结核杆菌t细胞斑点试验在风湿免疫病结核杆菌感染中的诊断价值

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 结核杆菌 T 细胞斑点试验在风湿免 疫病结核杆菌感染中的诊断价值 摘要 目的 观察结核杆菌 T 细 胞斑点试验在风湿免疫病结核杆菌感染 中的诊断价值。 方法 选取解放军陆军 总医院风湿科 2010 年 7 月2014 年 7 月行 T-SPOT.TB 试验及痰培养试验的 266 例患者，其中风湿免疫病患者 132 例（风湿免疫病组） ，非风湿免疫病患 者 134 例（非风湿免疫病组） 。收集患 者的 T-SPOT.TB 试验、痰培养及抗酸 染色结果。比较两组 T-SPOT.TB 试验 确诊结核的阳性率。 结果 风湿免疫病 组 T-SPOT.TB 试验阳性率为 39.39%（52/132） ，非风湿免疫病组阳 性率为 46.53%（67/134） ，差异无统计 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 学意义（P 0.05） 。 结论 T-SPOT.TB 试验对风湿免疫病患者结核杆菌感染筛 查有一定诊断价值。 中国论文网 /6/view-12954802.htm 关键词 结核杆菌 T 细胞斑点试 验；风湿免疫病；结核杆菌感染 中图分类号 R593 文献标识码 A 文章编号 1673-7210（2017） 11（a）-0056-04 Value of T cell spot test in diagnosis of the infection of tuberculosis in patients with rheumatic diseases ZHAO Liping ZHANG Yifan BAI Yunjing JIANG Dexun Department of Rheumatology， PLA Army General Hospital， Beijing 100700， China Abstarct Objective To investigate the value of T cell spot test （T- SPOT.TB） in the diagnosis of the infection of tuberculosis in patients with rheumatic diseases. Methods From July -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 2010 to July 2014， 266 patients screened for tuberculosis using T- SPOT.TB and examine the sputum in Department of Rheumatology， PLA Army General Hospital were selected. Among the patients， 132 cases were diagnosed with rheumatic diseases （rheumatic diseases group） ， and 134 cases were non- rheumatic immunity （ non-rheumatic immunity group）. The results of T- SPOT.TB， sputum culture and anti-acid staining of patients were collected. The positive rate of tuberculosis diagnosed by T-SPOT.TB between the two groups. Results The positive rate of tuberculosis diagnosed by T-SPOT.TB in the rheumatic diseases group was 39.39% （52/132） ， and the positive rate in the non-rheumatic diseases group was 46.53% （67/134）. There was no statistical significance difference （P 0.05）. Conclusion T- SPOT.TB has certain diagnostic value for -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 the screening of mycobacterium tuberculosis in patients with rheumatoid immunity. Key words T cell spot test； Rheumatic diseases； Tuberculosis 2010 年全第五次结核病流行 病学抽样调查显示 15 岁及以上人群活 动性肺结核患病率为 479/10 万，涂阳肺 结核患病率 66/10 万，占全球第三位1。 2015 年全球新发结核病估计约 1045 万 例，其中中国占新发病例数的第三位， 新发耐多药结核病 58 万例，其中印度、 中国、俄罗斯约占 45%，20142015 年结核病发病率下降速度仅为 1.5%， 2015 年估计约 120 万人死于结 核病，还有约 40 万艾滋病感染者死于 结核病，结核病仍是全球十大死因之一 2，提示我国结核病防治任重而道远。 