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文档简介

5 5 月月 1 1 日日 DNADNA 的粗提取及鉴定的方法的粗提取及鉴定的方法 高考频度: 难易程度: 利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,下列相关叙述正确的是 A洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 014 mol/L,除去析出物 C将丝状物溶解在 2 mol/LNaCl 溶液中,加入二苯胺试剂即成蓝色 D通过调节 NaCl 溶液的浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质 【参考答案】D 【试题解析】洗涤剂能瓦解细胞膜,但不能增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度,A 错误;DNA 在 014 mol/L 的氯化钠中溶解度最低,所以用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 014 mol/L 的目的是获得黏稠物,B 错误;DNA 丝状物溶解在 2 mol/LNaCl 溶液中,加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色,C 错误;DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,DNA 在 2 mol/LNaCl 溶液中溶解度最大,在 014 mol/LNaCl 溶液 中溶解度最小。酶具有专一性,木瓜蛋白酶可以水解 DNA 中的蛋白质类杂质,D 正确。 解答本题,关键要掌握 DNA 粗提取和鉴定的原理: 1DNA 的溶解性:DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同(DNA 在 014 mol/L 的氯 化钠中溶解度最低) ;DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2DNA 对酶、高温和洗 涤剂的耐受性不同。3DNA 的鉴定:在沸水浴的条件下,DNA 遇二苯胺变成蓝色。 1DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,DNA 不溶液于酒精溶液,而细胞中的某些物质溶于酒精溶 液。如图表示“DNA 的粗提取”实验的相关操作步骤,其操作目的分析错误的是 A是洗涤红细胞、去除红细胞表面的杂质 B是稀释 NaCl 溶液至 014 mol/L,析出 DNA C是选用 2 mol/LNaCl 溶液,溶解黏稠物中的 DNA D是纯化 DNA,去除溶于 95%酒精的杂质 2对“DNA 的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是 A利用 DNA 能溶而蛋白质不溶于冷酒精溶液,可将 DNA 与蛋白质分离 B在用花菜作实验材料时,研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜 C在 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可提高 DNA 纯度 D利用 DNA 在 014mol/LNaCl 溶液中溶解度最大的特点,可将 DNA 与杂质分离 3下表有关“DNA 粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂,错误的是 相关操作选用的试剂 A 破碎鸡血细胞蒸馏水 B 溶解核内 DNA014mol/L 的 NaCl 溶液 C 提取杂质较少的 DNA冷却的 95%的酒精 D DNA 的鉴定现配的二苯胺试剂 1 【答案】A 【解析】是使细胞破裂,是稀释 NaCl 溶液至 014 mol/L,析出 DNA,是选用 2 mol/LNaCl 溶液, 溶解黏稠物中的 DNA,是纯化 DNA,去除溶于 95%酒精的杂质,所以 A 错误。 2 【答案】C 【解析】由于 DNA 不溶于酒精,而其他杂质如蛋白质可以溶于酒精,因此利用体积分数为 95%的冷酒精 溶液将 DNA 和蛋白质分离,A 错误;提取分离 DNA 时,加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜,B 错误;利用 酶的专一性,蛋白酶只能将蛋白质分解,而不能分解 DNA,因此在 DNA 滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋 白酶的作用,可将 DNA 与蛋白质分离,从而提高 DNA 纯度,C 正确;DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度 不同,在 014mol/LNaCl 溶液中溶解度最小,D 错误。 3 【答案】B 【解析】在鸡血细胞液中加入蒸馏水,使得血细胞吸水胀破,A 正确;014mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA 的溶解度最低,B 错误;DNA 不溶解于酒精,而其他杂质能溶解于酒精,则用体积分数为 95%的冷酒精能 提取杂质较少的 DNA,C 正确;DNA 沸水浴中遇二苯胺变成蓝色,双缩脲用来检测蛋白质成紫色,D 正确。 【名师点睛】 (1)动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水, 同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。 (2)DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓 度就能使 DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。 (3)DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质 进一步的分离。 (4)在沸水浴条件下,DNA 遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。 