三生脂泰对大鼠及家兔食饵性高脂血症的作用

三生脂泰对大鼠及家兔食饵性高脂血症的作用 高脂血症是诱发冠状动脉粥样硬化性心脏病的独立危险因素，降血脂治 疗可以显著减少冠心病患者心血管事件及死亡率。以他汀类为代表的 3- 羟-3-甲基戊二酰辅酶 A 还原酶抑制剂为最有效的降血脂治疗药物1， 其他的降脂药包括烟酸类、胆固醇螯合剂等。但目前所使用的各种降血 脂治疗药物多有肝脏损害等副作用，HMG-CoA 抑制剂尚有少见但严重的横 纹肌溶解作用，严重者可致死亡2。因此，寻找有效而不良反应小的 降脂药物仍是目前降脂药研究的重要课题。辅酶 A 是广泛参与体内糖、 脂肪及蛋白质代谢的重要生物活性物质，尤其是参与脂肪酸 -氧化，产 生的乙酰辅酶 A 进入三羧酸循环为机体提供能量。Consolo 等道高血脂患 者静脉注射辅酶 A 可降低血甘油三酯水平3。但辅酶 A 口服易被破坏， 其巯基在胃肠道中亦被氧化，并在消化道中降解脱磷而失去活性。目前 仅有注射制剂，不利于高血脂患者长期的降脂治疗。因此对辅酶 A 制剂 进行改造，加入一定的保护剂后制成口服剂，观察该口服制剂对高血脂 的作用。 1 材料与方法 1.1 试验动物雄性 SD 大鼠，体重 180220g。雄性新西兰白兔，体重 1.62.2kg。试验动物由第二军医大学实验动物中心提供。 1.2 试验药物三生脂泰由济南鲁强医药科技有限公司提供；辅酶 A 前体药 泛硫乙胺由黑龙江省豪康制药厂生产。 1.3 血脂测定用 OLYMPUSAU1000 自动生化分析仪对血总胆固醇、甘油三酯、 低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇分别以胆固醇氧化酶法、甘 油磷酸氧化酶法、酶法及选择遮蔽酶法测定。 1.4 高脂血症模型及药物给药方法及分组 1.4.1 试验一健康成年雄性 SD 大鼠 70 只，观察 10 天后在乙醚麻醉下眼 球后静脉丛采血测定血脂基础水平，然后分组，每组 10 只，开始喂高脂 饲料并同时给予下列药物每日 2 次灌胃：阴性对照组喂辅酶 A 口服保护 剂 1100mg/kg/日；阳性对照组喂食泛硫乙胺 2000mg/kg/日；三生脂泰每 日 200U/kg、600U/kg 及 2000U/kg；正常动物对照组除喂食普通饲料外， 每日以 20ml/kg 蒸馏水灌胃。口服药物溶于蒸馏水给药，容积同正常动 物组。给药后第 14 天乙醚麻醉下眼球后静脉丛采血复查血脂。 1.4.2 实验二健康雄性新西兰白兔 56 只，观察 10 天后耳静脉采血测定血 脂基础水平，然后分组，每组 8 只，开始喂高脂饲料并同时给与下列药 物：阴性对照组喂三生脂泰胶囊，825mg/kg/日；阳性对照组喂食泛硫乙 胺 1200mg/kg/日；三生脂泰每日 100U/kg、400U/kg 及 1500U/kg；正常 动物对照组除喂食普通饲料外，每日以 20ml/kg 蒸馏水灌胃。给药后第 20 天耳静脉采血复查血脂。 1.4.3 试验三在确定了三生脂泰的降脂作用后，进一步以该口服剂为对照 观察其与不加保护剂的辅酶 A 原药口服对高血脂的作用进行比较：健康 成年雄性 SD 大鼠 60 只，观察 10 天后在乙醚麻醉下眼球后静脉丛采血测 定血脂基础水平，然后分组，每组 10 只，开始喂高脂饲料，并同时给与 下列药物每日 2 次灌胃：阴性对照组喂辅酶 A 口服保护剂 1100mg/kg/日； 三生脂泰每日 800U/kg 及 2000U/kg；辅酶 A 原药每日 800U/kg 及 2000U/kg；正常动物对照组除喂食普通饲料外，每日以 20ml/kg 蒸馏水 灌胃。口服药物溶于蒸馏水给药，容积同正常动物组。给药后第 14 天乙 醚麻醉下眼球后静脉丛采血复查血脂。 