风湿免疫性疾病发病机制多表现为自身 免疫耐受被打破，B 淋巴细胞异常活化， 自身反应性 T 淋巴细胞对自身组织成分 产生获得性免疫应答，再加上糖皮质激 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 素及免疫抑制剂长期应用加重机体免疫 抑制状态，极易诱发病毒、细菌等感染， 尤其结核分枝杆菌感染，直接发生或使 潜伏性结核感染状态（latent tuberculosis infection，LTBI）转变为活动性结核病 （active tuberculosis，ATB） 。近十年来 由于国内生物制剂，尤其肿瘤坏死因子 （tumor necrosis factor ，TNF-）拮 抗剂等，应用于类风湿关节炎、强直性 脊柱炎等免疫炎症性关节病的治疗，更 增加了结核分枝杆菌感染的风险，因此 结核病的防治非常重要3-4。临床上抗 酸杆菌涂片及抗酸杆菌培养目前还是诊 断结核病的金标准，但敏感性均低、且 培养需 48 周，相对费时；结核菌素 试验（TST）有较高的假阳性率；结核 抗体检测因抗原不同等原因检测结果差 异很大；基因检测样本量大、成本高， 难于推广；酶联免疫斑点法（enzyme linked immunospotassay，ELISPOT）是 一种基于抗原特异性细胞免疫应答的新 型免疫检测技术，由此发展而来的结核 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 杆菌 T 细胞斑点试验（T-SPOT.TB）用 于检测人体外周血效应 T 淋巴细胞经结 核杆菌特异性抗原肽段刺激后是否分泌 干扰素推断结核杆菌感染情况，是结 核病诊断领域的新进展。本研究通过分 析 T-SPOT.TB 在风湿性疾病诊治的应 用情况，探讨其诊断价值，现将结果报 道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取解放军陆军总医院风湿科 （以下简称“ 我院” ）2010 年 7 月2014 年 7 月T 诊或住院的明确诊断或拟诊 的 266 例部分风湿免疫病及非风湿免疫 病患者。风湿免疫病患者 132 例，其中 男 42 例，女 90 例，平均年龄为 （46.114.4）岁，平均病程为 （60.510.2）个月；包括类风湿关节炎、 系统性红斑狼疮、干燥综合征、强直性 脊柱炎、脊柱关节病、混合结缔组织病、 白塞病、成人斯蒂尔病等。非风湿免疫 病患者 134 例，其中男 74 例，女 60 例， 平均年龄（47.015.1）岁，平均病程 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 （36.212.1）个月；包括痛风、骨关节 炎、骨质疏松症等。两组一般资料比较， 差异无统计学意义（P 0.05） ，具有可 比性。 1.2 方法 收集患者年龄、性别、病程、临 床表现、血清 T-SPOT.TB、血清结核抗 体、抗酸杆菌涂片及培养、结核杆菌杆 菌纯蛋白衍生物（TST）等资料。采用 上海复星科技有限公司提供的试剂盒。 实验步骤及结果判定严格按试剂盒说明 书进行。阳性率=阳性例数/总例数，阴 性率=阴性例数/总例数，阳性预测值= 真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数） ，阴性预测值=真阴性例数/（真阴性例 数+假阴性例数） 。 1.3 统计学方法 采用 SPSS 19.0 统计学软件进行 数据分析，符合正态分布的计量资料数 据用均数标准差（xs ）表示，两组间 比较采用 t 检验；不符合正态分布的改 用中位数 M，四分位数间距 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 Q（P25，P75）表示，两组间比较采用 非参数检验（秩和检验） ；计数资料用 率表示，组间比较采用 2检验，以 P 0.05） 。风湿免疫病组 T-SPOT.TB 检查， ESAT-6 和 CFP-10 合并肽段斑点形成细 胞数为 71.48（35.66，664.12） ；非风湿 免疫病组为 60.72（23.26，506.63） 。风 湿免疫病组患者有 5 例经痰培养及抗酸 染色诊断为 ATB，T-SPOT.TB 合并肽 段斑点形成细胞数最小为 68 sFcs/106 PBMc，最大为 240 sFcs/106 PBMc，T- SPOT.TB 阳性预测值 9.62%（5/52 ） 、 阴性预测值 100.00%（80/80） ；非风湿 免疫病组患者中有 7 例诊断为 ATB，T- SPOT.TB 斑点形成细胞数最小为 0 sFcs/106 PBMc，最大为 800 sFcs/106 PBMc，T-SPOT.TB 阳性预测值 8.96%（ 6/67） 、阴性预测值 98.53%（67/68） 。 3 讨论 结核杆菌感染免疫功能正常人群 后，首先被单核-巨噬细胞吞噬，但不 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 足以将其清除，而后被纤维结缔组织包 裹、局限形成结核性干酪样肉芽肿，呈 现无症状 LTBI，随着各种原因导致机 体免疫功能低下，结核杆菌可复燃转变 成 ATB。我国属于结核病高发病大国， 而且随着不规范抗结核治疗方案实施， 结核杆菌变异及其治疗耐药现象明显增 加，如何正确诊断显得格外重要。T- SPOT.TB 技术是近几年兴起的检测机体 结核杆菌感染的新方法，临床应用价值 值得高度关注。 