临床医学诊断学ppt课件止血与凝血障碍检查

止血与凝血障碍检查 Disorders of hemostasis and coagulation 四川大学华西医院 血液科 廖小梅 血管中流动的血液为什么不凝固血管中流动的血液为什么不凝固 破损的血管为什么能止血破损的血管为什么能止血 生理状态下生理状态下 机体内存在着复杂的凝血系统和抗凝系统 凝血凝血 血栓血栓 抗凝抗凝 出血出血 作为一个临床医生 如何正确选择实验室检查 项目 如何正确判断检验结果 首先应弄清正常的凝血与抗凝机制 正常止血机能 两个方面两个方面四个因素四个因素 凝血机制 抗凝机制 血管壁血管壁（vessel wall） 血小板血小板（plateletplatelet） 凝血系统（coagulation system） 抗凝及纤溶系统（anticoagulation and fibrinolytic） 凝血与抗凝机制的病理生理基础凝血与抗凝机制的病理生理基础 一、血管壁的止血与抗凝作用 （一）血管壁的止血 作用 1.血管壁的完整性 是防止出血的重要保证 血管内皮细胞之间及内皮下胶原 与Vit c有关 血小板参与血管壁的完整性和维持通透性 血管壁完整性破坏的出血机制 当Vit c 缺乏或 plt 减 少时，管壁抵抗力 下降内皮细胞间隙增大 脆性、通透性增加 RBC及血液成分外溢 出血 l 良好的弹力纤维-保持血管壁的柔韧性 l 健全的神经纤维-维持血管壁的舒缩性 l 带负电荷的胶原纤维-启动凝血过程 2. 血管内皮下层 3. 血管内皮细胞产生 lVon Willebrand Factor vWF (vW 因子) lFibronectin Fn (纤维结合蛋白) lTissue Factor TF (组织因子 FIII) lEndouthelin ET (内皮素) .神经反射 管腔收缩 血流变 慢 出血/ 停止 .内皮细胞分泌vWF、Fn 促进plt 粘附 .释放FIII 启动外源性凝血途径 .暴露内皮下胶原 当血管壁受损后 促进血小板粘附 启动内源性凝血途径 当血管壁受损后的一系列变化 .神经反射管腔收缩血流变慢 出血/停止 .内皮细胞分泌vWF、Fn促进plt粘附 .释放FIII启动外源性凝血途径 .暴露内皮下胶原 促进血小板粘附 启动内源性凝血途径 （二）正常血管壁抗血栓形成能力（二）正常血管壁抗血栓形成能力 血管内皮细胞合成 l前列环素(PGI2) 扩张血管、抑制plt功能 l纤溶酶原激活物(PA) 激活纤溶酶、清除小凝块 l血栓调节素(thrombomodulin TM) 参与蛋白C系统的抗凝作用 l肝素或类肝素物质 具有多种抗凝活性 创伤、炎症 中毒、缺氧 管壁抗凝作用 病理性血栓形成 血小板来自骨髓成熟的巨核细胞 （一）静态下血小板形态 蛋白质 glycoprotein GP 如：GPIa Ib IIb a 代谢产生花生四烯酸、血栓烷 A2 磷脂 (TXA2 )、血小板 活化因子等 提供催化表面（PF3） 二、血小板在止血机能中的作用 包膜 （一）静态下血小板形态 膜下：微管与微丝框架 变形 活 化 胞浆：血栓收缩蛋白 血凝块缩小、 加固 三种特殊颗粒： -颗粒、致密颗粒、溶酶体 1.粘附功能（adhesion function） 指血小板具有粘附于血管内皮下胶原及其 他 异物表面的能力 需要物质 lGPIb- lvWF lIII型胶原 l纤维结合蛋白（Fn） （二）血小板功能 指活化后的血小板与血小板之间相互连接 的特性 参加因素参加因素 l l GPIIb/IIIaGPIIb/IIIa l l 纤维蛋白原纤维蛋白原 l l 钙离子钙离子 l l 聚集诱导剂聚集诱导剂： ADPADP、肾上腺素、肾上腺素、TXATXA 2 2 、花生四烯酸、花生四烯酸 2.