硕士学位论文-咖啡酰奎尼酸衍生物的设计、合成及生物活性研究.pdf

分类号 单位代码 学号 加 介次掌 硕 士 学 位 论 文 中文论文题 目 英文论文题 目 申请人姓名 指导教师 合作导师 专业名称 研究方向 所在学院 论文提交日期 年月 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计 、合成及生物活性研究 论 文 作 者 签 名 班则解一 指导教师签名 赵 是 论文评阅人 评阅人 评阅人 评阅人 评阅人 吴永江 教授 浙江大学药学院 吴理茂 副教授 浙江大学药学院 吴晕 副教授 徐州师范大学化学化工学院 答辩委员会主席 委员 少 ,勺 口贝 口贝 口贝 口贝 委委委委 答辩 日期 一一 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果 。 据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表 或 撰 写 过的 研究 成 果,也 不 包 含为 获 得 逝些大崖 立 或 其 他 教 育 机 构 的 学 位 或 证 书 而 使 用过的材料 。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说 明并表示谢意 。 学 位 论 文 作 者 签 “ 秘 丽 峨 签 字 日 熟 、 肛乡 “ 户 日 学位论文版权使用授权书 本 学 位 论文 作 者 完 全了 解立 兰大生 有关 保留、 使 用学 位论 文的 规定,有 权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅 。 本人授 权 卫应大全 可以 将学 位论 文的 全 部 或 部 分内 容 编 入 有关 数 据 库 进 行 检 索,可以 采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存 、汇编学位论文 。 保密的学位论文在解密后适用本授权书 学位论文作者签名 签 字日 期加 裕 矶 呱 年乙 月异 日 导 师签名 赵 显 签 字 日 期 加 年了 月 分 日 致 谢 时光花英,在浙江大学药学院中药与天然药物研究室攻读硕士学位的学习生 涯即将结束。回想起这三年多学习生活的点点滴滴,使我想起一句诗词“ 问渠 哪得清如许,唯有源头活水来”,不禁心涌感激之情。 在赵星教授领导的研究团体里的经历和见识将是我一生的宝贵财富。 这里有 先进的学术思想,我了解了在药物研究方面最新进展及动向 这里有先进的仪器 设备,我积累了对这些仪器设备的操作经验 这里有团结友爱、 奋斗不息的团队, 在团队里的每一天我都得到了队友们的支持和鼓励 。 我的导师,赵星教授,在这短短几年时间里对我进行了精心的指导和耐心的 栽培。 在专业知识和技能方面,恩师赵星教授悉心传授 。 每一次上,赵 老师都会亲自组织我们对学科方向上的最新进展进行学习,传授给我们他做实验 时的经验和独门绝技。 赵老师非常注意培养我们细致入微,严谨求实的科研作风。 严谨,是做学问的人的安身立命之本,而在这方面赵老师永远是我们学习的榜样。 写文章时赵老师从一个标点符号到整体框架的构建都不厌其烦地帮我一遍又一 遍地修改,切切实实地让我体会到了赵老师严谨的治学态度和对学生的关心。 每 次的工作汇报,赵老师仔仔细细地帮我分析实验中遇到的问题,规划好下一阶段 的工作,使我少走了很多弯路。 赵老师严谨的风格 、 开阔的思维、 对工作的敬业 精神时时刻刻激励着我在学习和实验工作上能够取得更大的进步。 总而言之,我 在攻读博士学位期间获得的每一份成绩中都凝结着赵老师的心血。 在这里,我向 我的恩师赵星教授道一声感谢师恩 感谢导师李校堑教授在研究方向、 科研方法及发展思路上的指导和支持 。 感谢研究室巫秀美博士对我工作上的支持、 以及文章修改和日常事务上的帮 助。同时感谢研究室工作人员吕旦旦小姐给予的帮助。 感谢药学院李连达院士、 曾苏教授 、 胡永洲教授 、 楼宜嘉教授 、 程翼宇教授 、 陈枢青教授 、俞永平教授的关心 。 非常感谢德育导师张小玲副书记对我工作上的指导和生活上的关心照顾 。 感谢刘伟老师、 黄佩芳老师、 王立明老师、 朱卡琳老师、 黄欣欣老师的热心 帮助。 感谢杨雷香博士、 王晓雨博士、 施树云博士、 宋丽艳博士 、 孙莲莉博士、 董 南博士、 王彩芳博士、 陶巧凤博士、 丁红霞博士、 汪峰硕士、 董盛谊硕士、 敖雷 硕士、 卢启洪硕士、 郑威硕士、 任胜芳硕士、 冯玉冰硕士、 翁林佳硕士、 吴迪瑶 硕士、 来弈刚硕士、 马娜硕士、 马伟丽硕士、 胡明辉硕士、 吴昊硕士、 张相宜硕 士、肖昌钱硕士、 何正春硕士、 周 良彬硕士在学习和生活上的关照。 特别值得一提的是,感谢我的家人这些年对我的教导和鼓励,他们伟大的关 爱一直陪伴着我走过这段艰辛而又美好的日子。 张丽娟 年月 于浙江大学紫金港校区 摘要 天然产物的开发利用在药物发展史上一直占据着非常重要的地位。 近几十 年,随着单晶衍射和核磁共振等技术的发展,药物分子设计和组合化学在药物 研究和开发中的地位日益提高。 但实践证明,这些方法的应用并未使新药开发 的成功率提高,而在临床应用的一些新药中天然产物仍占大部分的比例。天然 化合物所具有的独特结构特征,仅通过化学合成是不可能获得的。咖啡酞奎尼 酸是一类自然界中分布十分广泛的天然产物,本论文即是围绕咖啡酞奎尼酸类 天然产物的结构改造而展开。 