药物相关分子检查与恶性肿瘤个体化疗刘宝瑞课件

Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 药物相关分子检查药物相关分子检查 与与 恶性肿瘤恶性肿瘤 “ “ 个体化疗个体化疗 ” ” 刘宝瑞 MD Ph.D Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University |医疗方面 1. 南京市临床重点学科 2. 中德肿瘤治疗中心 3. 肿瘤多学科会诊中心 4. 开展标准化治疗与基因指导下个体化治疗 5. 开展“热化疗”“聚焦超声治疗”“微波消融”治疗 6. 南京医学会肿瘤专业 主任委员单位 欢迎来鼓楼医院进修临床肿瘤专业 |科研教学 主编恶性肿瘤精确诊断与治疗技术2006出版 主编现代肿瘤化疗手册2000出版 三大研究方向-肿瘤靶向治疗新技术 -基因指导下肿瘤个体化化疗新技术 -抗肿瘤中药的筛选与机理研究 南京大学 南京医科大学 博士生培养单位 南京中医药大学 欢迎来鼓楼医院攻读博士、硕士学位 南京鼓楼医院肿瘤中心简介 南 京 大 学 临床肿瘤学 研 究 所 南京医学会 肿瘤专业 委员会 南 京 临床重点 学科 南京大学 博士生 培养单位 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University |消化系肿瘤： 基因指导下“个体化治疗”临床应用高级研讨会 |肺癌： 基因指导下“个体化治疗”临床应用高级研讨会 规模：30人 时间：2006年12月 地点：南京大学附属鼓楼医院 网址： 国家级继续教育学习班通知 南 京 大 学 临床肿瘤学 研 究 所 南京医学会 肿瘤专业 委员会 南 京 临床重点 学科 南京大学 博士生 培养单位 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University |第一：什么是“药物相关基因指导下个体化 疗” |第二：化疗药物与相关基因简介 |第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 |第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 |第五： 南京大学临床肿瘤研究所的工作简介 目录 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第一：什么是“药物相关基因指导下个体化 疗” 当今肿瘤的化疗：以解剖部位为标准选择化疗方案 胃癌：FOLFOX/ILF/TFP RR: 35%-45% 大肠癌:FOLFOX/ILF/IROX RR: 35%-46% 肿瘤“异质性”： 化疗有效率和毒副作用在个体差异很大！ Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第一：什么是“药物相关基因指导下个体化 疗” Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 2004 年ASCO预测 ： 未来5-10年将是由当今标准化疗向个体化疗的过渡期 ！ 2005 年ASCO预测 ： 药物基因指导下“个体化疗”是肿瘤化疗的一场革命！ 2006 年ASCO预测 ： 肿瘤的化疗已经迈入“个体化疗”的新时代！ 个体化疗： 在体水平动物模型 细胞水平药物敏感实验 基因水平DNA水平 RNA水平 第一：什么是“药物相关基因指导下个体化 疗” Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 基因指导下 个体化疗 药物遗传学 （pharmacogenetics) 药物基因组学 （pharmacognomics） 药物遗传学：研究与药物反应性/毒性相关的个体间DNA序列/基因 多态性的差异。 药物基因组学：将全基因组技术（即基因表达数据）用于预测一 个患病个体对一个/一组药物的敏感性或抵抗性。 第一：什么是“药物相关基因指导下个体化 疗” Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第二：化疗药物与相关基因 常用药物： 氟脲密啶 5-FU 铂类 DDP、Oxa 紫杉类 Txl、Dxl 喜树碱 CPT11 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第二：化疗药物与相关基因 氟脲密啶 5-FU DPD: 二氢嘧啶脱氢酶 TS: 胸腺嘧啶核苷酸合成酶 OPRT:乳清酸磷酸核糖基转移酶 TP:胸(腺嘧啶脱氧核)苷磷酸化酶 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 减少药物积聚； 通过共扼结合去除药物毒性； 提高对铂类药物诱导产生的DNA加合物的耐受性； 提高DNA修复能力（DNA repair capacity）。 铂类药物的抵抗机制 第二：化疗药物与相关基因 铂类 DDP、Oxa Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University |碱基切除修复（base excision repair, BER） |DNA双链断裂修复 （DNA double strand break repair, DDSBR） |错配修复（mismatch repair, MMR） |核苷酸切除修复（nucleotide excision repair, NER） DNA修复途径(DNA repair pathway): 铂类 DDP、Oxa 第二：化疗药物与相关基因 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University XRCC1 第二：化疗药物与相关基因 铂类 DDP、Oxa 碱基切除修复（base excision repair, BER） Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 核苷酸切除修复（nucleotide excision repair, NER） ERCC1XPG 第二：化疗药物与相关基因 铂类 DDP、Oxa Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University ERCC1(excision repair cross - Complementing 1) |ERCC1 mRNA水平与铂类的敏感性密切相关，可以当成铂类化疗效果的独立预测 指标。 BRCA1(breast cancer 1) |参与DNA修复，与铂类药物及作用于微管蛋白药物敏感性密切相关 XRCC1 ( X-ray repair cross-complementing group 1) |XRCC1基因第399位密码子由CGG CAG的变异可以导致编码的氨基酸由Arg Gln。