对于非结核分支杆菌感染，国外 有学者对结核筛查无症状受试者及鸟分 支杆菌感染者检测 T-SPOT.TB 发现全 部为阴性，提示 T-SPOT.TB 检测对结 核分枝杆菌有极高的特异性3。叶秋月 等4观察 T-SPOT.TB 在肺结核患者阳 性率为 90%，显著高于肺结节病（27.3%） ， 而且 ESAT-6 和 CFP-10 合并肽段斑点 形成细胞数 565 sFcs/106 PBMc 也显著 高于肺结节病 46 sFcs/106 PBMc，提示 T-SPOT.TB 对肺结核诊断及鉴别诊断意 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 义非常大。近年来多项研究也证实 T- SPOT.TB 检测结果与细菌学、组织病理 学比较发现 T-SPOT.TB 灵敏度超过 90%5-6，显示很好的应用前景。黄毅 等7Meta 分析结果提示 T-SPOT.TB 检 测对中国人菌阴肺结核的诊断价值较高。 有学者在 T-SPOT.TB 对肺外结 核应用价值方面进行了研究。程红燕等 8发现结核性脑膜炎患者外周血 T- SPOT.TB 检测敏感度为 80.33%，特异 度为 90.63%，阳性预测值为 94.23%， 阴性预测值为 70.73%，对中枢神经系 统感染有确切鉴别诊断价值；田祺9研 究发现 T-SPOT.TB 在活动性结核外周 血中敏感度为 90.91%，特异度为 87.69%， 胸腔积液中敏感度为 84.1%，特异度为 95.0%，综合判别较结核抗体及腺苷脱 氨酶对活动性结核病具有较高诊断价值； 沙正凯等10 研究发现结核性胸膜炎 T- SPOT.TB 外周血敏感度为 88.3%，特异 度为 88.9%，阳性预测值为 93.7%，阴 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 性预测值为 76.9%，胸腔积液中敏感度 为 94.4%，特异度为 95.4%，阳性预测 值为 97.1%，阴性预测值为 91.3%，胸 腔积液 T-SPOT.TB 较外周血能更好明 确诊断；苗瑞瑞等11 研究发现在骨关 节结核中血清 T-SPOT.TB 敏感度为 91.36%，特异度为 100%，较结核抗体 有较高的诊断价值；吴佳玲等12研究 发现血清 T-SPOT.TB、腺苷脱氨酶及结 核抗体任意一项阳性诊断结核性胸膜炎 敏感度为 98.24%，特异度为 63.64%， 如血清 T-SPOT.TB 阳性或腺苷脱氨酶 及结核抗体阳性则敏感度为 91.23%， 特异度为 81.81%，提高了特异度，降 低了漏诊率。总之无论是肺内外结核病， 血清或者胸腔积液以及脑脊液、骨组织 等标本 T-SPOT.TB 已成为近年诊断结 核病的有效手段。 风湿免疫病由于糖皮质激素及免 疫抑制剂、肿瘤坏死因子拮抗剂等的应 用，理论上有诱发新的结核杆菌感染或 使潜伏性结核杆菌活动可能。国外有人 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 12 报道，英夫利昔单抗、依那西普及阿达 木单抗三种常用的抗肿瘤坏死因子制剂 应用后活动性结核发病率明显提升13- 14；国内梁东风等15 及裘昊曼等16 也观察到上述三种药物治疗类风湿关节 炎及强直性脊柱炎可诱发活动性结核病； 左晓霞17也发现结缔组织病患者容易 伴发结核病。 风湿免疫病由于 机体特有属性，结核杆菌感染隐匿，检 测显得更加困难。钟一鸣等18观察 T- SPOT.TB 诊断结缔组织病合并结核感染 敏感度显著高于结核菌素试验，且特异 度达 92.3%，T-SPOT.TB 诊断结核感染 的斑点形成细胞最佳截断值为 38 sFcs/106 PBMc，假阴性相关危险因素 分析发现与年龄、免疫抑制剂或激素应 用以及淋巴细胞减少症、低蛋白血症等 无关。王宏智等19 观察 78 例风湿病患 者，61 例 T-SPOT.TB 阴性患者随访发 现有 2 例此后诊断为结核感染，17 例 T-SPOT.TB 阳性患者此后诊断为肺结核 5 例、结核性胸膜炎 2 例、结核性心包 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 13 炎 1 例、结核性腹膜炎 1 例、皮肤结核 2 例、淋巴结核 2 例，提示风湿病或者 结缔组织病容易合并结核杆菌感染，且 T-SPOT.TB 对结核杆菌感染有确切诊断 及鉴别诊断价值。田恒创20研究发现 系统性红斑狼疮患者应用两种以上免疫 抑制剂且达 3 个月以上更容易发生结核 菌感染，血清 T-SPOT.TB 敏感性优于 结核菌素试验，特异性两者无明显差别， 未发现外周血 CD4+T 淋巴细胞数影响 T-SPOT.TB 检测结果。上述研究提示风 湿免疫病患者容易合并结核病，免疫紊 乱状态不影响 T-SPOT.TB 对合并结核 杆菌感染的诊断价值。 也有部分学者认为免疫低下状态 与结核病患病率无相关性。如代佳伟 21报道免疫缺陷病毒感染及获得性免 疫缺陷综合征患者与健康体检者、医务 人员三组比较血清 T-SPOT.TB、两种 - 干扰素释放试验以及 TST 中潜伏结核阳 性检出率无统计学意义（P 0.05） ，提 示结核感染与机体免疫状态无关，这一 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 14 结果与本文相符。本研究发现风湿免疫 病患者 T-SPOT.TB 检测阳性率仅为 39.39%（52/132） ，非风湿免疫病患者 约为 46.53%（67/134） ，前者反而低于 后者，但对两组 T-SP