GBT 18932.25-2005 蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法液相色谱-串

霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法液相色谱一串联质谱法of , ,in 18932本部分的附录A、附录部分由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。本部分由中华全国供销合作总社归口本部分起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本部分主要起草人:庞国芳、李学民、张进杰、曹彦忠、范春林、刘永明、赵为、郭彤彤、石玉秋。本部分系首次发布的国家标准。 霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法液相色谱一串联质谱法范围 18932的本部分规定了蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的液相色谱一串联质谱测定方法。本部分适用于蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哩青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定。本部分的方法检出限:青霉素G、青霉素V、苯噢青霉素为1. 0 pg/氯青霉素、双抓青霉素为2. 0 pg/氧禁青霉素为0. 5 pg/规范性引用文件下列文件中的条款通过 18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性(6379725:1981) 6682分析实验室用水规格和试验方法( 6682696:1987)3原理试样中青霉素残留，用去离子水溶解后，溶液用相色谱标法定量。4试荆和材料除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为 6682规定的一级水。谱纯。谱纯。级纯。(1+3):量取25 75 00 6 使用前分别用5 10 持柱体湿润。霉素V、乙氧禁青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准物质:纯度)99%青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液:准确称取适量的每种标准物质(分别用乙睛(制成浓度为1. 0 mg/备液贮存在一18冰柜中。氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准工作溶液:根据需 霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液(用空白样品提取液稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。有电喷雾离子源(分析天平:感量0. 1 01 0 5 00 度为0. 1 空度应达到80 量精度士。样的制备与保存6. 1试样的制备对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出。备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。定步骤7. 1试样溶液的制备称取5确到。01 g)置于150 人25 液体混匀器上快速混合1 试样完全溶解。样液移至下接贮液器中，以小于或等于3 mL/相萃取柱后，用5 去全部流出液。在“压抽干20 后用3 脱，收集洗脱液于刻度样品管(，于40水浴中用氮气吹干仪吹干，用乙睛(容至1 匀后，供液相色谱一串联质谱仪测定。谱柱: . 5 150 2. 1 径)或相当者;b流动相及流速见表1;c)柱温:300C;d)进样量,20 1液相色谱梯度洗脱条件时间/pL/(含。酸)/(%)乙睛八%)0 喷雾离子源(;扫描方式:正离子扫描;检测方式:多反应监测;电喷雾电压:5 500 V;雾化气压力:帘气压力:助气流速:6 L/子源温度:4000C;定性离子对、定量离子对和去簇电压(聚焦电压(碰撞能量(碰撞室出口电压(簇电压、聚焦电压、碰撞能b)c)d)e)幻目h)i)表2名称定性离子对/( m/a)定量离子对/(m/-)碰撞能量/60335/176335/160:4520011青霉素60351/192351/160:4020011苯哇青霉素402/160402/243402门60:4520011邻氯青霉素436/160436/277436/160:5020011乙氧蔡青霉素415/199415/256415/199:;4520011双氯青霉素470/160470/311470/160:1定性测定在相同试验条件下，样品中待测物质与同时检测的标准品具有相同的保留时间，并且所选择的两对离子丰度比相一致，则可判定为样品中存在该残留。青霉素G、青霉素V、乙氧禁青霉素、苯哩青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液配成的基质混合标准溶液(别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱条件下，青霉素G、青霉素V、乙氧禁青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素的保留时间和离子丰度比见表33 m/z)离子对丰度比/(%)保留时间/60335/60351八92:。:9. 21苯哩青霉素402/160402/60436/2771008312. 49乙氧禁青裤素415/199415/60470/1,平行试验按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。空白试验除不称取试样外均按上述分析步骤进行。结果计算蜂蜜中青霉素残留量利用数据处理系统计算或按式(1)计算:10001000(1) X 试样中被测组分残留量，单位为微克每千克(Kg/c从标准工作曲线得到的试样溶液中被测组分的浓度，单位为纳克每毫升(ng/;V试样溶液定容体积，单位为毫升(m最终试样溶液所代表的试样质量，单位为克(9)。注:计算结果需将空白值扣除。精密度本部分的精密度数据是按照 6379的规定确定的，其重复性和再现性的值以95%的可信度来计算。得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限(r)，蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素含量范围及重复性方程见表40如果两次测定值的差值超过重复性限(r)，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)，蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯噢青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素含量范围及再现性方程见表4 g/复性限r= lg =0. 886 0 Ig 627 7青霉素r=0. 980 9 lg 148 0=0. 957 2 Ig 645 1苯噢青霉素1r=0. 757 9 Ig 916 6=O. 813 7 Ig 617 3邻抓青霉素2r=0. 936 4 Ig 086 2=O. 848 9 Ig 562 5乙氧蔡青霉素0. 5r= Ig 151 1=0. 831 1 Ig 606 6双抓青霉素2r= lg 138 3=O. 801 8 Ig 516 4注:，为两次测定结果的算术平均值。 料性附录)六种青拼索标准物质的总离子流图六种青霉素标准物质的总离子流图， 10.5， 44 0. 56 2. 49 3. 05 5. 60 0 1