1.5 统计学方法试验数据以均数标准误表示，用方差分析进行统计分析， P0.05 判定为统计学差异有显著性。 注：上述各指标单位均为 mmol/L 2 结果 2.1 三生脂泰对大鼠高脂血症的作用试验前各组大鼠血脂无显著差异，见 表 1。高脂饮食同时给药结果表明大剂量三生脂泰灌胃 2 周可以显著降低 大鼠血清总胆固醇水平及低密度脂蛋白胆固醇水平，与阳性对照药泛硫 乙胺相似，中剂量辅酶 A 口服粉剂亦可显著降低大鼠血清低密度脂蛋白 胆固醇水平。辅酶 A 对高密度脂蛋白胆固醇未见明显影响。 表 1 三生脂泰治疗前各组大鼠血脂水平 注：上述各指标单位均为 mmol/L 图 1 图 1 不同剂量三生脂泰口服后对高脂饮食大鼠血脂的影响 注；P0.01versus 正常对照；P0.05，P0.01versus 高脂对照 2.2 三生脂泰对家兔高脂血症的作用家兔实验前血脂水平见表 2。口服大 剂量三生脂泰可以显著降低家兔血清总胆固醇水平及低密度脂蛋白胆固 醇水平，与阳性对照药泛硫乙胺相似；三生脂泰尚可显著降低血清甘油 三酯水平。药物治疗后高密度脂蛋白胆固醇水平呈下降趋势，但辅酶 A 组下降比阳性对照组泛硫乙胺程度轻。 表 2 三生脂泰治疗前家兔基础血脂水平 表 3 不同剂量三生脂泰口服 20 天对高脂饮食家兔血脂的影响 注：P0.05，P0.01versus 正常对照；P0.05，P0.01versus 高脂 对照；P0.05，P0.01versus 泛硫乙胺。上述各指标单位均为 mmol/L 2.3 三生脂泰与辅酶 A 原料药口服对大鼠高血脂作用的比较 三生脂泰经口给药可以显著降低高脂饮食大鼠血清总胆固醇水平和低 密度脂蛋白胆固醇水平；大剂量三生脂泰尚可进一步降低甘油三酯水平； 但辅酶 A 原料药口服对血脂无明显影响。 图 2 三生脂泰及辅酶 A 原药口服后对高血脂家兔总胆固醇的影响 注：P0.01versus 正常对照；P0.05versus 高脂对照 图 3 三生脂泰及辅酶 A 原药口服后对高血脂家兔低密度脂蛋白胆固醇的 影响 注：P0.01versus 正常对照；P0.05，P0.05versus 高脂对照 图 4 三生脂泰及辅酶 A 原药口服后对高血脂家兔甘油三酯的影响 注：P0.01versus 正常对照：P0.05versus 高脂对照 3 讨论 降血脂药物可以显著改善冠心病患者的心血管预后，目前常用的 HMG-CoA 还原酶抑制剂是有效的降血脂治疗药物1，5，但与其他许多降血脂 药物相似，这类降脂药亦有肝脏损害甚至严重的致死性横纹肌溶解的不 良反应作用，尤其是在疾疾治疗过程中与其他药物合用时2。因此， 有效而不良反应小的降脂药物有利于患者长期用药及降少与其他药物合 并用药时的不良反应。辅酶 A 是广泛参与体内糖、脂肪及蛋白质代谢的 重要生物活性物质，尤其是参与脂肪酸 -氧化，产生的乙酰辅酶 A 进入 三羧酸循环为机体提供能量。有道高血脂患者静脉注射辅酶 A 可通过促 进脂肪酸的氧化，促进甘油三酯分解代谢，从而降低血甘油三酯水平 3，4。但辅酶 A 口服易被破坏，其巯基在胃肠道中亦被氧化，并在 消化道中降解脱磷而失去活性，目前仅有注射制剂，不利于高血脂患者 长期的降脂治疗。因此对辅酶 A 制剂进行改造，加入一定的保护剂后制 成口服剂观察其降血脂疗效。研究表明，三生脂泰可有效改善大鼠及家 兔高脂饮食诱发的高脂血症，降低总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇，大 剂量时还可降低甘油三酯水平。 本试验选用的阳性对照药泛硫乙胺为泛酸的衍生物，在体内易转化生成 辅酶 A，在日本 1966 年作为维生素类药物上市，后又开发为调脂药6。 研究结果发现三生脂泰的降低血胆固醇的疗效与泛硫乙胺相似，而且辅 酶 A 还可以降低甘油三酯