白文强（毕业论文）

福建农林大学本科毕业论文论文题目：冰核细菌对香蕉冻害的影响与药剂防寒保护初步试验 学 院： 生命科学学院 专业年级： 08生物技术（专升本） 学 号： 081808041 姓名： 白 文 强 指导教师、职称： 李清禄 教授 2010 年 6 月 1 日Banana INA Bacterial Distributed rule and Medicament Cold-resistance protection of a preliminary trialSubmitted in partial fulfillment of the requirements for the degree of Bachelor in School of Life Sciences, FAFU.College: School of Life SciencesSpeciality: BiotechnologyEntrance year: 2008I.D.NO: 081808041Candidate: Bai WenqiangSupervisor: Li Qinglu ProfSubmitted: In June 2010目 录中文摘要- -4英文摘要-51 引言-61.1 香蕉生态学特性-61.2寒害对香蕉生产的影响-61.3冰核细菌与植物寒害关系-71.4 研究内容及意义-72 材料与方法-72.1材料-82.1.1 供试植株-92.1.2 实验香蕉园-102.1.3 培养基-102.1.4 供试药剂-112.2 方法-112.2.1 低温对香蕉生长的影响-112.2.2供试植株前处理-112.1.2 香蕉的低温敏感性测定-122.2 INA细菌对香蕉寒害影响-122.2.1 冰核细菌的培养与接种-122.2.2 不同浓度冰核细菌对香蕉生长的影响-122.2.3 香蕉冻害程度分级-132.3 低温及INA细菌对香蕉苗相关生理的影响-132.4 霜药剂SST杀灭冰核细菌室内实验-132.4.1 供试植株处理-132.4.2 防霜剂SST对冰核细菌的杀灭效果-132.4.3 防霜剂SST对香蕉保护效果室内实验-142.5 防霜剂SST防除冰核细菌大田实验-142.5.1 大田实验中防霜剂SST对并和细菌的杀灭作用-142.5.2 防霜剂SST对香蕉保护效果大田实验-153 结果与分析-163.1 低温对香蕉生长的影响-163.2.1 冰核细菌对香蕉寒害的影响-163.2.2 不同浓度冰核细菌对香蕉寒害的影响-163.3 低温及INA细菌对香蕉苗相关生理的影响-173.3.1低温及INA细菌对香蕉SOD活性影响-173.3.2 低温及INA细菌对香蕉过氧化物酶活性的影响-173.3.3 低温及INA细菌对过氧化氢酶活性的影响-173.3.4 低温及INA细菌对香蕉丙二醛含量的影响-183.3.5 低温及INA细菌对香蕉细胞质瞙相对透性的影响-1834防霜剂SST对香蕉防寒试验-194 讨论与结论-19参考文献-21致谢-23 冰核细菌对香蕉的冻害影响与药剂防寒保护初步试验白 文 强 摘要：通过人工模拟霜冻试验，验证冰核细菌是诱发和加重香蕉霜冻害的一个重要因素，因此降低或杀灭香蕉上的冰核细菌，将是降低香蕉受寒害的一种新型、方便的措施。并对所筛选的防霜剂进行了香蕉园田间试验，为香蕉寒冻害的御防做了积极探索，为防霜剂的推广提供了理论依据。研究发现，在5的温度下处理48h，接种冰核细菌的香蕉，受到严重寒害。与未接种INA细菌的对照苗相比，低温胁迫下接菌香蕉苗的相关保护酶活性的下降幅度更大，MDA值、电导率的升高更明显，香蕉叶片光合作用受阻更严重，冰核细菌不仅可以在-1的低温下诱发加剧植物的霜冻害害，而且可以在05的较高温度下诱发加剧植物的寒害。通过对香蕉园田间喷药试验，证明了防霜剂SST稀释500倍时，不会对香蕉产生药害，并且对冰核细菌有较好的杀灭效果，随着喷药次数的增加，香蕉上冰核细菌的数量随之下降，防霜剂SST在降低寒害对香蕉的影响方面具有明显的效果。