细胞筛选和成像分析课件

高表达细胞株筛选及检测平台 Gene Co., LTD. (SH Office) Product Specialist, Jacky Chan(陈勇) (021) 64951899 x 229 产品构成 2 名称分泌细胞筛选系统细胞生长分析系统微流体芯片系统 型号ClonePix FLCloneSelect ImagerLC-GX 用途筛选出特异分泌细胞，例如 高表达CHO/杂交瘤细胞，小 鼠干细胞等 分析细胞汇合度，进行细胞 计数和绘制生长曲线，检测 成长情况和质量 具备DNA、RNA及蛋白电泳分 析功能 ClonePix FL 分泌细胞筛选系统 Genetix 公司简介 英国上市公司（股票代码：GTX） 成立于1991年，总部位于英国New Milton 公司网站： 第一家也是全球最好的生产全自动细胞株筛选仪器厂家。 *4 ClonePix FL 演示视频 *5 单次工作流程 *Tom Bacon, +86 137611868706 细胞接入半固态培养基基于高质量的挑选 5 - 14 天 细胞生长挑取成像和分析 白光荧光挑选选 工作原理-分泌IgG的单克隆筛选 *Tom Bacon, +86 137611868707 标记荧标记荧 光的检测检测抗体 Clone Detect 配套试剂试剂 细细胞分泌的抗体 分泌细细胞 仪器原理-成像效果图 *Tom Bacon, +86 137611868708 A：白光成像的克隆； B：用荧光标记探针检测克隆抗体（红色）； C：用荧光染料检测细胞株高活性； D：将高效表达且高活性的克隆用蓝色圆圈指示出来。 *Tom Bacon, +86 137611868709 散点图散点图 ( (荧光强度荧光强度 VSVS 克隆容积克隆容积) )筛选结果 概述 ClonePix FL 是通过荧光成像识别特异细胞，并依靠高精度 挑取系统将选定细胞株从培养基中挑选出来的筛选系统。 挑选出来的细胞具有更高的准确性。并显著缩短了研发时 间并大幅降低了研发成本。 *Tom Bacon, +86 1376118687010 方法学比较传统方法Clonepix FL 筛选标准复杂ELISA实验检测荧光标记特异性抗体检测 工作模式有限稀释，细胞分选, ELISA机器全自动化操作 单位时间效率人工筛选效率低大于等于200个克隆/小时 筛选效率1000 细胞/8周10000细胞/3周内仅5小时 效果1 good clone5 superior clones 整体工作流程 *Tom Bacon, +86 1376118687011 仪器原理-内部平台结构 *Tom Bacon, +86 1376118687012 数据追踪功能（Data Tracking） 记录克隆挑取前后的图像以及所有参数信息文件。 文件可保存为表格兼容格式或LIMS（XML）格式。 该系统还标配自动条码阅读器，可阅读符合 21CFRPart11要求的编码 仪器原理-白光和荧光双成像系统 *Tom Bacon, +86 1376118687013 LED荧光光源（非激光器，5个滤光片, 软件控制） 标配: X4991,滤光片,FITC/EGFP (470/535nm) 选配: X4990,滤光片,CFP(440/505nm) X4992,滤光片,YFP(500/550nm) X4993,滤光片,PE-R,Rhodamine,DS Red(530/590nm) (试剂 Clone Detect 549系列) X4994,滤光片,Cy5(623/700nm) (试剂Clone Detect 649系列) 白光光源（2种） 透照成像： 用于对低对比度的克隆成像，例如贴壁的单层克隆或者悬浮液中的小克隆 表面成像： 用于挑取细胞时或者仪器校准时 16-bit高分辨率冷CCD成像 图像最大分辨率 1.5m 荧光和白光图像数据比较后挑取 环境控制和清洗装置 洁净度可达到100级 HEPA空气过滤 穿过平台的层流空气 可应用于整个工作区的紫外灭菌装置 独立的克隆挑取针清洗和灭菌平台 *Tom Bacon, +86 1376118687014 *Tom Bacon, +86 1376118687015 Clonepix FL 10 培养板: 花费 10/ $20 试剂总花费: 280/ $500 时间: 5 man hours 传统方法 1,000 平板: 1000/$2000 试剂: 2000（仅用于ELISA ） 时间: 不确定 培养箱耗费 培养板使用后的处理耗费 试剂成本-筛选1万个克隆 *Tom Bacon, +86 1376118687016 “We have implemented the use of ClonePix FL to increase our fusion productivity by approximately 50%, while decreasing our time from fusion to stable clone by 50%” Dr Robin Barbour, Associate Director Elan Pharmaceuticals 抗体研发中的应用 用户评价 细胞株筛选 “ClonePix