利用转基因动物模型能更清楚

乳腺癌基因 (一)c-erbB-2基因 许多有关c-erbB-2基因的研究基本上已 经取得了大致相似的结果。即该基因 在乳腺癌研究中常有异常扩增，伴基 因表达升高，一般在浸润性癌中，特 别在早期癌，如导管内癌中约70可 有c-erbB-2表达水平升高，当发展到浸 润癌时，其扩增水平则明显下降，到 1520，因此被解释为乳腺癌发 展中的早期事件，特别是可为诊断早 期癌提供重要参考依据。 (一)c-erbB-2基因 天津肿瘤医院（1996）对316例乳腺 不同类型病变中c-erbB-2癌基因检测结 果，正常上皮无表达，轻度增生阳性 率仅为4，重度增生为43.9%，非浸 润癌为66.77%，浸润癌则降到45.1 ，（P0.01）。 （二）c-myc基因 c-myc基因扩增也常见于乳腺癌细胞系中， 其扩增率为632，常伴c-myc mRNA 转录水平增高，扩增倍数为210倍，在c- erbB-2扩增的乳腺癌中，也常见c-myc的共 扩增。利用转基因动物模型能更清楚地见到 c-myc癌基因加速肿瘤形成的作用。因而认 为c-myc扩增可以作为早期乳腺癌独立的预 后指标。此外，c-myc还参与细胞凋亡过程 ，细胞凋亡的程度与c-myc活性及表达水平 有关。一旦细胞增殖出现障碍，c-myc基因 将会启动凋亡程序。这些作用也为今后开展 基因治疗提供有力条件。 （三）p53基因 近年研究认为肿瘤发生有可能是肿瘤抑制基 因失活的结果。p53为目前最受瞩目的抑癌 基因，已经了解到p53基因的高度保守区有 四个突变热点，主要集中在48外显子之间 ，在乳腺癌中p53突变率可达到46，可使 细胞增殖停滞在G1期。近年发现p53还具有 监控细胞基因活动的作用，一旦细胞内出现 异常，它将启动程序性细胞死亡机制，中止 细胞生长过程，使之修复损伤的DNA。 （三）p53基因 近年还发现p53先天变异的家族中，可导致 发生Li-Franmeni综合症。其特点为30岁以 前发生恶性肿瘤。人类肿瘤一般有较高的 p53突变率，表明它是肿瘤发生过程中起关 键性作用的分子之一。p53基因可分为野生 型和突变型，研究表明，野生型并不为转化 蛋白质编码，其产物分布在核内；与肿瘤抗 原或癌基因协同作用的是已发生突变的p53 蛋白质，突变型p53蛋白质可抑制野生型 p53活性，使之失活。 （三）p53基因 野生型p53基因对一些恶性肿瘤具有 p53广谱抑制作用，而突变型p53有成 瘤作用。结合临床研究，表明p53基因 蛋白的表达因乳腺组织情况而异，正 常乳腺组织无表达，乳腺增生与乳腺 癌变之间，其表达水平有明显差异， 对于早期诊断及判断预后有参考价值 。由于p53基因调节肿瘤细胞生长及血 管生长功能，现被选作基因治疗的靶 基因。 （四）nm23基因 nm23基因是从K1735属黑色素瘤细 胞系的cDNA库中被分离出来的，为近 年被确认的肿瘤转移抑制基因，已经 见到许多研究报道。人类基因中存在 两个nm23基因，即nm23-H1及nm23- H2。现已了解，两者为不完全相同的 基因，各有独立的调控系统，各在肿 瘤转移中起不同作用。其中以nm23- H1与转移关系更为密切 （四）nm23基因 天津肿瘤医院（1997）对169例乳腺癌进行 了nm23基因表达检测，结果，nm23基因表 达与远处转移呈明显负相关。nm23 基因高 表达率在远处转移组（37.8%）与无远处转 移组（75.0）间的差异非常显著（ P0.005）;与腋窝淋巴结转移也呈负相关。 