关键词:香蕉 冰核细菌 冰核活性 寒害 防霜剂SST；Banana INA Bacterial Distributed rule and Medicament Cold-resistance protection of a preliminary trialChen ZhihuiAbstract：The ice nucleus bacterium is the suggestion and an aggravation banana winter-killing important attribute, therefore according to the ice nucleus bacterium growth rule, reduces or eliminates on bananas ice nucleus bacterium, will be reduces the banana the winter-killing one kind new, the convenient measure. For the proving ice nucleus bacterium on different local, the different variety bananas distributed situation and the different banana garden ice nucleus bacterium ice nucleus active difference situation, and the trial test examines the present protection of frost medicinal preparation to the banana winter-killing protection effect, thus to further develop the protection of frost medicinal preparation and applies in the actual production practice provides the experiment to rest on.This article gathers from several big piece banana garden the winter-killing banana sample, uses the plate separating by dilution raise law to carry on the separation to the banana leaf blades ice nucleus bacterium and the active determination (uses Lindow improvement Vail small bubble freezing process).The results showed that: The identical varietys banana ice nucleus bacteriums distribution along with local, the banana spot and the ice nucleus thin mold mushroom spawn is different and is different, the identical local ice nucleus bacteriums distribution along with the banana variety, the banana spot and the ice nucleus thin mold mushroom spawn is different and is different, ice nucleus bacterium ice nucleus activeness along with local difference and difference. Through to the big field banana garden spraying experiment, had proven along with spraying number of timess increase, on the banana ice nucleus bacteriums quantity along with it drop, protection of frost medicinal preparation SST is reducing the winter-killing the influence aspect to have the tangible effect to the banana.Key words: banana INA bacteria; ice nucleation active ; frost injury ; antifrost agent1引 言1.1香蕉的分布及生物学特性香蕉属芭蕉科(Musaceae)芭蕉属(Musa.L)，是我国华南地区重要水果，主要分布在广东、海南、广西、福建、云南、贵州、台湾等省区。