中易溶，在甲醇中即使超声 30 min 样 品也不能完全溶解，故实验中选择无水 乙醇溶解，甲醇稀释的方法配制样品。 这样可以避免完全用无水乙醇配制样品 时液相分析中潜在的溶剂效应。 3.2 流动相的选择 维生素 E 在水中几乎不溶，预实 验中发现，流动相即使选择甲醇-水 （982） ，维生素 E 的色谱峰型也会受 到影响，故实验采用纯