分子生物学新技术在中医外科上的应用ppt课件

继承，创新 1.摘 要 2.角蛋白的特性 3.角蛋白相关的遗传性皮肤病 4.展 望 近几年对于人类角蛋白的基础生物学和 一些特异性的单基因疾病的病因学及发病 机制研究取得了重大进展，至今已发现共 有 19种角蛋白基因突变与特异性疾病相关 。本文总结了角蛋白的特性、相关疾病基 因突变特点及相关的遗传性皮肤病分子遗 传学研究现状。 继承，创新 继承，创新 是一种抗机械、抗化学刺激的蛋白质，是角质形成细胞的 主要结构蛋白，是组成中间纤维蛋白的主要成分。 人类角蛋白的基因达于所有的上皮细胞中，包括很多内在 器官（单上皮）的单层上皮细胞，还有很多复杂的多层上 皮（复层上皮）细胞 . 角蛋白基因的正确表达以及角蛋白网的功能正常是表皮细 胞稳定和正常分化的基础。 编码角蛋白基因的突变可造成角蛋白结构的异常。 目前已发现 10余种遗传性皮肤病与角蛋白基因突变有关： 先天性大疱性鱼鳞病样红皮病、单纯性大疱性表皮松解症 、 Siemens鱼鳞病、表皮松解性掌跖角皮症、念珠状毛发 、先天性厚甲症、白色海绵状痣等。 继承，创新 结 构 角蛋白的分子结构都是类似的，分为螺旋杆 状区、非螺旋的头区和尾区以及连接区。杆区 由约 310个氨基酸组成，有 4个 螺旋片段即 1A 、 1B、 2A、 2B，片段之间为 3个非 螺旋的连 接区 L1、 L12、 L2。在 1A起始区及 2B结尾区有 两个高度保守的区域 ,称为螺旋起始区 (HIP)及 螺旋结尾区 (HTP),分别与头区和尾区相连。 10余种构成毛发 和甲的毛发角蛋 白或 “ 硬 ” 角蛋 白。 功能分类 继承，创新 20余种构成表皮 和许多内脏器官 或体腔上皮的角 蛋白或 “ 软 ” 角蛋白 型角蛋白为中 性或碱性蛋白质 分子生物学分类 继承，创新 型角蛋白为酸性 蛋白质 继承，创新 角蛋白基因主要簇集于染色体的两个区域 ,编码 1型角蛋白的基因 ，除了 K18，均位于染色体 17q12 21。所有编码 2型角蛋白的基 因，包括编码 K18的基因均位于染色体 12q13。 角蛋白的大部分基因主要是通过使用生化、免疫和 cDNA克隆方 法确认的。 所有的角蛋白，包括很多多态性的可变区都是有单拷贝基因编码 的。 在人类已经发现了至少 49种编码角蛋白的基因。 角蛋白基因的表达具有组织和细胞特异性。其中 22种在不同的上 皮细胞中表达， 15种是毛细胞特异性， 5种为毛根内鞘角蛋白角蛋 白 . 基因突变一般以显性方式遗传 ,主要为错义突变 ,少数为无义突变 、剪接位点的突变等。 继承，创新 角蛋白相关的遗传性皮肤病 继承，创新 BCIE又称表皮松解性角化过度，是一种 罕见的常染色体显性遗传性皮肤病，以形成 红斑、水疱及角质层增厚为特征。 继承，创新 继承，创新 BCIE是由 K1和 K10基因的中央保守区发生 突变所致，其突变大多位于 1A和 1B区的 螺旋 末端序列。 1A和 1B区是与角蛋白丝聚集相关的 高度保守区域 ,在维持细胞的完整性上有重要作 用。此区域的突变虽然不影响二聚体的形成， 但导致角质形成细胞内的张力丝排列异常，使 角蛋白聚集成块，细胞内水肿，导致表皮松懈 。 继承，创新 WSN是一种良性的常染色体显性遗传疾 病，主要累及非角化层鳞状上皮细胞。它主 要表现为口腔的白色海绵状斑，偶尔累及食 管和肛门生殖器黏膜。 有报道本病出现 K4和 K13突变。 继承，创新 继承，创新 monilethrix为常染色体显性遗传疾病，主要表 现为不同程度的秃发和呈串珠状的间断性的椭圆形 结节和缩窄。显示毛发的结构蛋白丝泡角蛋白为 此疾病的主要候选基因。丝泡角蛋白基因或者位于 1型角蛋白簇基因的 17q12-21，或者位于 2型角蛋 白簇基因的染色体 12q13。 继承，创新 PC是一组常染色体显性遗传性外胚叶发育不良 的疾病，主要临床表现为营养不良性甲肥厚伴角化 过度。 PC主要类型为 PC1型和 PC2型。 PC1为 K16 或 K6a基因突变所致， PC2则与 K17或 K6b基因突变 相关。 继承，创新 继承，创新 继承，创新 单纯性大疱性表皮松解症 (EBS) 表皮松解性掌跖角皮症 (EPPK) 大疱性鱼鳞病 (IBS) 继承，创新 展展 望望 继承，创新 角蛋白对于维持细胞的稳定和功能正常具有重要的作角蛋白对于维持细胞的稳定和功能正常具有重要的作 用，因此，我们仍需要进一步研究。