聚集功能（aggregation function） IIb IIb 粘附与聚集的结果 血小板大量聚集、 粘附于血管破损处 形成白色血栓 暂时止血 3释放功能 ：(release reaction) 指血小板在诱导剂的作用下，将胞浆内特 殊 颗粒中的内含物释放出血小板的反应 -颗粒 致密颗粒 溶酶体 与血小板粘附、聚集、炎症反应、创伤修 复 动脉粥样硬化等作用有关 4血块收缩功能 血凝块 血小板 血栓收缩蛋白 纤维蛋白网 收缩 血清被挤出 血块缩小加固 PF3提供凝血因子催化表面 5血小板促凝活性 血小板止血功能（小结） 维持血管壁的完整性，毛细血管的通透性 粘附、聚集在血管破损处，形成白色血栓 释放活性物质，促进血小板聚集，增强 血管收缩 促进凝血过程 血块收缩，形成稳固血栓 三、凝血因子与凝血过程 血液由流动状态变为凝胶状态称 血液 凝固。是由一系列凝血因子参加的、 复杂 的酶促反应和分子聚合过程 分为三个阶段，两个途径 （内源性、外源性） l第一阶段：凝血酶原激活物形成 l第二阶段：凝血酶形成 l第三阶段：纤维蛋白形成 l 目前公认的凝血因子共14个，按罗马字命名的 有12个，尚有高分子量激肽原(HMWK)，激肽释放 酶原(PK) l 大多数由肝脏产生，其中II、VII、IX、X合成 依赖于Vitk，称Vitk依赖因子 l 正常情况下，所有因子都处于无活性状态 IIaIIa Ca Ca2+ 2+ VIII- VIII- VIIIaVIIIa III III PltPlt- PF- PF3 3 Ca Ca2+ 2+ IIaIIa XaXa V VVaVa Ca Ca2+ 2+ 正常凝血过程（瀑布学说） PF3 磷脂 凝血酶原(II) 凝血酶(IIa) 纤维蛋白原(I) 可溶性纤维蛋白 稳固性纤维 蛋白 内源性途径 胶原等带负电荷表面 PKPKa a PKPK XIIXIIXIIaXIIa HMWK HMWK 外源性途径 组织损伤释放 组织因子（III） XI XI XIaXIa IIaIIa IX IX IXaIXa VIIaVIIa VII VII XIIIXIII XIIIaXIIIa 参加因子： 所需时间： X X XaXa （凝血旁路） VIII VIII、IXIX、XIXI、XII VXII V、X X、 II II、I IIII III、VIIVII CaCa2+ 2+、 、PFPF 3 3 、磷脂磷脂 38min 四 、正常抗凝及纤溶系统 （一）细胞抗凝机制 单核-巨噬细胞 吞 噬 清 除 凝血过程有关 物质和产物 （二）体液抗凝机制 血液中存在多种抗凝物质及抗凝系统 1抗凝血酶III（antithrombin III，AT- III） AT-III 灭活IIa、IXa、Xa、a 、 XIIa 、激肽释放酶 肝素 2. 组织因子途径抑制物 (tissue factor pathway inhibitor TFPI) TF a a aTFPITFPI 灭活a、TF、a TF a 3. 蛋白C系统 l蛋白C（Protein C, PC） l蛋白S（Protein S, PS) l血栓调节素（ thrombomodulin, TM） l活化蛋白C抑制物 (activated protein C inhibitor, APCI ) 血管内皮细胞 蛋白C蛋白Ca 凝血酶 血栓 调节素 APCI 灭活Va、a激活纤溶系统 血管内皮细胞 蛋白S 蛋白C系统抗凝机制 4其它 肝素辅因子-（HC-） l抗凝谱同AT- l活性仅AT-的1/3 l在肝素协同下作用可扩大1000倍 肝素（heparin） l生理状态下血液中含量甚微 l最重要的抗凝作用是增强AT-和 lHC-效应 （三）纤维蛋白溶解系 （fibrinolysis，纤溶系统） 主要作用：分解纤维蛋白（原），清 除血管 内由于纤维蛋白沉积引起的阻塞，保持血 流通畅 最重要的生理性抗凝系统 XIIa PK 纤溶酶原纤溶酶原纤溶酶纤溶酶 u-PA t-PA 纤维蛋白原 纤维蛋白单体 稳固纤维 蛋白 纤溶酶 纤溶酶 纤 溶酶 B1-42 B15-42 D二聚体、 多聚体 A、B、C、H A、B、C、H X、Y、D、E X、Y、D、E X、Y、D、E 被降解的纤维蛋白（原）产物统称为 FDP 凝血因子 纤溶系统纤溶系统 血小板血小板 抗凝系抗凝系 统统 血管内皮细胞 止凝血障碍性疾病的发病机制 血管壁结构与功能异常 血小板质与量异常 凝血因子质与量异常 抗凝及纤溶系统异常 循环中凝血及抗凝物质增加 综合因素 止凝血障碍的实验检查 一、毛细血管抵抗力试验 (capillary resistance Test, CRT) 又称毛细血管脆性试验或束臂试 验 毛细血管壁完整性 内皮结构与功能 血小板质与量 异常 脆 性 通透性 压力 易出血 原 理 方 法 血压计袖带 上臂加压8min 在前臂直径5cm 圆圈内计数出血点 (收缩压+舒张压)2 参考值 男性0-5个 女性0-10个 10个为异常 意 义 本实验观察血管壁、血小板的综合止血作 用 1.