FL has great advantages in selecting high producer cell lines and shortening timelines for early stage cell line development” Dr. Jianguo Yang, Group Leader in Cell Line Development, MedImmune Case study: Development of ClonePix FL methods for NS/0 and CHO to select high producer cell lines Results courtesy of Dr. Yang, MedImmune 已有客户 *Tom Bacon, +86 1376118687017 部分国内大学研究所客户： GSK,、诺华、药明康德、康弘药业、北京诺和诺 德医药研究中心 已装机数量(数据截止2009年12月) Clonepix FL, 全球装机100多套 CSI与ClonePix FL联合使用 *Tom Bacon, +86 1376118687018 ClonePix FL 定时观察并记录结果 监控筛出细胞的活性和生长效率筛选出特异性细胞 CSI CloneSelect Image (CSI) 细胞生长分析系统 概述 检测培养板中细胞的成长情况和生长质量非常重要。用传 统方法进行检测，极其耗时耗力，CSI可以客观稳定地测定 细胞生长和汇合情况，并对微孔板中静态培养的细胞进行 迅速详尽的分析。 *Tom Bacon, +86 1376118687020 使用白光检测细胞汇合度和进行细胞计数 几分钟即可提供结果，大幅缩短非细胞培养步骤所需时间 绘制细胞生长曲线图 配备条码阅读器，便于数据追踪 全自动运行，无需人工值守 CSI与传统方法的比较 *Tom Bacon, +86 1376118687021 1 x 96 well plate 1 x 96 well plate 节省时间, 增加精度. 提高效率 每天可重复多次观察 min1 2 3 4 5min1 22.5 结果不稳定 无法准确定量检测每一孔 定量依次检测各孔 稳定的结果 人工主观观察CSI 自动检测 每孔细胞生长过程监测 *Tom Bacon, +86 1376118687022 0天2天4天6天 62%, Day 92%, Day 118%, Day 4 细胞数目预估 *Tom Bacon, +86 1376118687023 细胞汇合度 细胞数目 软件成像 生长曲线分析 *Tom Bacon, +86 1376118687024 显示每个细胞的生长曲线 通过单孔观测判断是否单克隆细胞 *Tom Bacon, +86 1376118687025 Day 14Day 3Day 7Day 1 Day 14Day 7Day 1Day 3Day 9 产品构成 26 名称分泌细胞筛选系统细胞生长分析系统微流体芯片系统 型号ClonePix FLCloneSelect ImagerLC-GX 用途筛选出特异分泌细胞，例如 高表达CHO/杂交瘤细胞，小 鼠干细胞等 分析细胞汇合度，进行细胞 计数和绘制生长曲线，检测 成长情况和质量 具备DNA、RNA及蛋白电泳分 析功能 LCGX II 核酸蛋白分析系统(Caliper) *Tom Bacon, +86 1376118687028 LCGX II：具备DNA、RNA及蛋白电泳分析功能 蛋白检测 样品大小范围：14-600kDa 分辨率：10 定量线性范围：5.03000ng/l 最大总蛋白浓度: 5mg/ml PicoAssay试剂盒灵敏度10pg/l 快速：可达28s/样品(全过程) Protein SolubilityProtein Solubility Protein ExpressionProtein Expression Protein ExpressionProtein Expression Protein ExpressionProtein Expression Protein PurificationProtein Purification LCGX II 单克隆抗体质控 *Tom Bacon, +86 1376118687034 10 July, 200935Jacky Chan +86LCGX II 特点 高质量的数字化实验结果：准确性、重现性、灵敏度、分辨率、定量线性范围 均优于传统一维电泳 操作简便，自动化程度高：灌胶、上样、染色、脱色、成像、分析全部自动化 完成，并实时给出实验结果 通量高而灵活：每次可分析1-384个样本 低消耗：低至纳升级的样品消耗，且一张芯片可重复使用数百上千次 软件功能强大： -提供峰图、胶图及数据表格 -可对不同批次乃至不同实验室间的数据进行平行比对 -具备过滤功能，用于快速筛选或比对具备特定条带特征的样品 -RNA样品更可提供综合质量评分及多项具体评估参数 符合FDA 21CFR Part11，可提供4Q认证，符合GLP、GCP、GMP要求 *Tom Bacon, +86 1376118687036 产品构成 名称分泌细胞筛选系统细胞生长分