咖啡酞奎尼酸是一类活性广泛的天然产物,目前研究主要集中在植物化学 分离和药理活性方面。我们选取咖啡酸奎尼酸为母体化合物,对其进行结构改 造,并对咖啡酸奎尼酸类衍生物的合成进行了初步研究,设计并合成了个系 列包括中间体在内的化合物个,其中个为新化合物。关于该类化合物的 合成及分离尚需进一步的摸索和改进。 关键字天然产物叻 口 啡酸奎尼酸设计合成生物活性。 一, , , 币 ,币 卯, , 卯 乙 目次 致谢, 摘要, 目次 缩写 第一章 咖啡酸奎尼酸类天然产物的研究进展 咖啡酸奎尼酸类天然产物的研究进展 本论文的总体设计思路, 参考文献, 第二章 咖啡酸奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 研究背景和立题依据 咖啡酸奎尼酸衍生物的结构改造设计 咖啡酞奎尼酸衍生物的合成路线设计 咖啡酞奎尼酸衍生物的合成, 实验部分 参考文献,、, 第三章 化合物活性测定 体外细胞毒活性测定, 抗氧化活性测定 参考文献 附录部分化合物的谱图, 个人简历及科研成果 缩略语 一 一,一一一 一,一 ,一小 一 叩 口 一一一一 细胞株的名称列表 一 一 人胃癌细胞 人宫颈癌细胞 人慢性粒细胞白血病细胞 人肺癌细胞 人早幼粒白血病细胞 结肠癌细胞 食管癌细胞 肾上腺嗜铬细胞瘤 人前列腺癌细胞 人鼻咽癌细胞 人卵巢癌细胞 第一章咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 天然产物的研究和开发历来都是人类寻找新药以及向重大疾病作斗争的重 要手段之一。 实践证明,从天然产物中发现活性先导化合物进而研发创新药物是 行之有效的一条重要途径。 天然产物所特有的化学结构和生物活性的多样性,提 高了在天然产物中发现活性先导物进而研发创新药物的成功几率。 天然药物甚至 在全球范围有着越来越重要的地位世界天然药物市场主要分布在西欧、 亚洲及 美国。据统计,一年间全球上市的多种小分子药品中,系来自 天然产物或其衍生物,其中直接为天然产物。年有报道称世界畅销的 种药品中,种为天然产物或其衍生物。 我国年来研究成功的新药以上系 与天然产物有关 【 】。由此可见,天然产物与创新药物的关系密不可分,从天然产 物研发创新药物蕴藏着巨大潜能。 众所周知,中国地大物博,有着极其丰富的天然药物资源,其中药用植物种 类达一万多种,且科属品种繁多,分布在全国各种不同的地理环境中,富含生物 多样性和化学结构多样性,目前绝大多数尚未进行深入研究,这些资源为研发创 新药物提供 了丰富的物质基础。 随着人们对天然产物研究的逐渐深入,天然产物 的开发和利用再次成为新药研发的利器,我们必须利用我国所特有的丰富资源, 抓住契机,为人类寻找新药开辟更广阔的思路和途径。 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 奎尼酸,卜, , ,一川界一一, 一,金鸡纳酸以游离态或以与咖啡酸、阿魏酸 、没食子酸等形成的不同醋的形式广泛存在于自然界中,即广 义的绿原酸。 尽管奎尼酸在莽草酸途径中不是重要的中间体,但其存 在与该途径的调控有着重要关系进而,相当数量不同种类的奎尼酸在天然产 物中的广泛存在还表明它在莽草酸途径中有其它代谢活性或与此途径中的其它 过程亦有相关,如奎尼酸盐的 一 位磷酸化。年,和 鉴定了奎尼酸的结构及其立体化学特征。不久,他们又根据结构相 关性推测奎尼酸 、莽草酸 、 及没食子酸应该有生物同源的可能性 。这个假设在 年后,当莽草酸途径被完全阐明后得到证实。 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 奎尼酸可通过简单的途径以高纯的对映异构体形式从植物中分离得到,因 此奎尼酸可以购买得到,丰富的手性资源使其成为具有很大吸引力的合成不对 称的、复杂的天然产物衍生物的起始物 。 咖啡酞奎尼酸,是一类由奎尼酸与数目不等的咖啡 酸通过醋化反应缩合而成的酚酸类天然成分。 这类化合物广泛存在于植物界如 金银花、 旋覆花、 苍耳等中药山碴,苹果、 李子等水果及咖啡、 茶叶等饮品中。 其中在很多中药 茵陈、竺麻 、 金银花等 中广泛存在的绿原酸 就是抗菌 、利胆的有效成分 。从菜蓟 仰口 妙中分离得到的菜蓟素 翻也是一种保肝利胆成分。 由于该类化合物在自然界中广泛的分布和独特 的化学结构及显著的生物活性,引起了科学家们广泛的研究兴趣,近年来,国 内外学者就的植物化学和药理活性进行了广泛深入研究,发现其具有一些重 要生物活性,极具临床实用价值。 一取代咖啡酞奎尼酸类化合物 狭义的绿原酸是指由咖啡酸与奎尼酸组成的一取代的缩酚 酸,异名咖啡软酸,化学名 一一 咖啡酸奎尼酸一一,是植物 体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物,是众多药材 如 金银花、 茵陈、 杜仲 以及中成药 如复肝尼、 双花注射液、 粉刺口服液 抗菌解毒、 消炎利胆的主要有效成分 。同时也是某些中药制剂质量控制的重要指标 。 年,和两位科学家首次确定了绿原酸的化学结构,并命 名为 一 。 一 咖啡酞奎尼酸一 。 一 价。年,报道从咖啡 中分离得到了绿原酸的异构体,即 一一 咖啡酞奎尼酸一 。 一 价。 等人于一年报道了朝鲜蓟 洋蓟 中 一 。 一 咖啡酸奎尼酸一一 的存在。年,根据 口统一命名规则,将绿原酸的命名更正为 一 。 咖啡酸奎尼酸一 。 