用，因此，我们仍需要进一步研究。 对于研究工作来说，关于疾病修饰基因在角蛋白疾病对于研究工作来说，关于疾病修饰基因在角蛋白疾病 中的作用是一个潜在的发展领域，可以对涉及控制中间中的作用是一个潜在的发展领域，可以对涉及控制中间 丝动力学的分子进行深入研究，了解治病基因的调控机丝动力学的分子进行深入研究，了解治病基因的调控机 制以及角蛋白分子间的相互作用机制。制以及角蛋白分子间的相互作用机制。 基因治疗将是今后研究的热点，但由于角蛋白突变的基因治疗将是今后研究的热点，但由于角蛋白突变的 显性负作用，基因治疗仍然是这组疾病中的一个巨大挑显性负作用，基因治疗仍然是这组疾病中的一个巨大挑 战。战。 恶性肿瘤的生物治疗已被列为除手术、放疗、 化疗之后第四种治疗恶性肿瘤新的重要手段，它 是指通过宿主自身免疫机制的作用或给予动物的 物质来达到抗肿瘤的目的，虽然有一些重新组合 的生物治疗物质被公认为某些恶性肿瘤的标准治 疗， 但从整体而言，实体瘤的生物治疗尚处于探 索和试验阶段，疗效还不理想，有许多问题尚未 解决。 大肠癌的情况基本相仿。本文就大肠癌对 当前常用的几种生物治疗，包括干扰素、白介素 （ IL-）和单克隆抗体导向治疗等逐一进行扼要的 介绍和评述。 继承，创新 继承，创新 干扰素对各种肿瘤具有抗肿瘤作用，包括白血病（ HCL） 、慢性髓性白血病（ CML）、表皮 T细胞淋巴瘤和 Kaposi肉 瘤。白血病和淋巴瘤是最敏感的肿瘤单独应用干扰素或 与化疗联合应用其疗效均极明显。 其它实体瘤如结肠癌、乳房癌、肺癌、骨肉瘤中单独用干 扰素的效应小于 10。 干扰素与 5 FU联合应用时，可增强 5-FU的抗癌效应，尤 其对以往未经任何治疗的病人，其有效率明显提高，可达 64，治疗方便、花费低，毒副作用小。 联合治疗时，给药剂量、用药强度、输注速度和时间控制 都对药物抗肿瘤的活性起着作用。 激活 T淋巴细胞 刺激单核细胞吞噬肿瘤细胞 辅助 B淋巴细胞生长 和分化并诱发释放淋巴因子 IL-2作用 继承，创新 继承，创新 许多基础和临床研究已证明： IL 2与 LAK细胞联合用于临 床治疗转移性黑色素瘤和肾细胞癌。 IL 2与化疗联合应用的 疗效更显著，目前已进入临床研究。 鉴于 IL 2在 T细胞激活和增生中的重要地位和它在免疫反应 中所扮演的关键性角色，它可能是任何治疗癌肿的成功的免 疫疗法的主角。作为辅助治疗， IL 2可能对绝大多数实体肿 瘤有效。 在临床应用 IL 2的时候，更需注意它可引起几种全身性剂 量限制的副作用，最常见是的血小板减少症，其次有抵抗力 的降低、可逆性心肌炎、心律紊乱伴低血压和心肌梗死、低 血压。 IL 2的累积剂量尚可引起肾功能减退和液体滞留。 其他副作用有恶心、呕吐、腹泻、胃炎、肝功能损害、胆汁 郁滞性高胆红素血症、发热、寒战等，都是可逆的。 继承，创新 单克隆抗体导向治疗的机理： 单克隆抗体（ MCAB）导向治疗的基本原理是将细胞毒 性与补体和免疫系统的效应细胞结合，对细胞增生起调节 作用，以及抗遗传性型疫苗。 MCAB通过补体串联或激起 抗体依赖细胞的细胞毒性（ ADCC）可作为一种免疫治疗剂 。 继承，创新 单克隆抗体导向治疗的应用： 加强 MCAB效能的策略就是将抗体和细胞毒性物质 结合起来，授予特异性，并降低单独应用这种毒性 物质的毒性。 临床上试行免疫结合的细胞毒性物质包括毒素、化 疗药物和放射性同位素。免疫毒素是将 MCAB与高 度致死的细胞毒素结合在一起。 有许多植物和细胞的毒素可被利用。广泛使用的有 蓖麻毒素、白喉毒素和假单孢杆菌外毒素。 继承，创新 单克隆抗体导向治疗的应用： 加强 MCAB效能的策略就是将抗体和细胞毒性物质 结合起来，授予特异性，并降低单独应用这种毒性 物质的毒性。 临床上试行免疫结合的细胞毒性物质包括毒素、化 疗药物和放射性同位素。免疫毒素是将 MCAB与高 度致死的细胞毒素结合在一起。 继承，创新 单克隆抗体导向治疗的应用： 免疫毒素是将 MCAB与高度致死的细胞毒素结合在一起。有许多植 物和细胞的毒素可被利用。广泛使用的有蓖麻毒素、白喉毒素和假单 抱杆菌外毒素。 将化疗药物与 MCAB结合的目的是通过与抗癌抗体结合达到向肿瘤 细胞释放更多药物分子，用于与肿瘤特异 MCAB相结合的细胞毒性药 物有博莱霉素、氯甲蝶吟、阿糖胞昔、长春花植物碱类、顺铂、丝裂 霉素 C等。应用这些药物的优点是发挥它们的抗肿瘤活力、最大的耐