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主讲内容主讲内容 检测方法检测方法 试剂配制 检测方法 菌类介绍菌类介绍 菌落形态 生物学特性 人体危害 食品污染 控制与处理控制与处理 预防及控制 污染处理 生物学特性生物学特性 细菌按形态可分为:球菌,杆菌,和螺旋菌.金黄色葡萄球菌就是球菌的一 种.它是革兰氏阳性菌的代表。典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径 0.8m左右,显微镜下排列成葡萄串状。 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛,大多数无荚膜,革兰氏染色阳性。金黄 色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧 ,最适生长温度37C,最适生长pH 7.4,干燥环境下可存活数周。金 黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在1015%NaCl肉汤中生长。可分 解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP 反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液化明 胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对 青霉素、红霉素等高度敏感。对碱性染料敏感,十万分之一的龙胆紫液 即可抑制其生长。 菌落形态菌落形态金黄色葡萄球菌的单个菌落在 Baird-Parker琼脂平板上呈圆形 ,表面光滑、凸起、湿润,直径2 3mm。灰黑色至黑色,有光泽,常 有浅色(非白色)的边缘,周围绕以 不透明圈 (沉淀),其外常有一清晰 带。当用接种针触及菌落时具有 黄油样粘稠感。有时可见到不分 解脂肪的菌株,除没有不透明圈和 清晰带外,其他外观基本相同。从 长期贮存的冷冻或脱 水食品中分 离的菌落,其黑色常较典型菌落浅 些,且外观可能较粗糙,质地较干 燥。平板上菌落厚、有光泽、圆 形凸起,直径1-2mm。 血平板菌落周围形成透明的溶 血环 人体危害人体危害 致病性:金黄色葡萄球菌是人类化脓感 染中最常见的病原菌,可引起局部化脓 感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心 包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感 染。 流行病学特点:季节分布,多见于春夏 季;中毒食品种类多,如奶、肉、蛋、 鱼及其制品。上呼吸道感染患者鼻腔带 菌率83%,所以人畜化脓性感染部位, 常成为污染源。 疾病症状:金黄色葡萄球菌食物中毒症 状一般发病迅速,常见的症状是恶心、 呕吐、干呕、腹痛和虚脱。 有些人可能 并不表现相关病状。严重的出现头痛、 肌肉抽筋、血压和脉冲瞬变。 感染剂量:被污染的食物中不足1.0微克 毒素就会达到金黄色葡萄球菌中毒症状 的剂量。 每克食物中金黄色葡萄球菌超 过10万时就能达到这样的毒素水平。 金黄色葡萄球菌烫伤样皮肤综合症 食品污染食品污染 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的 排泄物中都可找到。因而,食品受其污染的机会很多。一般说,金黄 色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售 人员带菌,造成食品污染:食品在加工前本身带菌,或在加工过程中 受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运 输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其 他部位的污染。常引起金黄色葡萄球菌食物中毒的食物包括肉类和肉 类制品、家禽、蛋制品、面包制品、奶及奶制品。 试剂配制试剂配制 主要试剂 BairdParker培养基基础 亚碲酸钾卵黄增菌液 用途 用于食品中金黄色葡萄球菌的计数和选择性分离培养 l 配制方法 63.0g 950ml 蒸馏 水 加入 倾注平板 备用 冰箱储存 不超过48h 混匀 分装 121 高压灭菌 15min Baird-Parker 琼脂平板 称取BairdParker培养基基础试剂 63.0g到950mL蒸馏水中,加热煮沸至完 全溶解,分装每瓶95mL,121高压灭菌 15min。每95mL加入预热至 50的亚碲 酸钾卵黄增菌剂5mL 摇匀后倾注平板备用 ,使用前在冰箱储存不得超过48h。 检测方法检测方法 GB 4789.102010GB 4789.102010金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌检验 l 第一法 金黄色葡萄球菌定性检验 适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验 l 第二法 金黄色葡萄球菌 Baird-Parker平板计数 适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数 第三法 金黄色葡萄球菌MPN计数 适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品中金黄色葡 萄球菌的计数 36136145h48h45h48h 第二法第二法 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 Baird-ParkerBaird-Parker平板计数平板计数 鉴鉴鉴鉴定定 报告 计数 镜检 阳阳性性 血浆 凝固酶 实验 阳阳性性 挑取Baird-Parker平板上可疑菌落1个或以上, 分别接种到5mLBHI和营养琼脂小斜面,361 培养18h24h。取新鲜配置兔血浆0.5mL,放入小试管中, 再加入BHI 培养物0.2mL0.3mL,振荡摇匀, 置361温箱或水浴箱内,每半小时观察一次,观察 6h, 如呈现凝固(即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块) 或凝固体积大于原体积的一半,被判定为阳性结果。 预防及控制预防及控制 防止金黄色葡萄球菌污染食品 防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产加工人员进行健康检 查,患局部 化脓性感染(如疥疮、手指化脓等)、上呼吸道感染(如鼻窦炎、化脓性肺炎、 口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。对肉制品加工厂,患局部化 脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位,经高温或其他适当方式处理后进行加工生 产。 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 应在低温和通风良好的条件下贮藏食物,以防肠毒素形成;在气温高的春夏季, 食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时,并且食用前要彻底加热。 杀死金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一
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