5 5 月月 2 2 日日 DNADNA 的粗提取与鉴定的实验设计的粗提取与鉴定的实验设计 高考频度: 难易程度: 下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述,错误的是 ADNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随着溶液浓度的变化而变化 B向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水胀破,释放出其中的 DNA C把 DNA 加入二苯胺溶液中,在沸水浴中颜色不变,只有冷却后才能观察到蓝色 D向滤液中加入冷却酒精的目的是除去 DNA 中的杂质,纯化 DNA 【参考答案】C 【试题解析】DNA 在 014mol/LNaCl 溶液中的溶解度最低,高于或低于这个浓度,溶解度上升,A 项正确; 鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水胀破,释放出其中的 DNA,B 项正确;在沸水浴条件下,DNA 遇 二苯胺会被染成蓝色,C 项错误;DNA 不溶于酒精,因此向滤液中加入冷却酒精的目的是除去 DNA 中的杂 质,纯化 DNA,D 项正确。 1实验原理 (1)DNA 与蛋白质在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同 溶解规律2 mol/L NaCl 溶液 014 mol/L NaCl 溶液 DNA 溶解析出 蛋白质 NaCl 溶液物质的量浓度从 2 mol/L 逐 渐降低的过程中,溶解度逐渐增大 部分发生盐析沉淀溶解 (2)DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将 DNA 与蛋白质进一 步分离。 (3)DNA二苯胺沸水浴加热,蓝色。 2DNA 的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4” 加蒸馏 水 2 次 加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水胀破;加到含 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl 溶液中,使 NaCl 溶液的物质的量浓度下降到 014 mol/L, 使 DNA 析出 用纱布 过滤 3 次 过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;滤取 014 mol/L 的 NaCl 溶液中析出的 DNA(黏稠物) ;过滤溶有 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl 溶液 用 NaCl 溶液 4 次 加 2 mol/L 的 NaCl 溶液,溶解提取的细胞核物质;用 014 mol/L 的 NaCl 溶液使 DNA 析出;用 2 mol/L 的 NaCl 溶液,溶解滤 取的 DNA 黏稠物;用 2 mol/L 的 NaCl 溶液,溶解丝状物用于鉴定 DNA 1在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中,相关叙述正确的是 A用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 014 mol/L,滤去析出物 B调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质 C将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色 D用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同 2DNA 粗提取实验中,应尽可能避免 DNA 断裂和降解。相关操作正确的是 A以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进 DNA 溶解 B向 DNA 溶液中迅速加入蒸馏水,使 DNA 快速析出 C将丝状物溶解到 2 molL-1NaCl 溶液中后,加水析出 D向 DNA 溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌 3下列有关 DNA 的粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是 A取材:鸡血细胞;原因:有细胞核,其他动物的血细胞都没有细胞核 B粗提取:不同浓度的 NaCl 溶液;原因:DNA 在其中的溶解度不同 C提纯:95%的冷酒精;原因:DNA 溶于酒精,蛋白质等杂质不溶于酒精 D鉴定:二苯胺试剂;原因:DNA 溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色 1 【答案】B 【解析】DNA 的粗提取实验原理是 014 mol/L NaCl 溶液中 DNA 溶解度最低,DNA 不溶于 95%的冷酒精 等。用蒸馏水将 2 mol/LNaCl 溶液浓度调制 014 mol/L,析出的是 DNA,丢弃的是滤液,A 错误;DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同,DNA 在 2 mol/LNaCl 溶液中溶解度最大,在 014 mol/LNaCl 溶 液中溶解度最小。酶具有专一性,木瓜蛋白酶可以水解 DNA 中的蛋白质类杂质,B 正确;DNA 丝状物溶 解在 2 mol/LNaCl 溶液中,加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色,C 错误;植物细胞有细胞壁保 护着,所以用菜花作实验材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂,D 错误。 2 【答案】D 【解析】以菜花为材料进行研磨时,可以加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分地搅拌和研磨,过滤后收 集研磨液,A 项错误;为避免 DNA 断裂,加入蒸馏水要缓慢,B 项错误;将丝状物溶解到 2 molL-1NaCl 溶液中后,加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为 95%的酒精溶液,静置 23 min,以析出含杂 质较少的 DNA,C 项错误;为避免 DNA 断裂和降解,要向 DNA 溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢 搅拌,D 项正确。 3 【答案】B 【解析】除了哺乳动物成熟的红细胞,其他都有细胞核,A 错误;不同浓度的 NaCl 溶液,DNA 在其中的 溶解度不同,进而粗提取 DNA,B 正确;DNA 不溶于酒精,而蛋白质等杂质溶于酒精,进而提纯 DNA,C 错误;DNA 溶液加入二苯胺试剂后沸水浴加热成蓝色,D 错误。 