一,但是由于多年来人们使用的习惯,直到 现在很多文献中依然保持着原来的命名方式。 这势必造成一定的混乱,不利于科 研的进一步发展 。 本节所有命名都将依据的统一命名规则。 绿原酸广泛存在于高等双子叶植物和蔗类植物中,主要存在于忍冬科忍冬属 、 菊科篙属 植物中,其中含量较高的植物主要为杜仲 、 金银 花 、向日葵 、 继木 、 咖啡 、 可可树等。 另外,水果 如苹果 、 梨 、 蔬菜 如马铃薯 、 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 番薯 、大豆、 小麦、绿茶等日常食用品中都含有绿原酸类物质。人们每天消耗 的植物性食品和饮品较多,可以吸收高达的绿原酸 。 绿原酸的异构体在自然界中也广泛存在,一般而言,绿原酸主要存在于咖啡 、 苹果 、朝鲜蓟、茄子、 桃子等食物中,而新绿原酸 一 。 一则主 要存在于樱桃 、 李子、 接骨木、 杏子等食物中,隐绿原酸一一 在水果及蔬菜中的含量就相对很少 了。 绿原酸是植物中的葡萄糖经过一系列的酶促反应生物合成的。 葡萄糖在酶的 催化下转化成莽草酸,后者再转化成苯丙氨酸,最后经合成酶的作用得到绿原酸。 绿原酸具有广泛的生物活性,现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食 品、 保健 、 医药和日用化工等多个领域。 绿原酸是一种重要的生物活性物质,具 有抗菌、 抗病毒、 增高白血球 、 保肝利胆 、 抗肿瘤 、 降血压 、 降血脂 、 清除自由 基和兴奋中枢神经系统等作用。 绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂,其抗氧化能力要强于咖啡酸、 对经苯酸、 阿魏酸 、丁香酸、丁基经基茵香醚和生育酚 。咖啡酸 、绿原酸、,一 二咖 啡酞奎尼酸等酚酸都对自由基显示清除活性。可能的抗氧化机制为儿茶 酚类部分作为过氧自由基接受氢原子的供体,继而转化成低活性产物。 因此,它们可终止链自由基反应 。 绿原酸中含有一定量的酚经基,能消除经基 自 由基和超氧阴离子等自由基的活性,从而保护组织免受氧化作用的损害 。 等人已经证实了苹果中的绿原酸等酚酸类物质可以增强小鼠血浆中抗 氧化能力 其后,又有报道指出,苹果汁在体内表现出对人类低密度脂蛋白 氧化的抑制活性 。 蔬菜 、水果中的多酚类如绿原酸 、咖啡酸等可通过抑制活化酶来抑制致癌 物黄曲霉毒素的变异原性, 绿原酸还可通过降低致癌物的利用率及其在 肝脏中的运输来达到防癌 、抗癌的效果 。绿原酸对大肠癌 、肝癌和喉癌具有显 著的抑制作用,被认为是癌症的有效化学防护剂【 。等研究发现绿原 酸抑制射线诱发小鼠骨髓细胞小核,提示绿原酸的抗氧化活性起重要作用【 “。 近年来,日本学者研究证实了杜仲茶的变异原性抑制作用与 杜仲叶所含的绿原酸、京尼平戒、京尼平贰酸等抗变异原性成分有关,揭示杜 仲茶对肿瘤的预防具有重要意义【 。等人【 】报道过苹果汁的摄入可以增 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 加血浆中酚酸类化合物的浓度,通过用新鲜苹果中提取出来的成分给药,观察 到酚酸类成分有剂量依赖性的抗结肠癌细胞和肝癌细胞增殖的活性。至今为 止,很少人研究过人类结肠中植物性食品中的酚酸类化合物的有效性。有报道 指出 结肠中的抗癌成分已被确定,它们是几种咖啡酸奎尼酸衍生物绿原酸, 一一 咖啡酞奎尼酸,一 口 一 对经基苯烯丙酸奎尼酸,一一 对经基苯烯丙酸奎尼酸, 一 。 一 对经基苯烯丙酞奎尼酸一 。另外,新鲜苹果中只鉴定出 一一 咖啡酸奎尼 酸和 一一 咖啡酸奎尼酸 而在结肠中亦发现 一一 叻 口 啡酞奎尼酸和 一一 咖啡酞奎 尼酸。 这是由于在胃肠道中的肠上皮细胞中的醋酶诱导的异构化作用而导致的。 葡萄糖一一 磷酸酶一一体系在体内平衡血糖调控中发挥重要作用。它 承担着由葡萄糖异生和糖原分解产生内源性葡萄糖的形成。 最近,绿原酸被确认 为是大鼠肝微粒体中葡萄糖一一 磷酸移位酶一一一的第一个新型特 异性抑制剂 【 。绿原酸与大鼠肝脏中微粒体一一体系相互作用的动力学研 究显示一一一为靶分子,而在毫摩尔浓度绿原酸作用下也不影响其他 催化单元,因此绿原酸是迄今发现的第一个一一一天然特异性抑制 剂 。一一一对 一 磷酸葡萄糖的水解起主要的限制作用,一一 活性越高,一 磷酸葡萄糖的水解越多。所以在绿原酸及其合成类似物 存在下,通过测定正常大鼠肝微粒体中 一 磷酸葡萄糖的水解程度,来评价这些化 合物对移位酶活性的抑制强度。结果表明绿原酸 位的改变对抑制作用影响很 小但在 位上引人含芳香环的亲脂性基团,则使抑制强度增加倍,即得强效 抑制剂 。 给大鼠肝脏灌注化合物天的生物测定分析表明,葡萄糖异生和糖原分 解呈剂量依赖性抑制,一一作为这类化合物对肝葡萄糖产生抑制作用的干 扰靶标 。一一一抑制剂将有利于降低非胰岛素依赖性糖尿病的肝葡萄 糖排出量过高,显示出绿原酸在治疗糖尿病方面的良好前景【 。 娄红祥等从金银花水溶性部分经乙酞化后分得绿原酸四乙酞化物。 经药理实 验表明,对四氯化碳引起的小 鼠肝损伤有明显的保护作用】。 这为阐明 金银花具有保肝利胆之功效提供 了理论依据 。 近期有报道,从葛首属植物中分离 出来的绿原酸及 一一 咖啡酞奎尼酸都有抗乙肝病毒的活性【 。 教授在研究有些植物次生代谢物作为抗逆转录病毒剂时,认为绿原 酸是有希望成为抗艾滋病毒的先导化合物。 