异常提示：毛细血管脆性、通透性 2. 常见于： 血管壁结构与功能异常 血小板质与量异常 二、出血时间（bleeding time,BT） 原 理 测定毛细血管被刺破后至自然止 血所需 时间主要反映血管壁和血小板相互作 用 方 法 用标准弹簧针或刀片刺破皮肤2- 3mm 深，观察出血自然停止的时间 参考值 Duke法 1-3 min 4min为 延长 Ivy 法 2-6min 7min为 延长 BT测定器法 6.92.1min 9min为 延长 意 义 1. BT长短主要受血小板因素和 血管壁 因素的影响 意 义 2. BT延长 血小板明显 400109/L为增 加 意 义 1血小板减少 生成障碍：再障、白血病、骨纤、放 射病 破坏过多：ITP、SLE、脾亢 消耗过多：DIC、TTP 2血小板增多 一过性增多： 急性大出血、溶血或脾切除 术后 持续性增多： 骨髓增生性疾病：慢粒、真 红、 原发性血小板增多症 意 义 血凝块 血小板 血栓收缩蛋白 纤维蛋白网 收缩 血清被挤出 血块缩小加固 原理 四、血块退缩试验 （clot retraction test, CRT） 方法 全血标本注入试管中，静置 ，观察 析出的血清占原有全血量的 百分 比 表示血块退缩的程度 参考值 30min-1h 开始退缩 18h-24h 完全退缩 退缩完全： 析出的血清 全血量 40-50% 意义 1主要用于血小板功能测定的初筛试验 2退缩不良见于： a) 血小板功能异常或量（尤其 正常对照10s以上者 延长 4g/L为异常 意 义 减少： 1先天性纤维蛋白原缺乏症 2DIC（消耗过多） 3严重肝病 增高： 1高凝状态：血栓性疾病，急性 炎症 手术创伤、恶性肿 瘤等 2生理性：部分正常老人，妊娠 晚期 十、血浆鱼精蛋白副凝试验 原 理 纤溶过程中FDP 鱼精蛋 白 十 游离 纤维蛋白单体 凝集 参考值 正常人阴性 （plasma protamine paracoagulation test PPPT, 3P试验） 意 义 阳性： 1提示血中FDP增多，见于DIC/纤 溶亢进 2溶栓治疗后 3假阳性：大出血（创伤、手术、 咯 血、呕血），恶性肿瘤、人工流 产等 阴性： 1正常人 2原发性纤溶 3DIC晚期 初筛试验 筛选试验 确诊试验 实验项目的选择 N N N N N N N N 凝血因子异常可能凝血因子异常可能 + + 延长延长 N N 不良不良 血小板功能异血小板功能异 常、常、vWDvWD + N/+ N/ N N N N 血管因素血管因素 + + 延长延长 不良不良 血小板量减少血小板量减少 束臂 Plt 血块收缩 结 果 试验 BT 计数 试验 判断 APTT、PT、TT、纤维蛋白原定量检测 进一步做以下筛选试验： APTT、PT、TT、纤维蛋白原定量 1.仅有APTT延长 提示内源性途径因子异常：尤 其是 、IX、XI 不能用正常血浆纠正：提示抗 、 抗IX抗体存在 2.仅有PT延长 提示外源性因子异常(FII、V、VII、X） Vitk缺乏（II、VII、IX、X为Vitk依赖因 子） 严重肝病 延长不被正常血浆纠正：循环中抗凝物质 增多 APTT、PT、TT、纤维蛋白原定量 3.全部异常 纤维蛋白原缺乏症 FDP增多 血中抗凝物质增多 肝功能衰竭 进一步做有关因子的测定(确诊试验 ) APTT、PT、TT、纤维蛋白原定量 思 考 题 I. 试简述凝血过程？ II. 简述出血的临床诊断步骤？ 参 考 书 目 n 欧阳钦主编.临床诊断学（年制规划 教材）人民卫生出版