5 5 月月 3 3 日日 蛋白质的分离原理及方法蛋白质的分离原理及方法 高考频度: 难易程度: 以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是 A红细胞洗涤过程中要加入 5 倍体积的蒸馏水,重复洗涤 3 次 B将血红蛋白溶液放在质量分数为 09%的 NaC1 溶液中透析 12 小时 C凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在 D蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢 【参考答案】C 【试题解析】低渗溶液中细胞会吸水胀破,所以红细胞的洗涤过程应该用生理盐水洗涤,不能用蒸馏水洗 涤,A 错误;将血红蛋白溶液通过透析进行粗分离时应该选用磷酸缓冲液,B 错误;装填色谱柱时,凝胶 填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在,因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序,C 正确;蛋白质通过凝胶时, 相对分子质量较大的移动速度快,D 错误。 蛋白质的提取和分离的过程中,用生理盐水对红细胞进行洗涤以除去血浆杂蛋白;对于提取的血红蛋白进 行粗分离过程中应该将血红蛋白放入透析袋中,将透析袋放入 20 mmol/L 的磷酸缓冲液中透析 12 h,除去 分子质量较小的杂质;由于气泡会影响蛋白质洗脱的次序,因此在凝胶装填时,凝胶填在色谱柱内要均匀, 不能有气泡存在;蛋白质通过凝胶柱时,相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短, 移动速度快,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动速度慢。 1相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程,可表示为图中哪一个 【注:图中大圆点代表相对分子质量大的蛋白质】 2下列关于物质提取、纯化原理的叙述中,不正确的是 A采用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度 不同 B电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 C不能选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白 D将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质 3以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是 A洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂 B猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少 C血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子质量较小的杂蛋白移动慢 1 【答案】B 【解析】相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量大 的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,B 正确。 2 【答案】C 【解析】凝胶色谱法分离蛋白质的原理是不同蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度 不同,A 正确;电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,B 正确;由于哺乳动物的成熟红细 胞内无细胞核和众多的细胞器,所以常常选用猪、牛、羊等哺乳动物的血液进行实验来提取和分离血红 蛋白,C 错误;透析的原理是小分子能够通过半透膜,因此,利用透析法可以去除样品中相对分子质量较 小的杂质,D 正确。 3 【答案】D 【解析】生理盐水与细胞内液渗透压相近,可避免在洗涤过程中红细胞因外界渗透压较小而吸水胀破, 即 A 项表述正确。成熟的红细胞的细胞核和细胞器退化,细胞质中绝大部分成为血红蛋白,所以哺乳动 物成熟的红细胞中杂蛋白较少,即 B 项表述正确。血红蛋白属于有色蛋白,因此在凝胶色谱法分离时可 以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液,如果操作严谨正确,还可以清楚地观察到血红蛋白的 红色区带均匀、狭窄、平整的随洗脱液缓慢流出,这使得血红蛋白的分离过程非常直观简捷,即 C 项表 述正确。凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质容 易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部通道, 只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快,因此二者得以分离,所以血红蛋白分子要比分子质量 较小的杂蛋白移动快,即 D 项表述错误。 5 5 月月 4 4 日日 血红蛋白的提取和分离实验操作血红蛋白的提取和分离实验操作 高考频度: 难易程度: 红细胞含有大量的血红蛋白,我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白,请 回答下列有关问题: (1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,经处理并离心,收集血 红蛋白溶液。 加入柠檬酸钠的目的是_。 以上所述的过程为样品处理,他包括_、_、分离血红蛋白溶液。 (2)收集的血红蛋白溶液可以在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。 透析的目的是_。 透析过程中需要用到_缓冲液。 (3)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 凝胶色谱法是根据_分离蛋白质的方法。 加入 SDS 可以使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于_。 【参考答案】 (1)防止血液凝固 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 (2)去除分子量较小的杂质 磷酸 (3)相对分子质量的大小 分子的大小 【试题解析】(1)柠檬酸钠是一种抗凝血剂,加入柠檬酸钠可以防止血液凝固;样品处理包括红细胞的 洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液。(2)透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内, 透析可以去除样品中分子量较小的杂质。(3)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法。 