无论腋窝淋巴结阳性或阴性组中，均有部分 患者发生或未发生远处转移，nm23基因高 表达率在发生远处转移与无远处转移的患者 之间均有显著差异。 （四）nm23基因 利用此种差异，可将腋窝淋巴结阴性 组中具有潜在高转移和腋窝淋巴结阳 性组中可能不发生转移的患者筛选出 来，分别予以不同处理，以提高治 疗效果。也有人用核酸分子杂交技术 检测nm23-H1等位基因缺失与腋下淋 巴结转移关系密切。有转移病例nm23- H1等位具有缺失的百分率为33.3%,而 无转移组为7.7%（P0.05）. （五）表皮生长因子（EGF） 近年研究表明，乳腺癌细胞生长受 EGF和转化生长因子（TGF-）的调 控。实际上，雌激素对乳腺癌细胞系 生长在一定程度上是通过提高TGF- 的合成或分泌来实现。对激素不依赖 性乳腺癌的生长，则主要由于TGF- 的组成性的激活，因而必须雌激素促 其生长。因此，目前有人设计阻断 TGF-活性的药物，以增强激素治疗 的疗效。 （五）表皮生长因子（EGF） TGF-是抑制乳腺上皮细胞生长的因 子，TGF-乳腺癌细胞也分泌此因子 ，它是与TGF-相互拮抗的生长调节 因子TGF-。正常乳腺上皮细胞与肿 瘤细胞都有这些因子受体，ECG受体 超表达主要是转录水平的升高，极少 是基因扩增的结果。雌激素受体的作 用与EGF受体表达升高之间呈负相关 。倘EGF受体表达水平高，则预计期 激素治疗效果不佳 （六）BRCA1和BRCA2 近年通过位点克隆及基因鉴别方法已经证实 ，5085的遗传型乳腺癌和卵巢癌与这 两个基因突变有关。在散发的乳腺癌中已经 发现基因或基因产物（HER-2/neu与 cycinD1）的过度表达。但是，发展成散发 乳腺癌症所必需的基因突变的类型及数量尚 未明确，BRCA1为一抑癌基因，增加这两 个基因突变表达，有可能抑制遗传型与散发 性乳腺癌的生长，目前正在研究BRCA1的 等位基因丢失在乳腺癌中存在，而且发生时 间相当早。因此，对BRCA1的检测在乳腺 癌的早期诊断中颇有参考意义。 （七）细胞凋亡 近年研究表明，细胞凋亡与肿瘤生长关系甚 为密切，肿瘤不仅是细胞增殖和分化异常的 疾病，也是细胞凋亡异常的疾病。研究表明 ，许多肿瘤的发生不仅由于细胞增殖率过高 ，而且与细胞死亡速率也有关。肿瘤的发生 也可能由于细胞应该死亡而未死亡所产生的 后果。目前认为影响凋亡的因素颇多，仅举 研究中较多引用的一些基因，如诱导凋亡基 因如bax以及抑制凋亡基因bel-2（B-cell /Leukemia-2）。 （七）细胞凋亡 肿瘤的转移与凋亡率下降有关，已知 组织转谷氨酰胺酶（tissue trans- glutaminase,TTG）可催化蛋白交换小 体（-谷氨酰）赖氨酸的形成，后者是 凋亡小体膜的主要成分，肿瘤转移能 力与TTG的活力成反比。TTG催化能 力下降，伴随凋亡小体的形成减少， 肿瘤转移能力因而增加。 （七）细胞凋亡 细胞凋亡几乎见于肿瘤全过程，许多 问题有待研究，如细胞凋亡的分子机 制与细胞癌变；细胞凋亡与肿瘤预防 ；以及转基因疗法诱导细胞凋亡来治 疗肿瘤等。 无疑随细胞凋亡研究在肿瘤领域的深 入与拓宽，将会为肿瘤的基础研究及 治疗开辟一条新的途径 （八）端粒及端粒酶 自1989年Morin首先在人宫颈癌Hela细 胞中检测端粒酶活性以来，已经见到 许多有关端粒酶与恶性肿瘤相关报道 ，成为肿瘤分子生物学领域最热门的 课题之一。研究表明在近90以上的 人类肿瘤组织及永生化细胞中可以检 测到端粒酶，而几乎所有正常的体细 胞和组织皆查不出端粒酶活性， （八）端粒及端粒酶 据天津肿瘤医院（1998）报道，用 FRAP-ELISA方法检测179例乳腺疾病