2003年，我国香蕉种植面积约2.28l05 hm2 ，产量约5.90l06 t，总产量仅次于苹果和柑橘，居我国水果产量第3位1。香蕉是福建省的主要果树之一，其产量仅次于柑桔，列第二位。由于香蕉生产周期短、产量高、效益好，受到广大农民的喜爱,香蕉产业在福建省农业经济中发挥着重要作用，是农民脱贫致富的重要途径3。香蕉原产于热带，喜温畏寒，适宜在15.535.0的较高温度中生长，抗寒能力差，对低温反应较敏感。当温度低于10时，香蕉基本停止生长，低于5时，香蕉叶片呈险黄褐色的受冻害症状，当温度降到1.0以下时，细胞线立体破坏,细胞死亡，导致生长点腐烂和叶片干枯,球茎死亡,生长点死亡,不能抽生发芽2。1.2.寒害对香蕉生产的影响寒害是一种严重的自然灾害，每年因寒害给农业生产造成巨大的经济损失，遇到周期性大冻害经济损失更为惊人据历史记录， 19621963，19731974，19911992，1999和2002年，均发生周期性冻害。其中1991和1999年均属大冻害。以1999年为例， 受害地区涉及广 西、广东、福建、云南、浙江、江两、 四川、湖南、湖北等省。受冻害作物有香蕉、荔枝、龙眼、菠箩、茫果、柑桔、柚类、枇杷、橄榄、木瓜、番石榴、洋桃、蔬菜、花卉等，据广西、广东、福建三省不完全统计，估算受灾害面积达1500万亩以上，经济损失达150亿元人民币3-4特别是近几年来，气候变化异常，而怕寒害经济作物的种植面积有较大发展，作物的播种期也有所提前，所以寒害危害有越来越严重的趋势。寒害对农作物产生的危害己经引起了人们的普遍关注。香蕉属热带水果，对温度的要求比较高，喜高温、怕低温、忌霜冻，适宜生长温度在20以上，2832时生长最快，16以下生长缓慢，10以下基本就停止生长，12则叶片受害枯死5-7。我国香蕉主要种植在华南地区, 地理上分布于北热带和南亚热带, 与其他热带产蕉国不同的是, 我国除了海南等个别地区外，常年都受到冬春寒流的侵袭, 轻则香蕉叶果受伤而减产，重则整株死亡绝收8。1.3 冰核细菌与植物寒害关系近年来通过国内外学者对温带植物冻害的进一步研究认为自然界中广泛存在着一种能提高植物冰点温度的细菌，即为冰核活性细菌（Ice nucleation active bacteria 简称INA细菌），它能够破坏植物体内水的过冷却状态，如有INA细菌存在的植物，在-2-3下就能诱发温带植物体内细胞水结冰而发生霜冻；如无INA细菌存在的植物，可耐-6-7的低温不发生或发生轻微霜冻害。近年来，人们从细菌学的角度开展的霜冻危害机理研究并取得了很大进展。Lindow57研究指出，植物体本身在-10以上不产生冰核物质，由于细胞水过冷却作用而不结冰，所以在此温度以上使植物受冻，必有异源冰核物质存在。大多数植物体内寄生或体表附生的细菌能使植物体内外的水在0（甚至0以上）时就结冰，使植物加重受冻害程度。冰核细菌能够在比较高的温度下诱发植物体内水分形成冰晶。冰晶一旦形成，就会以很快的速度向处于过冷却状态的其他部位扩伸，并且体积逐渐增大78-80。它们会对细胞膜产生越来越大的胁迫，使膜内的过氧化氢酶、过氧化物酶很快失活，氧的自由基得不到迅速消除而加剧对膜的氧化，引起膜破损导致细胞死亡。Lindow等人57研究了冰核细菌的种类、生态以及与霜敏感作物的冻害因果关系，发现冻害程度与存在于植物体地上部分的冰核细菌数目相关。无菌生长的作物能忍受低于-5的温度而不表现明显的冻害，而喷洒INA细菌后暴露于低温则敏感，说明冰核细菌是诱发植物霜冻的关键因素。这一发现揭示了植物霜冻的实质，即霜冻是由植物中冰核细菌的数量、环境温度和植物的霜敏感性决定的，这为我们研究和防御植物霜冻提供了理论依据。14研究内容及意义：首先利用智能人工气候培养箱，将长势一致的两组香蕉苗，一组为无菌苗，另一组为接种INA细菌苗，放入其中。设置不同的温度梯度，观察两组香蕉苗的生长状况，记录其受寒害等级，确定对香蕉产生寒害的临界温度。