变异型的DNA修复能力提高，对铂类敏感性下降。 XPD (xeroderma pigmentosum pomplementary group D) |XPD基因第751位密码子由AAG CAG的变异导致氨基酸由Lys Gln。变异型的 表型导致DNA修复能力的提高，铂类敏感性下降。 GSTP1 (Glutathione-S-transferase P1 ) |GSTP1基因密码子105位缬氨酸(Val) 转变为异亮氨基酸(Ile) ，这一氨基酸的替换 导致酶活性升高,铂类敏感性下降。 铂类药物疗效相关基因(总结） 第二：化疗药物与相关基因 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 肺癌回顾性 前瞻性 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 1.欧美实验研究铂类疗效与ERCC1mRNA 的表达水平相关 铂类疗效与ERCC1、XPD、XRCC1SNP相关 2.欧美临床研究回顾性（ Massachusetts General Hospital） ( Dana-Farber/Harvard Cancer Center） (多基因的SNP意义大 JCO 2004 ；22:2594） NSCL含铂方案化疗（103例） Stage XPD751+XRCC1 No. MST(months) P all 0 variant 26 20.4 1 variant allele 40 16.6 2 variant alleles 24 11.0 0.009 3 variant allele 13 6.8 III 0 variant 16 35.0 1 variant allele 22 25.9 2 variant alleles 11 15.2 0.004 3 variant allele 7 6.0 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *.亚洲临床研究回顾性（韩国，109例 Lung Cancer 2004;44:311） ERCC1 Asn118Asn（C-T) C/C genetype 平均生存486天 C/T T/T *.亚洲临床研究回顾性（中国，151例 中华医学杂志2005;85:972） XPD751 与化疗近期疗效? 回顾性（中国，105例 癌症 2004;23:865） XRCC1 399 Arg/Arg基因型化疗有效率41.5% Arg/Gln、Gln/Gln 有效率21.2% XPD lys751gln 多态频率:北京文献 lys/lys 84.9% 江苏文献lys/lys 46.8% genetype 平均生存281天 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University XPD Asp312Asn (P=0.003) XRCC1 Arg399Gln (P=0.07) Both polymorphisms (P=0.009) 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 最新：SNP genotyping of ERCC1 118C/T and C8092A R.Rosell, ASCO, 2006 706 cis/doc-treated stage IV NSCLC patients MS according to 118 C/T SNP: T/T, 8.9 m; C/T, 9.5 m; C/C, 10 m (P = 0.51). C8092A SNP: C/C, 9.3 m; C/A, 10.2 m; A/A, 7.2 m (P = 0.05). Stratified by PS : PS 0: C/C, 15.9 m; C/A, 13.8 m; A/A, 8.7 m (P = 0.04). The uncommon A/A genotype predicts poor survival in patients of NSCLC treated with dis/doc. 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *美国临床研究回顾性 ERCC1 mRNA表达与NSCLC化疗（CDDPGEM） 疗效相关 (J Clin Oncol 2002;22:2594 ) 56例NSCLC（多中心）IIIb期（16例）、IV期（40例） 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *欧洲临床研究 前瞻性（Spanish Lung Cancer Group） （2005 ASCO） 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 生存时间： A组及B1组根据ERCC1mRNA水平分为四组： 表达最低组的49pts中位生存期为14 mo 表达最高组的8pts中位生存期为8 mo p=0.03 有效率： *欧洲临床研究 前瞻性（Spanish Lung Cancer Group） （2005 ASCO） 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University BRCA1 mRNA 表达与化疗抵抗： NSCLC （CDDPGEM） P=0.01 MS: 37.8 m MS: 12.7 m MS: N.R Human Molecular Genetics, 2004 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University Stage IV NSCLC（tissue） Adeno, BAC, LCCOthers EGFRBRCA1 mRNA MutatedWild type Blood sample TKI Erlotinib Low Intermediate High Gem/cis Doc or Nvb/cis Doc or Nvb 25%25% 50% 20% 最新：肺癌个体化治疗建议方案（2006 ASCO） 第三： 肺癌的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 |胃癌/大肠癌：回顾性 前瞻性 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 2004年通过对20项研究涉及3497病例ACRC进行Meta分析结果显 示：肿瘤组织（原发灶或转移灶）TS水平高者，生存时间短。 J Clin Oncol. 