这与英国专利报道的杜仲树皮 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 或叶的碱性提取物治疗和预防艾滋病毒感染很有效果的结论相一致。 绿原酸作为一种重要的生物活性物质,已经引起国内外学者的广泛关注。目 前绿原酸的主要来源是从天然植物中提取,国外 美、日、 德等 大多是从咖啡豆 中提取,而我国以往一直是从金银花中提取。 目前我国对于绿原酸的提取纯化以 及开发利用水平还远远落后于发达国家。我国有着丰富的富含绿原酸的植物资 源。 如杜仲是我国特有的经济树种,其种植面积广 、 资源丰富,杜仲叶中绿原酸 的含量一般在左右。此外,我国还是向日葵的生产大国,有着极为丰富的葵 粕资源,向日葵籽中的酚酸类化合物是绿原酸。 这充分说明了我国存在着很 大的开发优势,如果积极开发这些资源,我国将成为绿原酸的开发大国。 二咖啡酸奎尼酸类化合物 二叻 。 啡酸奎尼酸类化合物普遍存在于保肝利胆中草药中,其中以菜蓟素 ”,一 二一一 咖啡酞奎尼酸 研究最为广泛。这类化合物大多具有保肝利胆 作用,对巨噬细胞及四氯化碳引起的肝损伤具有保护作用 。,一 二一一 二咖啡酸奎 尼酸记,一 为中药旋覆花的有效成分,国内对其药理活性 进行 了较为详细的研究,也取得了一定的成果。 二咖啡酸奎尼酸类化合物广泛存 在于金银花,桅子等植物中,而菜蓟素则存在于林荫千里光中。年左右,二 咖啡酞奎尼酸类化合物如,一 二一一 咖啡酞奎尼酸、,一 二一一 咖啡酸奎尼酸、, 二一 。 一 咖啡酞奎尼酸,相继从菊科植物中分离得到 【,川。 近年来,在 阔苞菊属 、山金车属蒙塔纳、 苍耳属类植物中也报道了这些化合物的存在一 。 年,一 二一 。 一 咖啡酸奎尼酸从苍耳属植物中分离出来。 混合型的咖啡酸奎 尼酸类化合物到年代才陆续从咖啡豆中分离得到 。年,一一 阿魏酞一一 咖啡酞奎尼酸经分离得到年,一 。 一 叻 口 啡酸一 一 。 一 阿魏酞奎尼酸从中果咖 啡中分离得到而 一 。 一 叻 。 啡酸一一 。 一 芥子酞奎尼酸于年从茜草科桅子属植 物中分离得到 【年,在药用植物飞蓬中分离得到 一一 丙二酞基一,一 二一 咖啡酞奎尼酸,一一 丙二酸基一,一 二一一 咖啡酞奎尼酸,一一 丙二酞基一,一 二一 咖啡酞奎尼酸,一 。 一 丙二酸基一,一 二一 。 一 咖啡酞奎尼酸同年又从不同植物中 分离得到 一 。 一 墟泊酸一,一 二一 。 一 叻 口 啡酸奎尼酸,从紫苑科蕾香蓟中分离得到 一一 阿魏酞一一一 对经基苯烯丙酞奎尼酸,一一 阿魏酞一一一 对经基苯烯丙酸奎尼 酸,一一 阿魏酸一一 。 一 对经基苯烯丙酸奎尼酸【 。 第一章 咖啡酞辛尼酸类天然产物的研究进展 二咖啡酸奎尼酸类化合物,同样也具有诸多药 理活性,如抗氧化、 抗炎、 抗病毒 、 抗纤维化、 抑制平滑肌收缩 、降血脂等, 由于其在自然界中的存在较之绿原酸相对较少,所以研究的也没有绿原酸那样 广泛,但是这类化合物的独特生物活性己经引起越来越多人的关注,相信以后 很有可能成为研究热点之一。 和等利用人中性粒白细胞以酵母多糖或刺激产生 呼吸爆发,检测氧自由基的生成情况,结果发现有很强的捕获超氧阴离子 和经自由基的能力】。用四氯化碳所致小鼠原位及 一介导的小鼠 心、 肝匀浆化学发光法实验证实,具有抗过氧化作用 。对黄嘿吟氧化 酶亦有抑制作用,使得次黄嘿吟氧化为黄嘿吟,再氧化为尿酸的过程中所产生 的超氧阴离子减少网 。 用钙离子载体诱导人外周血多形核白细胞白三烯的生成试验中,当 加入为一 气一,一 时,白三烯的生成明显减少。白三烯作为 炎症介质,有较强的白细胞趋化作用 。通过对白三烯的合成和释放的抑制 作用而产生抗炎作用。对单核细胞的迁移及超氧阴离子的产生有抑制作 用,同时也具有抑制组胺释放的作用。有报道指出从山艾属植物中分离得到的 ,一 和,一 二一一 咖啡酞奎尼酸能够抑制小鼠腹膜细胞释放组胺,的这些 作用都将参与其抗炎活性。 从植物。中分离得到的咖啡酸奎尼酸对分叶核的白细胞产 生的胰肤酶的释放 、髓过氧化物酶的活性 、 超氧化物和白三烯的生成的 抑制作用已被证实。 其中,一 二一一 叻 口 啡酸奎尼酸对胰肤酶的释放有强烈的抑 制作用半数抑制浓度。 二拼咖啡酞奎尼酸甲醋类衍生物对髓过氧 化物酶的抑制作用最强。拜奎尼酸甲醋类或游离竣酸类对超氧化 物产生的抑制率相当。 一一拜。 先前亦有报道 从 日本忍冬中分离得到的,一 二一 口 一 咖啡酞奎尼酸及其甲醋 类化合物对人类血小板凝集有很强的抑制活性。 近期,从柑桔属植物中分离出的 一一 阿魏酞一一一 叻 口 啡酞奎尼酸及其甲醋类 化合物对小 鼠血小板一有中等抑制活性【 。 对 乙型肝炎病毒抗原表达 、病毒复制有 良好的抑制作用 第一章 咖啡酞李尼酸类天然产物的研究进展 哪】。 体外实验研究表明,在培养细胞中对复制及抗原生成有较强的抑 制作用。抑制培养液中和合成和分泌的分别为一脚 和一娜。能抑制一聚合酶活性,。 为一脚 。 陇 。 采 用鸭肝病毒感染鸭的整体试验模型,对体内抗乙肝病毒作用的研究结果显 示,给予第 天时血清病毒水平即开始下降,第天时明显降低, 留剂量组作用最强。停药 天后病毒仍维持在较低水平,明显低于 生理盐水组和阿昔洛韦组 。 近期发现离首属植物的地上部分的甲醇提取物有抗保肝活性。 在该生 物活性的指引下,分离出种奎尼酸衍生物,所有化合物在体外抗活性测 定中均显示出较好的活性 。在转染的人类肝细胞株中,种 化合物均降低了成熟颗粒的水平,表明它们是潜在的抗的植 物药。 