医院感染消毒灭菌效果监测

医院感染消毒灭菌效果监测取样指导 根据消毒技术规范的要求，现将我院消毒灭菌效果监测、 环境微生学监测的采样方法、结果判定、质控标准等规范如下： 环境卫生学监测：包括空气、物体表面、医务人员手的监测 采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须 尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得6 小时，若样品保 存在冰箱内送检时间不得24 小时。 医院室内空气的消毒 I 类环境：包括层流洁净手术室和层流洁净病房，要求空气中 的细菌总数10 cfu/m 。 II 类环境：包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通 保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房。 III 类环境：包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、 治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病室和房间， 要求空气中的细菌总数500 cfu/m。 1、 采样时间：消毒处理后，操作前进行采样。 2、采样方法：平板暴露法 （1）布点方法：室内面积30 m;，设内、中、外对角线 3 点， 内外两点距墙 1 米；室内面积30 m，设东、西、南、北 4 角及中 央 5 点，其中东、西、南、北均距墙 1 米。 （2）采样方法：将直径为 9cm 普通营养琼脂平板放在室内各采 样点处，采样高度为距地面 1.5 米，采样时将平板盖打开，扣放于 平板旁，暴露 5 分钟，盖好立即送检。 3、计算公式： 空气细菌菌落总数（cfu/ m）=50000N（A T） 式中 A 为平板面积（cm） ；T 为平板暴露时间（min ） ；N 为平 均菌落数（cfu） 。平板面积：半径 （ 即 3.14） 那么此公式 可以简化为 N157。 4、注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静 止 10min 进行采样。 5、质控标准（结果判定）： 类区域：细菌总数10cfum (或 0.2cfu/平板)，未检出金黄 色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格； 类区域：细菌总数200cfum (或 4cfu/平板)，未检出金黄 色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格； 类区域：细菌总数500cfum (或 10cfu/平板)，未检出金黄 色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。 物体和环境表面消毒 I 类环境：包括层流洁净手术室和层流洁净病房。 II 类环境：包括普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、普通 保护性隔离室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护病房。 I、II 类环境要求物体表面的细菌总数5 cfu/cm。 III 类环境：包括儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、 治疗室、供应室清洁区、急诊室、化验室、各类普通病室和房间， 要求空气中的细菌总数10 cfu/cm。 IV 类环境：包括传染病科及病房。要求物体表面细菌总数15 cfu/cm。 1、采样时间:在消毒处理后进行采样。 （或是在灭菌处理后，存 放有效期内采样） 2、采样面积：被采表面100/ cm，取全部表面；被采表面 100 cm，取 100 cm。小型物体表面的结果计算，用 cfu/件表示。 3、采样方法： 压印采样法：采用一直径为 5.6 cm（面积约为 25 cm）的消毒 塑料专用平皿，倾注营养琼脂培养基，并使培养基高出平皿边缘 1-2mm,凝固后置 4冰箱保存待用。采样时将平皿上的琼脂表面 直接压贴在被检物体表面 10-20 秒后送检。 置 37培养箱培养 24-48 小时，计算并鉴定细菌。 用 5cm5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积 100 cm，连续采样 4 个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭 子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转动棉拭子， 剪去手接触部位，将棉拭子投入 10 ml 含相应中和剂的无菌洗脱液 试管内，立即送检。门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采 样。 4、采样结果计算方法： 物体表面细菌 平皿上菌落平均数 采样液稀释倍数 菌落总数(cfu/cm) 采样面积(cm) 采样液稀释倍数为 10：（棉拭子投入 10 ml 含相应中和剂的无 菌洗脱液试管内） 5、质控标准： 、类区域：细菌总数5cfucm，并未检出致病菌为消毒 合格。 类区域细菌：总数10cfucm，并未检出致病菌为消毒合 格。 类区域细菌：总数15cfucm，并未检出致病菌为消毒合 格。 母婴同室、早产儿室、婴儿室、 新生儿室及儿科病房的物体表 面不得检出沙门氏菌。 手和皮肤黏膜消毒： 1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后 立即采样。 2、采样面积及方法： （1）手的采样:被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗 脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦 面积约 30 cm)，并转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉 拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。 （2）皮肤粘膜采样：用 5cm5cm 的标准灭菌规格板，放在被检 皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格 板内横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部 位后，将棉拭子投入 10 ml 含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内， 立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。若表面 不足 5cm5cm，可用相应面积的规格板采样。 3、检测方法：将采样管在混匀器上振荡 20s 或用力振打 80 次， 用无菌吸管吸取 1ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 2 个 平皿，内加入已溶化的 4548的营养琼脂 15ml18ml ，边倾注 边摇匀，待琼脂凝固，置 361温箱培养 48h，计数菌落数。 4、采样结果计算方法： 平板上菌落的平均数 采样液 稀释倍数 细菌总数(cfu/ cm ) 采样面积(cm) 其中采样面积即为 302。 5、质控标准： 、类区域工作人员：细菌总数5cfucm，并未检出金黄 色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。 类区域工作人员：细菌总数10cfucm，并未检出金黄色 葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。 类区域工作人员：细菌总数15cfucm，并未检出金黄色 葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。 母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，不 得检出沙门氏菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消 毒合格。 皮肤粘膜：参照手的卫生学标准执行。 医疗用品卫生标准： 1、 进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用 品必须无菌。 2、 接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数应20cfug 或