标准解读
《GB/T 5522-1985 粮食、油料检验 过氧化氢酶活动度测定法》是一项国家标准,专门用于测定粮食和油料中过氧化氢酶的活性。该标准详细规定了从样品准备到最终结果计算的一系列步骤,以确保检测过程的准确性和可重复性。
首先,在样品制备方面,需要将待测样品研磨成细粉,并通过一定目数的筛子筛选,保证颗粒大小均匀,便于后续实验操作。对于不同的粮食或油料种类,可能还需要采取特定的预处理措施来提高酶活性测定的准确性。
接下来是提取液制备阶段,根据标准要求,使用适量的缓冲溶液与样品混合,经过充分搅拌后离心分离得到上清液作为过氧化氢酶的提取物。这里所使用的缓冲溶液类型及其pH值等参数均需严格按照标准给出的具体条件执行。
然后进入关键的酶活测定环节,采用分光光度计测量在特定波长下反应体系吸光度的变化情况。通过向含有底物(如过氧化氢)的溶液中加入一定量的酶提取液,并记录一段时间内吸光度随时间变化的数据,可以间接反映出过氧化氢酶催化分解过氧化氢的速度快慢,进而计算出其相对活性单位。
最后,依据实验数据及标准提供的公式进行计算,得出每克干物质中含有多少单位的过氧化氢酶活性。需要注意的是,在整个实验过程中都必须严格遵守实验室安全规范以及正确操作仪器设备,同时做好详细的实验记录,以便于后期分析比较不同批次之间的差异性。
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文档简介
中华人民共和国国家标准(633.,+料检验过氧化氢酶活动度测定法of of 仪班和用具恒温水浴锅,电炉;离心机或吸滤装置,锥形瓶:1000, 15液管:5, 10, 20定管、细口瓶、漏斗等。.,合目.:;2。氧化氢溶液;10%硫酸溶液,o. 30%液,液,用时,甲、乙液按9: 1混合。取试样(能换算成无水试样1g),放入研钵中,加少量细砂,量取缓冲液50倒出5m 后经漏斗倒入锥形瓶中,用剩余的缓冲液洗净研钵和漏斗,再把洗液倒入锥形瓶内,振摇后静置2吸滤法或离心沉淀法获得透明的提取液。匀提取液,吸取20m 入20氧化氢溶液,在室温下放置15入5酸溶液,摇匀,用。下用去的高锰酸钾溶液毫升数(取20于沸水浴中加热5用直接煮沸法破坏过氧化氢酶。加20。工水和3氧化氢溶液于锥形瓶中,在室温下放置15加入10%硫酸5匀,下用去的毫升数(国家标准局,985522氧化氢酶活动度(试样)=( ,1),V锰酸钾溶液当量浓度;17-H z O:的毫克当量。双试验结果允许差不超过平均值的10%,取平均值为测定结果。测定结果取小数点后第一位。附加说明:本标准由中华人民共和国商业部提出。本标准由商业部粮食储运局负责起
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