设置不同的温度梯度和时间梯度，测定低温下无菌香蕉苗和喷施INA细菌香蕉苗的保护酶、丙二醛、电导率等生理指标的变化。通过香蕉大田试验，检验所筛选药剂对香蕉低温寒害和霜冻害的保护效果。确定最佳用药浓度、用药时间、用药周期和次数。对用药后香蕉上冰核细菌的数量，香蕉的生长情况经行跟踪调查。为冰核细菌对香蕉冻害进行研究和探讨，摸索出一种新的减轻香蕉寒害的途径。1 材料1.1 供试菌株和植株供试菌株：选用具有较强冰核活性的菌株，南靖冰核细菌、仙游冰核细菌（分别从福建漳州市和福建仙游县香蕉园分离得到），经过细菌学鉴定种类均为凤梨欧文氏菌株（E.ananas）。供试植株：选用在福建省广泛种植的天宝蕉为实验材料，株高30cm左右、四叶一心、生长健壮、长势一致。1.2 实验香蕉园在莆田龙华、仙游万福和漳州云霄选取3块香蕉园进行香蕉大田试验。香蕉园应处在地势平坦开阔地带，远离公路和居民区，避免人为因素干扰，香蕉株数应在50株以上。据莆田、仙游、云霄3个气象站的资料，年平均气温20.021.5 ，最冷月（1月）平均气温1114 ，年降水量13231715 mm，极端最低气温0.2-3.5 。低温霜冻害大多出现在12月下旬至2月上旬，初霜一般发生在12月20日前后，终霜一般在2月中旬，最早初霜日11月24日，最晚终霜日3月5日。年平均霜日58天。1.3 培养基 金氏B（简称KB）培养基：蛋白胨20.0g，丙三醇10.0g，磷酸氢二钾1.5g，硫酸镁1.5g，琼脂15.0g，蒸馏水1000mL，PH7.21.4 供试药剂防霜药剂SST（福建农林大学金谷科技公司配置）；链霉素（对照药剂）1.5 主要实验仪器XFS-280A手提式高压蒸汽灭菌锅（浙江新丰医疗器械有限公司）；TF-1A型生化培养箱（江苏分析仪器厂）；BSG-300光照培养箱（上海博迅公司）；ZRX-258D智能人工气候培养箱（杭州钱江仪器设备有限公司）；SW-CJ-1BF型单人水平垂直两用净化工作台（苏州净化设备有限公司）；ZD-85恒温振荡器（常州国华电器有限公司）； UV-1600型紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）； Anke GL-20G-型离心机（上海安亭科学仪器厂）；微波炉（Galanz）；DDB-303A型电导仪（上海民仪电子有限公司）；便携式荧光成像系统（Hnady Fluor Cam, 捷克PSI公司）。农用喷药桶。2 方法2.1 低温对香蕉生长的影响 2.1.1 供试植株前处理 将香蕉苗放入智能人工气候培养箱前用链霉素处理2次，室温放置1天，取样分离，确保所用香蕉苗为不含冰核细菌的无菌苗，然后进行低温敏感性测定。2.1.2 香蕉的低温敏感性测定 选取8株生长健壮的香蕉苗，分为4组，分批次放置于智能人工气候培养箱，培养箱分别设置为从室温自动降到10、7、5、3，光照强度为66，12小时光暗交替。处理48小时后，观察香蕉生长状况和不同受寒害程度。2.2 INA细菌对香蕉寒害影响2.2.1 冰核细菌的培养与接种将分离保存的INA细菌菌株，活化后挑取单菌落移入KB斜面上，在20下培养2436小时后，每个试管加入3 mL无菌水洗下菌苔,细菌悬液浓度约为3.0108cuf/ml。将细菌悬液喷洒到无菌香蕉苗上，置于室温下24小时后放入智能人工气候培养箱5处理48小时，以无菌香蕉苗作为对照，观察在INA细菌存在情况下，香蕉生长状况和不同受寒害程度。2.2.2 不同浓度冰核细菌对香蕉生长的影响 配制成108、106、104、102四个浓度梯度的冰核细菌悬浮液，各喷洒在香蕉上，以菌液不下滴为适。将香蕉苗放入人工气候箱中5处理48小时，观察不同浓度冰核细菌对香蕉寒害的影响，并以喷洒清水的香蕉苗作对照。2.2.3 香蕉冻害程度分级零级：叶片正常；级：叶片出现零星褪绿斑；级：叶片边缘褪绿，主脉弯曲下垂；级：主脉正常，叶面约1/2面积变褐；主脉向内卷缩：级：叶片除主脉青绿外，其余部分枯萎变褐，皱缩变薄；主脉向内卷缩；级：整叶枯萎，颜色变深褐色，叶片变薄，主脉下垂，心叶由假茎往下腐烂。香蕉冻害分级标准：以叶片为单位。冻害指数100 n：各种受害等级的叶片数 N：总的叶片数2.3 低温及INA细菌对香蕉苗相关生理的影响将香蕉苗分成两组，其中一组接种冰核细菌，另一组作为无菌对照。将试验材料放入智能人工气候培养箱中作逐步线性降温处理，温度梯度为25、15、1O、5、0。