年,从紫苑中分离出来的,一 二一一 咖啡酞奎尼酸诱导细胞的神 经突生长。 据报道,细胞外信号调控的激酶及磷酸肌醇激酶的活 化对神经生长因子诱导细胞分化有着至关重要的作用。的 作用与的作用机理相似 通过和激酶依赖通路促进神经突生长 另外,促进的磷酸化。总之,是通过和激酶的活 化使磷酸化从而引起细胞的分化。 番薯中分离出来的,一 三一一 叻 口 啡酞奎尼酸的抗血管紧张素转化酶 活性,即抗高血压活性最强,接下来是,一 二一一 咖啡酸奎尼酸及,一 二一一 咖啡 酸奎尼酸 。 近来有报道指出,二咖啡酸奎尼酸有预防或治疗阿尔茨海默病的活性,但 其作用机理并未阐明哗 。 美国加州大学就及其衍生物对病毒一的作用进行 了较全面的 试验研究】。 研究结果发现,能抑制培养组织中一的复制及整合酶的催 化活性,抑制浓度分别为一几 和一,中毒浓度是其抗病毒 浓度的倍以上。 进一步研究发现,对 细胞株中一的复制也有抑制作 用,浓度为 一几,抑制整合酶的浓度更低,而对 细胞的中毒浓度 。 用不同浓度的一的整合酶或底物进行滴定试验发现的作用 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 位点在整合酶。 动力学分析和透析试验显示,对整合酶的抑制作用是不可逆 的。现已合成了数十种类似物并对其细胞毒性,抗病毒活性及对一整合 酶的抑制作用进行了测试。 研究结果发现,多数人工合成的类似物对培养组 织中一的整合有明显抑制作用,抑制作用为一。鉴于对 一整合酶较强的选择性抑制作用,可以预见有可能成为开发抗药物 重要的先导化合物 【,。 广泛存在于茜草科 、 忍冬科、 千屈菜科 、 蔷薇科、 马鞭草科 、 茶科 、 茄 科 、 寥科等植物中,尤其在菊科分布最为普遍。 在我国传统中药金银花 、 旋覆花 、 苍耳、 扁蓄中均含此成分。 此类中药多具有活血抗炎、 保肝利胆 、 抗衰老的功效, 因此,借鉴国外对等咖啡酞奎尼酸类药理实验研究成果,促进我国传统中药 的开发,可能具有一定的意义 。 其它叻 。 啡酞奎尼酸类化合物 年,等人首次从菊属 以哪人夕的甲醇提 取物中分离得到了,一 三一一 叻 。 啡酞奎尼酸,并对其结构进行了确证 【 。 及其合作者于年从阔苞菊属植物中分离提取出, ,一 四一一 咖啡酸奎尼酸 】 。, ,一 三一 。 一 咖啡酸奎尼酸则于年才从菊科向日葵族苍耳属“ 中分离得到。 最近几年,还分到了一类新的咖啡酞奎尼酸化合物,年报道从蕃荔枝属 植物中得到了 一一 咖啡酸基一 粘奎尼酸一 。 一一 。 一,此类化合 物的奎尼酸上 位取代基处于平伏键,有异于常见的咖啡酞奎尼酸化合物。 年 从 菊科植 物 东风 菜 中也 分 离得 到 一个,一 二一一 叻 口 啡 酞基 一 粘 奎尼 酸 ,一一一。年,从旋花科番薯属马鞍藤叶子的乙酸 乙醋部分分离出了 个新化合物,就是,一 二一一 咖啡酞一一一 对经基桂皮酸奎尼酸 和,一 二一一 咖啡酞一,一 二一一 对经基桂皮酸奎尼酸。年,从蒙古药用植物鸦 葱中分离得到两个新型的奎尼酸衍生物, ,一 三一 。 一 咖啡酸奎尼酸和, ,一 三一 口 一 阿 魏酞奎尼酸和 。 年,在菊花中首次分离得到个咖啡酸奎尼酸糖普和个二咖啡酸 奎尼酸糖普。 小花鬼针草中分离得到,一 二 【一 。 一一 咖啡酸 奎尼酸基卜 一 。 一 咖 啡酸奎尼酸,经验证,该化合物具有抑制组胺释放的活性,用一 荧光法对 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 奎尼酸,叻 口 啡酸和该化合物进行活性测定,结果显示抑制组胺释放的。 分别 为林 岁林 留协 留。年,在菊科植物中分离得到一个含 有 一 经基环己 基一,一 二烯一一 酮结构的咖啡酞奎尼酸类衍生物,它与绿原酸, 二咖啡酞奎尼酸的生物活性相反它有促进氧化的活性,介导氧化人类低 密度脂蛋白。 此化合物中的 一 经基环己基一,一 二烯一一 酮结构很少在天然产物 中存在 。 同年,在番薯和金钟藤中都首次分离出,一 二一 。 一 咖啡酞奎尼酸甲醋, 二一一 咖啡酞奎尼酸甲醋, ,一 二一一 咖啡酸奎尼酸甲醋,一 三一 口 一 咖啡酞奎尼 酸甲醋,一 。 目前发现的咖啡酸奎尼酸类化合物已逐渐增多,但仍有待于在植物中进一步 开发利用以及对其药理活性做相应的研究。 结语 咖啡酞奎尼酸类化合物在自然界中广泛存在,绿原酸是其最重要的天然产物 之一。 绿原酸及其类似物简单的化学结构,广泛的植物来源和多样的生物活性引 起 了国内外诸多研究学者的兴趣 。 目前国内外主要还是以研究它们的植物化学来 源及药理活性为主,这些研究成果给这类化合物提供 了更多丰富的植物资源,并 发现了更多新的生物活性,特别是开发一些在临床极具研究价值的化合物。 本论文的总体设计思路 天然产物在新药发现中占有非常重要的地位 。据报道年全世界销售 额前位的药物,有近一半来自天然产物及其衍生物 。虽然在世纪一 年代,随着化学工业的发展与进步,从天然产物中开发新药进程放缓,但进入 年代,人们又重新开始重视天然产物的研究与开发,其主要原因是天然化合 物的结构多样性和独特性 。虽然组合化学等化学合成手段为药物的筛选提供 了 大量筛选物质,但由于缺乏天然化合物丰富的结构多样性,新药开发的成功率 并没有提高。人们充分认识到天然化合物所具有的独特结构特征,仅通过化学 合成是不可能获得的。因此对天然产物的研究是新药研发中一种不可替代的重 要手段 。 