1下列有关提取和分离血红蛋白的叙述,错误的是 A样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液 B通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取 C可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化 D可通过 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度 2下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述,正确的是 A为了防止血液凝固,应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠 B红细胞洗涤使用 5 倍体积的蒸馏水,直到离心后上清液不呈现黄色为止 C利用 09%的 NaCl 对血红蛋白溶液透析 12 小时,可以去除小分子杂质 D在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品 3下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题,请回答: (1)凝胶色谱法,是根据 分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些 。 (2)实验前取新鲜的血液,切记要预先加入柠檬酸钠,加入柠檬酸钠的目的是 。蛋白质的提 取和分离实验中,首先要用 (填写溶液名称)洗涤红细胞,其目的是去除 。 (3)在 的作用下,红细胞破裂,释放出血红蛋白。用 法可分离出血红蛋白。 (4)取血红蛋白溶液装入透析袋,再将透析袋放入 pH 为 70 的 中,透析 12 h,透析的 目的是 。透析的原理是 。 (5)人们用鸡的红细胞提取 DNA,用人的红细胞提取血红蛋白,其原因是 。 1 【答案】B 【解析】样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液,所以 A 正确;通过透析可以去除样品中 分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取,B 错误;可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除 去,即样品的纯化,C 正确;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋白质纯化鉴定使用最多的方法,所以 D 正 确。 2 【答案】A 【解析】为了防止血液凝固,应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠,A 正确;红细胞洗涤使用 5 倍 体积的生理盐水,直到离心后上清液不呈现黄色为止,B 错误;利用磷酸缓冲液对血红蛋白溶液透析 12 小时,可以去除小分子杂质,C 错误;在凝胶柱中加入蛋白样品后,等样品完全进入凝胶层后才能连接 缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品,D 错误。 3 【答案】 (1)相对分子质量大小 微小的多孔球体 (2)防止血液凝固 生理盐水 杂蛋白 (3)蒸馏水和甲苯 (高速)离心 (4) (磷酸)缓冲液 去除分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋 内 (5)鸡红细胞具有细胞核,含有 DNA,适合用于提取 DNA;人红细胞无细胞核,且血红蛋白含量丰富, 适合用于提取血红蛋白 【解析】 (1)凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微 小的多孔球体。相对分子质量较大的蛋白质经过凝胶颗粒的外部,移动距离短,移动速度快,先洗脱下 来。 (2)柠檬酸钠可以防止血液凝固;首先要用生理盐水洗涤红细胞,其目的是去除可能吸附的血浆中 的蛋白质。 (3)向红细胞中加入蒸馏水和甲苯,蒸馏水会使红细胞破裂,甲苯可以溶解细胞膜,经高速 离心后可分离出血红蛋白。 (4)透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内。取血红蛋白溶液 装入透析袋,再将透析袋放入 pH 为 70 的缓冲液中,以维持血红蛋白的结构和功能。 (5)鸡红细胞具 有细胞核,含有 DNA,适合用于提取 DNA;人红细胞无细胞核,且血红蛋白含量丰富,适合用于提取血 红蛋白。 5 5 月月 5 5 日日 DNADNA 的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定 高考频度: 难易程度: 如图是“DNA 粗提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析回答: (1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因为_,从鸡血细胞中释放出核物质 的处理方法是向鸡血中加入_,并_。如果选用植物细胞,需要选用洗涤 剂_。 (2)图 a 表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取_进行下一步实验。 (3)图 b 表示的相关操作过程中,加入 2mol/LNaCl 溶液的作用是_。 (4)图 c 表示在滤液中加入冷却的_,进一步提取含杂质更少的 DNA。 【参考答案】 (1)鸡血细胞易吸水胀破,核 DNA 含量丰富 蒸馏水 揽拌 溶解细胞膜 (2)滤液 (3)溶解 DNA 分子 (4)95%的酒精 【试题解析】(1)根据 DNA 粗提取实验中材料选择的原则,鸡血细胞核的 DNA 含量丰富,材料易得(以及 鸡血细胞极易吸水胀破),因此鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料。要从鸡血细胞中释放出核物质, 需要向鸡血细胞中加入蒸馏水,让红细胞吸水胀破,并搅拌加速红细胞的破裂。如果选用植物细胞,需要 先用洗涤剂溶解细胞膜。(2)图 a 表示释放核物质后进行过滤的过程,此时 DNA 溶解在氯化钠溶液中, 因此过滤后取滤液进行下一步实验。(3)(4)图 b 表示的相关操作过程中,加入 2 mol/LNaCl 溶液的作 用是溶解 DNA 分子。图 c 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精,由于 DNA 不溶于酒精,而其他杂质可以溶 于酒精,因此可以提取含杂质更少的 DNA。 DNA 的粗提取与鉴定的实验原理 提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对 于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA,去除其他成分。 