降至某一温度后保持24小时，取出一组材料后继续降温。人工气候箱光照强度为3500lx，12小时光暗交替，湿度为75。各次降温处理结束后，剪取香蕉幼苗第2位叶位叶片去除中间叶脉清洗后采用氮蓝四唑(NBT)显色法测定香蕉超氧化物歧化酶(SOD)活性56。采用愈创木酚法测定POD活性。过氧化氢酶活性测定101用硫代巴比妥法测定MDA含量，用电导率仪测定香蕉相对电导率55；相同处理重复取样3次，结果取平均值，用Excell软件对试验数据进行分析作图。2.4 霜药剂SST杀灭冰核细菌室内实验2.4.1 供试植株处理取6株盆栽香蕉苗，分3组，在香蕉苗上同时接种浓度为108cuf/mL冰核细菌悬浮液，接种后3天将防霜药剂SST均匀喷洒在接有冰核细菌的香蕉苗上，以香蕉叶片湿润但药剂不下滴为宜，并以接种冰核细菌喷洒清水的香蕉苗作对照。2.4.2 防霜剂SST对冰核细菌的杀灭效果 喷洒防霜剂SST3天后对香蕉叶片上的冰核细菌进行分离，共用SST处理3次，分别分离冰核细菌并统计冰核细菌密度，检测不同浓度防霜药剂SST和不同处理次数对冰核细菌的杀灭效果。2.4.3 防霜剂SST对香蕉保护效果室内实验利用智能人工气候培养箱，将两组接种冰核细菌的香蕉苗其中一组喷稀释500倍防霜药剂SST药液；另一组用清水对照。常温下放置3天，将两组香蕉苗放入智能人工气候培养箱，培养箱设置从室温自动降到5，光照强度为66，12小时光、暗交替。处理48小时后，观察两组香蕉苗的受寒害等级，设3次重复。2.5 防霜剂SST防除冰核细菌大田实验2.5.1 大田实验中防霜剂SST对并和细菌的杀灭作用在未施用防霜剂SST之前，于香蕉园试验点采集样本进行冰核细菌分离，计算香蕉叶上冰核细菌的定殖密度。 喷过药剂7天后对香蕉叶片采样和冰核细菌的分离，共用防霜剂处理3次，比较每次药剂处理后香蕉上冰核细菌数量的变化。2.5.2 防霜剂SST对香蕉保护效果大田实验选择冰核细菌定殖密度较高、低温寒害和霜冻害发生频率高的香蕉园作为试验点。莆田龙华、仙游万福、漳州云霄等香蕉园冰核细菌密度较高，往年霜冻害发生较为频繁，时进行田间药剂实验的理想场所。根据查阅气象资料和对当地蕉农的调查询问，得知霜冻害的发生一般是在冬至（12月21日23日）以后直到次年的2月份，同时这段时间也是全年气温最低的月份，是试验最佳时期。因此，应在霜冻发生前对实验香蕉园进行喷药，检验药剂对香蕉的防寒防霜的保护作用。跟踪调查防霜剂SST对香蕉的保护效果，对比试验和对照香蕉园香蕉进行寒害等级划分，统计计算防冻效果。防寒效果1003 结果与分析3.1 低温对香蕉生长的影响 低温对香蕉生长影响的试验结果如下表。检查香蕉不同受害程度，主要依据香蕉叶片的生理状况属于哪个寒害等级，每组5个叶片为准。表1 不同温度对香蕉生长的影响Tab.1 Different temperature on the impact of banana 寒害等级 温度 总叶数 0级 级 级 级 级 级 寒害指数10 5 5 0 0 0 0 0 07 5 4 1 0 0 0 0 2.05 5 2 2 1 0 0 0 8.03 5 0 1 2 2 0 0 30.0从表1看出，温度10以上处理48小时的香蕉苗没有出现明显的受寒害症状。7时对香蕉有轻微影响，叶片出现零星褪绿斑。当温度降至5时，处理24小时的香蕉苗部分叶片出现边缘褪绿，主脉弯曲下垂的现象，处理48小时后观察，叶片除主脉褪绿外，其余部分枯萎变褐，皱缩变薄，主脉向内卷缩。由此确定5为影响香蕉产生寒害的临界温度。3.2.1 冰核细菌对香蕉寒害的影响接种冰核细菌后的香蕉苗和无菌苗置于5下处理48 h。试验重复三次，以香蕉叶片为计数单位，结果为三次试验累加值，如表2所示。表2 冰核细菌对香蕉寒害的影响Tab.2 INA bacteria on the impact of chilling injury to banana寒害等级 香蕉苗 总叶数 0级 级 级 级 级 级 寒害指数 比对照增加（）接菌苗 15 3 6 3 3 0 0 18.0 125 无菌苗 15 6 6 3 0 0 0 8.0 0从表2结果看出，接种冰核细菌香蕉苗的受寒害指数为18.0，无菌对照苗的受寒害指数为8.0，接种冰核细菌香蕉的冻害与对照相比受害程度有较明显的增加，说明冰核细菌是诱发香蕉加重低温寒害的重要因素。