咖啡酞奎尼酸作为一类重要的天然产物,由于其结构和活性的多样性,而 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 引起我们的研究兴趣 。本论文结合本实验室在天然药物的植物化学分离成果的 基础上,以咖啡酸奎尼酸为先导化合物,运用药物化学分子改造理论,对该天 然产物进行合理的结构改造,希望能得到活性较好的抗肿瘤药物或抗病毒药物, 并能挖掘到其它一些重要的生物活性。在此基础上对化合物的构效关系进行研 究,旨在为该类天然产物的进一步研究提供一定依据。目前一部分合成化合物 的药理活性数据尚在进一步的测试之中。 第一章 咖啡酞辛尼酸类天然产物的研究进展 参考文献 几, 已 【 【 【 【 【 于德泉 天然产物与创新药物研究开发中国天琳药欲, ,”,川一 , , ,一 ,”一, 川一, ,一, , ,一 , , ,一 , 如,一 , 叹 夕,一 川一 ,一 ,一, , ,一 , ,加 从 记 ,一 叨几 月 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 , 毋 ,一 , 九 五记 ,一 , , ,一 币 , ,一 国家医药管理局中草药情报中心站植物药有效成分手册【北京 人属卫兰岁沂社,一 , ,一 人 五 泛,一 , , , 一 九 五 滋,一 ,即 , ,一 , ,一 , 飞 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 【】 【 【 【 【 【 碑,一 , , 一 , 邓一人 为浅 ,一 ,心, 邓 人浅, 一 , 一一, , , ,兀, ,一 已今,一 娄红祥金银花中水溶性化台物的分离与结构鉴定中草或, ,一 ,兀, 叹浅 人 了 己尽 ,一 柳云溪欧洲植物药会议介绍国办医参 橙物药分姗, 一 英英国专利 , , 只 丫 内 、 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 【 尸 句 户尽,一 , 一 今 ,一 夕 【 【 【 【 【 【 【 【 , 彻理,一 , 娜 尽,一 , ,一 ,一,一,一, ,一一一 彻,一 ,兀,一 一一一尸 彻今, ,一 ,一 一一一 彻尽, ,一 , 一一一, 八 了 已浅, 一 扒 第一章 咖啡酸奎尼酸类天然产物的研究进展 【】 】 【 【 人 了,一 ,一,一, 一 尹,脚,沙 ,一 , 一妙加, ,一 , , ,一,一 人已, 一 ,几, ,一 冲 浅, 一 , 腼, 犯 ,一 , , ,于 第一章 咖啡酞辛尼酸类天然产物的研究进展 【 【 【 【 【 【 么州 一川 毋,一 仃 如,一 尸人 夕尽, 一 ,丽, , ,一 自 儿一一,一一一 皿 ,阴 ,一 , 峋 矽 ,一 , 一,月 即, , ,一 尸 厂 口哪 ,一 , 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 , 一才邵夕, 一 【, , 即 尽 衫 户, ,一 ,至 玩, , 邵, ,一 ,一,一,一 ,一 【, 彻几 介, 一 , 一, ,一 一一尸 人 少 一尽,一 【,一 一彻尽, ,一 【,”, , 一一浅 ,一 【 第一章 咖啡酞奎尼酸类天然产物的研究进展 【 【 【 ,一 , 一 今,一 ,瓦, 一 貂,一 , ,川一, , 一一 ,一 , 月 即舒夕,一 ,厂 人亡 ,一 第二章 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 研究背景和立题依据 人类使用药物始自于天然物质。 “ 神农尝百草,一日遇七十二毒,得茶而解 之 ”体现了我国史前对植物药的应用。奎尼酸发现于年,最早是从金鸡纳 树皮中提取纯化获得的,故又名金鸡纳酸。奎尼酸是一种具有高使用价值的精 细化工产品和医药中间体,奎尼酸可以促进链球菌的生成,促进心 、子宫等器 官组织的发育,还可以作为蚕的饲料添加剂和烟草增香剂的替代品等,其用途 极为广泛。奎尼酸广泛存在于许多植物中,如金鸡纳树 、茶树 、 烟草叶、木 瓜 、 胡萝 卜 叶、蔓越毒、 玫瑰 、 批把果橡树和一些中草药如灯盏花 、 金银花、 白花刺参 、北五味子、北寄奴等各种蔬菜水果和饮料等中亦含有丰富的奎尼 酸,如马铃薯 、苹果 、梨、称猴桃 、叻 口 啡和茶等,特别是在称猴桃中奎尼酸是 主要的有机酸。因此,人们在日常生活中都能从食用的蔬菜 、 水果 、 茶和果汁 中或多或少地摄取奎尼酸类物质。 奎尼酸不但以单体的形式存在于植物中,是金鸡纳树皮的主要成分之一, 而且还大量地以复合物的形式存在,如包括咖啡酞奎尼酸类、 香豆酞奎尼酸类、 阿魏酸奎尼酸类、叻 口 啡酞奎尼酸醋类等化合物。除了常见的咖啡酸奎尼酸类化 合物以外,奎尼酸还与没食子酸基偶合而形成一类没食子酞奎尼酸化合物。近 年来,对没食子酞奎尼酸化合物的报道日益增多。 没食子酸奎尼酸的生物活性也非常广泛,具有抗病毒 、 抗肿瘤 、抗氧化、 治疗肥胖症等活性。年,等 分离得到个四取代的没食子酸奎 尼酸化合物,并对其抗病毒活性进行 了 研究,发现这些化合物既具有抑制 逆转录酶的活性,同时也可以抑制病毒的生长 。而具有这两种活性的植物 天然产物从未见报道过。随后该课题组又对二没食子酞取代的奎尼酸类化合物 进行 了跟踪研究,其中,一 二一 。 一 没食子酞奎尼酸具有抑制逆转录酶的活 性 。年,台湾学者对没食子酞 、咖啡酸奎尼酸类化合物的抗病毒机制研 究进行 了报道,报道指出,此两类化合物对逆转录酶均有较强的抑制作用, 但是对一 多聚酶的抑制活性不强。