诊断结核感染临床应用进展课件

T-SPOT.TB诊断结核 感染 临床应用进展 河南省胸科医院 刘欣欣 结核的现状 结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO 统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约 200万人死于结核。 我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核 感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2 倍以上。 结核的传统诊断手段 结核菌素皮试： 低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。 低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易 造成“假阳性”结果。 细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周； 阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。 病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创 伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结 核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T 细胞 当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释 放r干扰素 r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中 最重要的细胞因子 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 T-SPOT.TB技术： 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（ PBMC）中存在结核特异性T细胞，这些淋巴 细胞在受到结核特异 抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑 点试验。 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素 的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过 ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计 算出抗原特异性细胞的频率。 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 包 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑 点数大于20时视为试验有效 T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形 成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs T-SPOT.TB的临床意义 T-SPOT.TB高灵敏度 T-SPOT.TB的临床意义 种类内容摘要受试者数 量 文献发表 活动性结核/ 灵敏度 将T-SPOT.TB的检测结果与最后通过涂片和培养确诊 的结果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆 菌感染的患者。T-SPOT.TB的灵敏度为97.2%。（CI 90.3-99.7%） 72 Meier et al Eur J Microbiol Infect Dis (2005)；24: 529-536 在经培养确诊的活动性结核受试者中，T-SPOT.TB的 灵敏度为96.6%。其中29例免疫力低下患者，T- SPOT.TB的灵敏度为100% 87 Lee et al. ERJ 2006; 28:2430 在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有 临床症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度 为90.3%，并且不受CD4细胞数量影响。 30 Clark et al. Clin. Exp. Imm. 2007; 150(2):238-44 在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者 中，T-SPOT.TB的灵敏度为92%。 140 Kang et al Chest. 2007 Sep;132(3):959- 65 在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，T- SPOT.TB的阳性率94%。 32 Kim et al. Arch Intern Med. 2007; 167;20:2255- 2259 在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，T- SPOT.TB的灵敏度分别为94%和95%。所有受试者中 ，42%为肺外结核患者。 186 Kim et al. Am J Med 2009；122, 189-195 经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用T- SPOT.TB检测，阳性率98%（57/58）。 58 Janssens et al ERJ 2007；30(4):722-8 在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵 敏度为94%。 32 Dominguez et al Clin Vacc Immunol 2008; 15;168 -71 在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵 敏度为94.1%。 270 Chee et al J Clin Microbiol. 2008; 46(6):1935-40 T-SPOT.TB的临床意义 T-SPOT.TB高特异性 ESAT-6CFP 10均来自结核分枝杆菌基因组 RD1区域 仅结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型 ）存在 RD1区基因 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 T-SPOT.TB不会受卡介苗接种影响 T-SPOT.TB的临床意义 种类内容摘要受试者数 量 文献发表 特异性用T-SPOT.TB检测14例鸟分枝杆菌感染者，13例阴性 ，1例为临界值，复查也为阴性。 14Adams et al Sc. J Inf. Dis 2008;40(3):196-203. 经过结核筛查的无症状的受试者，T-SPOT.TB检测结 果全部为阴性，特异性100%。 47Clark et al. Clin. Exp. Imm. 2007; 150(2):238-44 在德国用T-SPOT.TB对健康的卫生保健工作者进行筛 查。仅1例阳性（1/95） ，为影像学工作者，接触病 人超过35年。 TST检测假阳性结果34% （32/95）。 95Barsegian et al. J of Hospital Inf 2008；69(1):69-76 在接触结核的健康医务工作者和健康对照受试者中用 TST和T-SPOT.TB检测。155健康医务工作者中，TST 阳性的27例，而T-SPOT.TB仅3例阳性。健康对照组T -SPOT.TB全部阴性而TST有3例阳性。 218 Storla et al. BMC Infectious Diseases 2009,9:60 基于T淋巴细胞检测结核感染 的原理 T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏 感性