3.2.2 不同浓度冰核细菌对香蕉寒害的影响 接种相同活性等级不同浓度冰核细菌，5处理48小时后的实验结果见下表。表3 不同浓度冰核细菌对香蕉寒害的影响Tab.3 Different concentrations of INA bacteria on the impact of chilling injury to banana接种INA细菌 寒害等级浓度（cfu/mL） 0级 级 级 级 级 级 寒害指数 对照 6 6 3 0 0 0 8.0102 6 6 3 0 0 0 8.0104 4 7 4 0 0 0 10.0106 3 5 6 1 0 0 14.7108 2 4 7 2 0 0 19.0由表3实验结果可以看出，当冰核细菌密度达到104以上时，对香蕉寒害有明显的加剧作用。说明在一定的条件下，冰核细菌密度越大、活性越高，对香蕉的影响越大，寒害指数越高。3.3 低温及INA细菌对香蕉苗相关生理的影响3.3.1低温及INA细菌对香蕉SOD活性影响 图1 低温及冰核细菌对香蕉SOD活性影响Fig.1 Low temperature and INA bacteria on the impact of SOD activity of bananaSOD是重要的膜保护酶，SOD活性可以反映植物细胞对逆境的适应能力由图1看出，随温度下降，对照和处理SOD活性变化趋势相同，总体上呈先上升后下降的趋势。在15处理24h后，SOD活性达到最高值，这是香蕉SOD活性对低温适应的结果，继续10处理24h后SOD活性下降，但此时的活性仍略高于常温对照。再继续5低温处理24h后，SOD活性较之对照已出现明显下降。接种并和细菌香蕉苗SOD活性下降幅度更大，而且随着温度的降低这种差异更加明显。说明在一定的温度范围内，接种INA细菌香蕉苗的受寒害程度与对照相比更高。3.3.2 低温及INA细菌对香蕉过氧化物酶活性的影响图2 低温及INA细菌对香蕉过氧化物酶活性的影响Fig.2 Low temperature and INA bacteria on the impact of SOD activity of banana低温胁迫过程中，过氧化物酶催化如下反应:H2O2+AH22H20+A，从而清除H2O2，防止生物膜受到破坏。从图2中可以看出，在持续的低温胁迫过程中，香蕉叶片中的过氧化物酶活性呈现略微上升后大幅下降的趋势。当温度降至5和5以下时，接种冰核细菌的香蕉苗过氧化物酶活性低于空白对照苗，并且随着温度的继续下降，活性的差异表现的越来越明显。说明在一定温度范围内，冰核细菌在一定程度上加剧了寒害对香蕉苗的影响。3.3.3 低温及INA细菌对过氧化氢酶活性的影响图3 低温及INA细菌对香蕉CAT活性的影响Fig.3 Low temperature and INA bacteria on the impact of SOD activity of bananaCAT普遍存在于植物的所有组织中，其活性与植物的代谢强度及抗寒，抗病能力有一定关系。它可促使H2O2分解为分子氧和水，清除体内的过氧化氢，从而使细胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御体系的关键酶之一。从上图看出，当温度从25降到0的过程中，CAT活性呈下降趋势。冰核细菌的存在，使有菌苗与无菌对照苗相比CAT活性更低，这种差异在0时表现的最明显。3.3.4 低温及INA细菌对香蕉丙二醛含量的影响图4 低温及INA细菌对香蕉MDA含量的影响Fig.4 Low temperature and INA bacteria on the impact of MDA of bananaMDA(丙二醛)是膜脂过氧化作用的产物，MDA的积累可对膜和细胞造成进一步的伤害，是膜系统受害的重要标志之一。由图4可见，无论是处理苗还是对照苗，香蕉叶片MDA含量随温度下降而升高，温度越低，MDA含量上升趋势越明显，随着温度的降低，接种INA细菌的香蕉叶片MDA含量明显高于无菌对照。说明低温胁迫下INA细菌能明显促进膜脂过氧化作用，降低香蕉苗的抗寒性。由此表明，INA细菌是诱发和加重香蕉寒害的重要因素。3.3.5 低温及INA细菌对香蕉细胞质瞙相对透性的影响图5 低温及冰核细菌对香蕉相对电导率的影响Fig.5 Low temperature and INA bacteria on the impact of relative conductivity of bananas据图5可得出，随着温度的降低，不管是处理苗还是对照苗，相对电导率都有不断升高的趋势。