年,等人报道 了没食子 酞奎尼酸类化合物的抗肿瘤活性 。 第二章 咖啡酞辛尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 由于没食子酞奎尼酸类化合物在自然界中存在相对来说不是很广泛,故研 究报道相对较少。 但是该类化合物简单的结构和多样化的生物活性也不容忽视。 相信对此类化合物的研究在将来势必可以拥有更美好的前景和广阔的未来。 人类免疫缺陷病毒是引起人类获得性免疫缺陷综合症的 罪魁祸首,是影响人类健康最严重的疾病之一。病毒生命周期中的几 个生理环节已成为抗艾滋病治疗的重要靶点。 现有很多作用于重要酶复制酶、 逆转录酶、蛋白酶等等的抗药物已用于被感染的病人 。 但是由于 突变种的出现及副作用的产生,使得这些药物存在局限性,这促使人们去 发现更多不同类型的抗药物。 病毒复制的另一个重要环节是将病毒整合到宿主中,这个 环节需要一个很重要的酶整合酶,创 。整合酶的催化作用是产 生子代病毒所必需的,因此,能抑制该酶的药物应该是一个有效的抗艾滋病药 物 一,。最近,整合酶被公认为一个安全的抗作用靶点,因为没有相 似的酶作用于人体正常细胞,因此对人体正常细胞没有影响 川。 在过去的几年里,在寻找整合酶抑制剂方面做出了大量的努力,并产 生了许多整合酶抑制剂。 近期有报道一 菊首酸二咖啡酞一一 酒石酸和 二咖啡酞奎尼酸显示出潜在的抗整合酶活性,并具有中等强度 的抑制复制的活性【 ” 一 】。 咖啡酞奎尼酸类是奎尼酸衍生物中比较重要的一类,广泛在于许多中草药 如灯盏花 、金银花 、白花刺参 、北五味子 、 旋覆花等中。这类药物的重要功能 是抗病毒活性 一 。 二咖啡酸奎尼酸,在微摩尔浓 度下即可抑制整合酶。是特殊的整合酶抑制剂,它的抑制活性和 抗活性一致,是筛选抗药物的新靶点整合酶抑制剂的有力武器 。 我国学者充分利用现有资源,在这方面的研究已经领先国际水平 。国内第 一个具有自主知识产权、能够同时抗乙肝病毒和艾滋病病毒的化学 药物,一 二一 口 劲口 啡酞奎尼酸日前已经开始期临床研究,有望为我国治疗乙肝 和艾滋病开辟新途径 。负责主持研发该药的军事医学科学院放射与辐射医学研 究所董俊兴教授从年开始该药的研究,随后发现其同时具有较强的抗乙肝 病毒和艾滋病病毒作用。目前研究发现该药物临床前试验效果好,毒副作用低, 第一章 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 如果临床研究成功,这将是中国医药界的一颗重磅炸弹。抗艾滋病病毒体内外 试验表明,该药具有显著抑制整合酶的作用,能显著抑制病毒复制,延缓 或逆转猴艾滋病病变,而现有的 “ 鸡尾酒” 疗法仅能延缓病变。如在人体中获得 同样效果,这将在很大程度上延长艾滋病患者的生命 。同时,抗乙肝病毒的试 验发现,该药能显著抑制病毒抗原的产生和病毒复制,作用比现有治疗 乙肝药物更为持久。 据了解,该药已获得我国、 美国和欧洲等国发明专利授权, 并已获得国家食品药品监督管理局颁发的两个化学药一类新药临床研究批文, 并已在解放军医院进行 期临床研究。 咖啡酸奎尼酸类化合物的活性非常广泛,但是关于其引起不良反应的个例 也有报道,特别是关于绿原酸的致敏作用。早在世纪年代就有许多相关 的基础与临床研究。绿原酸是咖啡豆中的重要致敏成分,工人在吸入咖啡豆尘 埃后,发生气喘、 皮炎等,经皮试及在志愿者身上被动血清转移试验,确认绿 原酸为致敏成分,但食入未见致敏,经纸色谱和紫外光谱分析,推测绿原酸经 小肠后转化为无致敏活性物质。关于绿原酸的致敏机理,被认为是半抗原物 质,经一定反应与蛋白质上的氨基结合后而具有致敏活性,通过制备绿原酸与 人类血清蛋白的结合物并证实其有高度致敏活性。制备绿原酸与二乙胺的结合 物以阻断绿原酸与氨基结合的活性部位,证明其失去致敏活性。 六棱菊作为一种民间药用植物,具有清热解毒、 抗菌消炎等功效,疗效显 著。 赵星课题组从年始对六棱菊属植物进行了深入的植物化学和药理研究 一 。前期药理活性研究发现其突出的抗炎活性。进一步跟踪分离得到的活性 成分是二咖啡酸奎尼酸。鉴于实验室植物化学分离的结果,考虑到此类化合物 广泛的生物活性,我们开展了该类化合物结构改造的工作,希望能得到活性更 好的化合物,发现其它重要的药理活性,为新药开发提供一定依据。 咖啡酞奎尼酸衍生物的结构改造设计 咖啡酸奎尼酸类化合物在 自然界中广泛存在,绿原酸是其最重要的天然产物 之一。 绿原酸及其类似物简单的化学结构,广泛的植物来源和多样的生物活性引 起 了国内外诸多研究学者的兴趣 。 目前国内外主要还是以研究它们的植物化学来 源及药理活性为主,这些研究成果给这类化合物提供 了更多丰富的植物资源,并 第一章 咖啡酞辛尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 发现了更多新的生物活性,特别是开发了一些在临床极具研究价值的化合物。 但 是关于其类似物的合成及结构改造尚未形成研究热点,少有人研究。 咖啡酸奎尼 酸类化合物广泛的生物活性必定给其发展带来一定的限制,因此对其进行结构改 造后很有可能发现活性更高,选择性更好的化合物,并可能在这方面的研究中占 领一席之地。 作为初期的工作,我们主要设计思想是以合成绿原酸类似物,即 位取代的 衍生物位取代的衍生物,位二取代的衍生物及改变母核类衍生物为主 。通过 个小系列化合物的合成希望找到该类化合物有效的合成方法 及分离手段,同时为下一步的合成设计提供一定的依据。 