1DNA 的溶解性 (1)DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同(014mol/L 溶解度最低) ,利用 这一特点,选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。 (2)DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白 质进一步的分离。 2DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质,但是对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080 的高温,而 DNA 在 80 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA 没有影响。 3DNA 的鉴定 在沸水浴条件下,DNA 遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。 1下列有关“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是 A NaCl 溶液的浓度越大,DNA 在其中的溶解度越大 B 研磨植物细胞时加入洗涤剂是为了快速溶解 DNA C 在酒精溶液中,某些蛋白质的溶解度比 DNA 大 D 在 5060 水浴中,DNA 遇二苯胺试剂后变成蓝色 2关于 DNA 粗提取和鉴定实验的操作及原理的叙述,正确的是 A用蒸馏水使猪的红细胞胀破获取含 DNA 的滤液 B控制 NaCl 溶液的浓度可以实现去除杂质的目的 C用玻璃棒轻缓搅拌滤液可使析出的 DNA 量减少 D利用 DNA 溶于乙醇的性质进一步纯化 DNA 3关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的表述哪项是错误的 A离心沉淀的血细胞中加水是为了提取 DNA B氯化钠溶液的物质的量浓度为 2 mol/L 时,DNA 溶解 C向溶解 DNA 的烧杯中加蒸馏水是漂洗 DNA D离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质 4下图为 DNA 的粗提取与鉴定的实验流程过程,请据图回答下列问题: (1)本实验材料选用鸡血细胞液,不适合用哺乳动物的血细胞液,原因是_。 (2)通过图 B 所示步骤取得滤液后,再向滤液中加入 2mol/L 的 NaCl 溶液的目的是_。 (3)图 C 所示加入蒸馏水的目的是_。 (4)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA,可用_试剂进行检验,在沸水浴条件下,冷却后 可以看到颜色反应为_色。 1 【答案】C 【解析】在 NaCl 的质量浓度为 0014mol/L 的范围内,DNA 的溶解度随着 NaCl 浓度的增加而减小, 当 NaCl 浓度为 014mol/L 时 DNA 的溶解度最低,当 NaCl 的浓度大于 014mol/L 时,DNA 的溶解度随 着 NaCl 浓度的增加而增大,A 项错误;研磨植物细胞时加入洗涤剂,是为了能溶解细胞膜,有利于细胞 内 DNA 的释放,B 项错误;DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可溶于酒精,即在酒精溶液 中,某些蛋白质的溶解度比 DNA 大,C 项正确;在沸水浴中,DNA 遇二苯胺试剂后变成蓝色,D 项错误。 2 【答案】B 【解析】DNA 主要位于细胞核,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,因此不能用猪的红细胞作为提取 DNA 的材料,A 错误;由于 DNA 和蛋白质等物质在氯化钠的溶解度不同,因此可以控制氯化钠的浓度来 去掉杂质,用高盐浓度的溶液溶解 DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质,用低盐浓度使 DNA 析出,能 除去溶解在低盐溶液中的杂质,B 正确;用玻璃棒搅拌的目的是让 DNA 充分溶解,C 错误;DNA 不溶于酒 精,而其他杂质溶解于酒精,故利用体积分数为 95%的冷酒精来纯化 DNA,D 错误。 3 【答案】C 【解析】离心沉淀的血细胞中加水是为了使血细胞破裂释放 DNA,从而提取 DNA,A 正确;氯化钠溶液的 物质的量浓度为 2mol/L 时,DNA 溶解,B 正确;向溶解 DNA 的烧杯中加蒸馏水是为了降低氯化钠溶液的 浓度,从而 DNA 析出,C 错误;离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质,D 正确。 4 【答案】 (1)哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核 (2)使 DNA 溶解于 NaCl 溶液中 (3)使 DNA 的溶解度下降而析出 (4)二苯胺 蓝 【解析】 (1)哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核,因此不能用于提取 DNA。 (2)通过图 B 所示步骤取 得滤液后,再向滤液中加入 2mol/L 的 NaCl 溶液的目的是使 DNA 溶解于 NaCl 溶液中。DNA 在 014mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低。 (3)图 C 所示加入蒸馏水的目的是使 DNA 的溶解度下降而析出。 (4)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA,可用二苯胺试剂进行检验,在沸水浴条件下,冷却后可 以看到颜色反应为蓝色。 5 5 月月 6 6 日日 血红蛋白的提取和分离血红蛋白的提取和分离 高考频度: 难易程度: 红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带 O2和 CO2, 我们可以选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题: (1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步:_、粗分离、_和_。 (2)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血 红蛋白溶液。 加入柠檬酸钠的目的是_。 以上所述的过程即是样品处理,他包括红细胞的洗涤、_、分离血红蛋白溶液。 (3)收集的血红蛋白溶液要进行粗分离,其方法是 。 (4)然后通过 法将样品纯化,样品纯化的目的是_。最后经_进行 纯度鉴定。 (5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的_、形状的不同,使带电分子产 生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。 【参考答案】 (1)样品处理 纯化 纯度鉴定 (2)防止血液凝固 血红蛋白的释放 (3)透析 (4)凝胶色谱 去除大分子杂质蛋白 SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳 (5)大小 【试题解析】(1)血红蛋白粗提取和鉴定的步骤包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。 (2)采集血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,以防止血液凝固。样品处理又包括红细胞洗涤、 血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液。 (3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析进行样品的粗分离。 (4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,纯化的目的是去除大分子杂质蛋白,最后经 SDS聚丙烯酰 胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 (5)电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状 的不同,使带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。 1下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤,其中正确的是 A蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等 4 步 B蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白 C对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等 D对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 2关于蛋白质提取的叙述中,不正确的是 A分离与纯化蛋白质之前首先要用适当的方法使蛋白质释放出来 B提取时要依据蛋白质的不同特性选择不同的溶剂 C蛋白质的粗提取物离心可除去一些小分子杂质 D蛋白质的粗制品可能是多种蛋白质的混合物 1 【答案】D 【解析】蛋白质的提取和分离一般可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等 4 步,A 项错误;一般 用哺乳动物如牛、羊的成熟的红细胞作为实验材料提取和分离血红蛋白,而不用鸡、蛙等动物的血液为 材料,B 项错误;对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析等, C 项错误;对蛋白质的纯度鉴定的方法中,使用最多的是 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,D 项正确。 2 【答案】C 【解析】分离纯化蛋白质之前要先让细胞中的蛋白质释放出来,故 A 正确;提取蛋白质时,要根据蛋白 质的不同特性选用不同的溶剂,故 B 正确;对蛋白质的粗提取物离心可以除去一些固体杂质,故 C 错误; 蛋白质的粗制品是多种蛋白质的混合物,故 D 正确。 5 5 月月 7 7 日日 DNADNA 和蛋白质技术和蛋白质技术 高考频度: 难易程度: 下列关于 DNA 和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中,错误的是 A提取哺乳动物红细胞中的 DNA 和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法 B采用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 的方法可去除蛋白质等杂质 C蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质 D血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化,DNA 则可采用电泳、盐析等方法纯化 【参考答案】D 【试题解析】DNA 和蛋白质存在于细胞内,用动物作材料提取 DNA 和蛋白质,都要用蒸馏水处理,使细胞 吸水胀破,释放出其中的蛋白质或 DNA,A 正确;DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同,因此采用 不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 的方法可去除蛋白质等杂质,B 正确;蛋白质纯化过程中,由于 小分子杂质可以通过透析袋,大分子蛋白质不能通过透析袋而留在袋内,因此可以采用透析法可去除溶液 中的小分子杂质,C 正确;凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种,蛋白质的纯化也可以采 用电泳、盐析等方法纯化,D 错误。 1以下对 DNA 和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析错误的是 A都要用猪血细胞来作实验材料 B在 DNA 的粗提取中可利用 DNA 在不同浓度盐溶液中的溶解度不同而析出 C在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的 DNA 或血红蛋白 D将析出的 DNA 溶解在 2mol/L 的 NaCl 溶液中,加入二苯胺试剂沸水浴后呈现蓝色 2下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是 ADNA 既溶于 2mol/L 的 NaCl 溶液也溶于蒸馏水 B向鸡血细胞液中加蒸馏水是为了释放出 DNA C向溶解 DNA 的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出 DNA D用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同 3某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行 DNA 粗提取和鉴定的

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