但随着温度的继续降低和低温时间的延长，在一定的温度下，接种冰核细菌香蕉的相对电导率要高于无菌香蕉苗的相对电导率；说明冰核细菌的存在加剧了细胞膜的损伤，使香蕉的抗寒能力下降、是香蕉发生寒害的一个重要因素。34防霜剂SST对香蕉防寒试验3.4.1 防霜剂SST对香蕉防寒保护效果室内实验接种冰核细菌后用防霜剂SST处理的香蕉苗和有菌对照苗置于5下处理24 小时，以香蕉叶片为计数单位，计算香蕉苗的寒害指数，设三次重复，结果为三次试验累加值，如表3所示。表3 SST对香蕉防寒保护效果Tab.3 Protective effect of SST to banana 寒害等级处理 总叶数 0级 级 级 级 级 级 寒害指数 有菌对照 15 2 6 4 3 0 0 19.4 喷药处理 15 5 7 3 0 0 0 8.7 由表可以看出，喷药处理的香蕉苗寒害指数为8.7，而接种冰核细菌对照香蕉苗的冻害指数为19.4，说明防霜剂SST可以有效杀灭冰核细菌，在低温下对香蕉起到有效保护作用。3.4.2 防霜剂SST大田防霜冻试验3.4.2.1 防霜剂对香蕉上冰核细菌数量的影响 对3个香蕉园试验点的香蕉喷药处理，7天后采样进行冰核细菌的分离，共用防霜剂SST处理3次，检测每次喷药后，香蕉上冰核细菌的数量变化。检测防霜药剂不同施用次数对香蕉上冰核细菌的杀灭作用，并以施用链霉素作对照。具体试验结果如下：表4-1 莆田龙华香蕉园冰核细菌的杀灭试验Tab.4-1 Sterilizing test to to INA bacterial in Longhua banana plantation喷药前3次采 试验药剂 3次分离冰核细菌数量（cfu /g） 样密度平均值 1 2 3 3.8108 SST 7.7105 4.5 106 7.5103链霉素 8.9107 3.6107 5.5105空白对照 3.0108 4.5108 8.0107表4-2 仙游万福香蕉园冰核细菌的杀灭试验Tab.4-1 Sterilizing test to to INA bacterial in Wanfu banana plantation喷药前3次采 试验药剂 3次分离冰核细菌数量（cfu /g） 样密度平均值 1 2 3 1.5108 SST 4.3107 6.7 105 7.5103链霉素 8.3106 6.6106 3.0106空白对照 7.5107 2.5108 8.7107表4-3 漳州云霄香蕉园冰核细菌的杀灭试验Tab.4-1 Sterilizing test to to INA bacterial in Yunxiao banana plantation喷药前3次采 试验药剂 4次分离冰核细菌数量（cfu /g） 样密度平均值 1 2 3 4 1.08109 SST 1.5108 4.5 105 6.7105 7.6103链霉素 6.6.108 3.0107 7.5106 4.8105空白对照 7.5107 2.5108 8.7107 通过香蕉园试验看出，34次喷药后香蕉上冰核细菌的数量明显的减少，达到104数量级或104数量级以下，说明药剂对田间香蕉上冰核细菌具有良好的杀灭作用。总体上，随着药剂施用次数的增加冰核细菌数量呈下降趋势，但田间试验受到风力、降雨等自然因素的影响，冰核细菌数量可能会出现不将反升现象。3.5. 防霜剂对香蕉的田间保护效果在3个试验香蕉园各随机抽取30株香蕉作寒害等级调查，与未喷药的香蕉苗（随机抽取）作对照。表5 三个试验香蕉园香蕉寒害等级调查Tab.5 chilling injury survey in three banana plantations 寒害等级处理 总棵数 0级 级 级 级 级 级 寒害指数 防寒效果 SST 90 51 15 10 5 4 5 16.2 42.6 CK 90 26 20 18 10 8 8 27.8 4 小结与讨论冰核细菌对温带植物冻害影响，已有文献报道，杨建民等人证明，在-1 -5的低温胁迫下，接种INA细菌比未接菌的对照杏树花器官较大幅度的提高相对电导率、MDA含量，降低SOD, POD酶活性。冰核细菌对亚热带和热带植物的影响还没有相关报道。本文探讨冰核细菌对香蕉寒