尹入冲 、牙。 日 尹丫。 日 对绿原酸分子选取改造的部位 考虑到许多天然的抗氧化物质,如植物多酚、维生素、 尿酸等,容易在 特定条件下表现出原氧化作用,产生活性氧,引起氧化应激,导致损伤 和细胞凋亡 。这可能与这些分子结构中的儿茶酚结构相关。而且由于儿茶酚结 构的存在,使得分子与机体内的作用靶点也会增多,毒副作用增大,所以改造 首先选取在苯烯丙酞结构的邻二酚经基部位,我们将选取其它取代基,如甲氧 基 、卤素、 硝基等取代基来替代儿茶酚结构,可以考查邻二酚经基结构是否为 活性必需基团。如果改造成功,还可增加整个分子的稳定性 。 另外没食子酸奎尼酸类似物的广泛生物活性也引起 了我们的注意,在分子 设计中也希望引入苯甲酸的结构,与苯烯丙酸结构可作对照比较。同样也将没 食子酞上的个经基用其它取代基替换。 鉴于二咖啡酞奎尼酸的报道甚多且其生理活性很好,作为二咖啡酸奎尼酸 衍生物合成的初步探索,我们仅设计 了,位二取代奎尼酸,即在奎尼酸的, 第一章 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 位引入苯甲酞基或苯烯丙酞基。 奎尼酸的结构中有两类重要的官能团,首先是我们不断进行改造的多个不 同经基其次便是位的梭基 。无论在植物化学领域还是在药物合成领域,对 不同取代的奎尼酸甲醋类衍生物的报道甚少。但我们在相关化合物的报道中可 以了解到,将化合物中的梭基甲醋化后活性会有明显改变,且梭酸甲醋化后 可以明显改变其溶解性,带电荷数等物理性质,从而可以影响到药物动力学的 一系列参数。因此,我们尝试合成一系列咖啡酞奎尼酸甲醋类的衍生物,亦可 考察梭基是否为活性必需基团。进行此改造后有可能会得到生物活性及药物动 力学参数更佳的化合物。 依据以上设计,在酞化的位置,兼顾合成的难易程度,先后设计合成在奎 尼酸的不同部位引入苯甲酞基或苯烯丙酞基 。 另外,目前对咖啡酞奎尼酸衍生物研究较多的是其抗整合酶活性。 在 抗整合酶的三维构效关系研究中发现两个重要的药效团,即含 有任何一个药效团的化合物都可能有抗整合酶活性。 依据以上结论,加之 目前对菊芭酸的研究日益增多,了解较为透彻,前景较好咖啡酞奎尼酸衍生 物的分离非常困难等因素,我们考虑合成一系列改变奎尼酸母核而仍然保持其 生物活性的化合物。 目前选择乙二醇,一 酒石酸及 一 甲基间苯二酚为替代母核。 仃荃 悠 或 一 。“ 伊 片 。 、 有 ,。件 脚飞士众了 卜 二臼 二刀 士 ,七。 卜 祖的 土八 二 心,土 。士。 人 构效关系中两个重要药效团 综上所述,我们设计以下个小系列化合物的合成,包括在奎尼酸,及 第二章 咖啡酞辛尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 和位引入苯甲酞基或苯烯丙酞基,还包括对奎尼酸位梭基甲醋化和对母 核的改变。 、试、睽、军、蹬 、 了,、丫丫 一 一一一 众 入 。川 。 一 一 咬一 挤 懊 设计合成的小系列化合物 咖啡酞奎尼酸衍生物的合成路线设计 由于咖啡酞奎尼酸类化合物广泛存在于自然界,目前主要是提取分离获得, 对其植物化学研究及药理活性研究很是广泛,但关于该类化合物合成的报道相对 则较少。 年,等人报道了绿原酸的首次化学合成,该法采用奎尼酸为原料, 经过七步反应,总产率小于。此法明显的不足之处就是借助了一个不合适的 奎尼酸前体化合物骨架,致使多步都需要使用经基的保护策略及后续繁琐的酸碱 性脱保护基操作,而绿原酸在碱性条件下很容易被氧化,因此整个过程导致产率 很低,。 等人在年为 了研 究绿原酸及其衍生物对葡萄糖一一 磷酸酶 一一体系的抑制活性,合成 了一批咖啡酞奎尼酸类化合物的衍生物。 在合成中同样也使用 了一个奎尼酸前体化合物骨架,但使用的都是酸敏感的保护 基,避开 了在碱性条件下的水解 。所以合成产率有所提高,达到一 犯。合成 路线见 。 第三章 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 , ,一, 一 等报道的奎尼酸衍生物合成方法 研究发现,若改变芳香环上取代基则可形成更强效的抑制剂,如引入 一 氯苯 基丙基侧链,得到的化合物的对葡萄糖一一 磷酸酶一一体系的抑制活 性 达拜,是绿原酸的倍 。绿原酸醚化物醋基部分经改造所得化合物活性 都远强于绿原酸。目前,进一步优化先导化合物的研究工作正在进行,可望创新 成治疗非胰岛素依赖性糖尿病药物。 由此可见对咖啡酞奎尼酸类化合物的构效关 系研究是很有意义的一项工作,目前涉及这方面的研究还比较少。 直到年,才对绿原酸的合成进行再次报道。众认为有效 合成绿原酸最关键的方面是如何获得合适保护的奎尼酸中间体 以及采用酸敏感 的保护基 。 因此咖啡酸部分采用的是乙酞基保护 奎尼酸部分的保护作者试用 了 多种策略及条件,最后分析得到以下的条件是最佳的得到绿原酸的奎尼酸中间 体 。 丫 、 ,一, 第三章 咖啡酞奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究 等报道的奎尼酸衍生物合成方法 最后将两部分成醋,水解即得绿原酸,产率高达。此法为绿原酸的化学 合成提供 了一条有效的方法。 同时该课题组对另外三个单取代的咖啡酞奎尼酸类化合物的合成也做 了相 应的研究。采用的合成策略都是寻找合适的奎尼酸前体化合物,文中探索了 一些保护基的应用,对这类化合物的合成有很好的参考价值。 绿原酸及其异构体