2004, 22(3）：529-536 65例胃癌患者接受FP方案化疗，胃镜活检新鲜胃癌标本，采用real-time RT-PCR检测TS mRNA水平（以-actin为内在质控）： TS mRNA水平低者（4.6） ：中位生存期6个月。 J Clin Oncol 1996;14(1):176-182 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性(ERCC1 mRNA） （Univ. of Southern California）-JCO 2001;19:4298 大肠癌含草酸铂方案二线化疗（CPT11 失败） ERCC1 mRNA 例数 平均生存（m） low 40/50 10.2 high 10/50 1.9 （Univ. of Southern California）-JCO 2001;16:309 胃癌在有效率、生存时间 上均有统计学意义 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性 日本59例服用S-1的IV期胃癌患者 检测：5FU代谢途径的多个基因mRNA表达： TS, DPD, OPRT, TP, UP 结果：OPRT和TS的简单组合对有效率的预测达91.5% Ts 低表达OPRT高表达5-FU有效率高 生存时间长 Int J Cancer 2006 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性（XPD751 snp） （Univ. of Southern California Medical Center ) -Cancer Res 2001;61:8654 大肠癌含草酸铂方案化疗XPD751（73例） 基因型 例数 平均生存（m） CR+PR SD PD lys/lys 22 17.4 24% 62% 14% lys/gln 39 12.8 10% 82% 8% gln/gln 10 3.3 10% 40% 50% 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性（ERCC1 118 SNP） -Clin Cancer Res 2005 进展期大肠癌 （91例）Oxa/5-FU 基因型 例数 Response rate T/T 30 61.9% C/T 41 42.3% C/C 20 21.4% 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性(GSTP1 snp） （Univ. of Southern California）- . J Natl Cancer Inst. 2002; 94(12): 936-42 107例接受5-FU+草酸铂化疗的转移性肠癌患者 GSTP1基因 Val105Ile的SNP可导致酶活性升高,与患者总体生存率有关： GSTP1 Val105Ile mean survival Val/val 24.9m Val/Ile 13.3m Ile/ile 7.9m 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性(GSTP1 snp） （Univ. of Hamberg）- Br.J Cancer. 2005; Nov29 Advanced Gastric Cancer(52cases) GSTP1 Genotyping response mean survival Val/Val 67% 15m Val/Ile Ile/ile 21% 6m 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University *国外临床研究回顾性（双中心联合基因检查） （Univ. of Hamburg + Univ. of Southern California）-Br J Cancer 2004;91:344 大肠癌含草酸铂方案化疗（106例） No risk of dying risk of progression ERCC1-118 C/C 30 1 1 C/T 45 2.29 1.24 T/T 31 1.86 1.36 XPD751 lys/lys 40 1 1 lys/gln 53 1.87 1.13 gln/gln 13 2.24 1.25 GSTp1 105 val/val 10 1 1 ile/val 47 1.82 1.22 ile/ile 49 2.96 2.13 XRCC1-399 arg/arg 44 1 1 gln/arg 51 1.07 0.95 gln/gln 10 1.58 0.99 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 国外临床研究回顾性（双中心联合基因检查） （Univ. of Hamburg + Univ. of Southern California）-Br J Cancer 2004;91:344 大肠癌含草酸铂方案化疗（103例） No.of favourable polymorphisms No rrelative risk median survival(m) =2 30 1 17.4 1 48 2.14 10.2 0 25 3.75 5.4 ERCC1-118 : C/C XPD751 : lys/lys GSTp1105: val/val TS-3UTR : +6BP/+6BP 第四： 消化系肿瘤的“药物相关基因指导下个体化 疗”临床研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 第五： 南京大学临床肿瘤研究所的工作简介 对象： 胃癌 大肠癌 肺癌 回顾性研究 前瞻性研究 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 胃癌回顾性研究 石蜡组织RNA提取realtimePCRERCC1mRNA level 胃癌ERCC1mRNA 参考值确定为0.2。 以该参考值为标准，高表达者铂类化疗后平均生存时间为5.8个月；低表 达 者铂类化疗后平均生存时间为13.3个月，统计学差异显著。 该结果提示：胃癌“个体化疗”在鼓楼医院已经逐渐走向成熟可以通 过检 查胃癌组织ERCC1mRNA水平，指导临床选择化疗药物。 第五： 南京大学临床肿瘤研究所的工作简介 ERCC1 expressionNo. of patientsMedia Survival Time(months)* Low, 0.21913.3 High, 0.295.8 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University 南京大学 鼓楼医院 肿瘤中心 Clinical Cancer Institute of Nanjing UniversityClinical Cancer Institute of Nanjing University |大肠