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文档简介
一、影响血液凝固的因素 二、红细胞渗透性溶血实验 生理学教研室 实验三 实验目的 观察某些因素对血液凝固的影响 异物(棉花、纱布、石蜡油) 温度(水浴、冰浴) 抗凝物(肝素、草酸钾) 熟悉红细胞溶血现象 实验原理:生理止血功能 血管损伤 血管内皮下组织暴露 血小板激活 粘附、聚集、释 放 血小板止血栓形成 (初步止血) 血凝块形成( 有效止血) 凝血系统激活 纤维蛋白形成 影响生理止血的因素 (1)影响凝血酶活性: 肝素 (2)物理因素: 接触面(纱布、石蜡油) 温度(37、冰浴) (3)化学因素: 抗凝剂:与Ca2+结合的草酸钾 实验步骤 1. 取7支试管,按表5-3处理试管,并在各试管上 做好标记。 2. 家兔耳缘静脉注射3戊巴比妥钠1.0mL/kg, 气管插管,一侧颈总动脉插管(动脉插管内 先充满0.2肝素生理盐水)。 3将动脉插管内血液及生理盐水放净,向试管 内各注入2mL左右新鲜兔血(试管上标号编 号和刻度),开始计时,并用拇指堵住管口 倒转2次,使血液与试管内容物相混。 4自血液注入试管后每隔60s将各试管轻轻倾斜 一次(倾斜45度角),观察其中的血液是否 已凝固,发现其中的血液已呈凝胶状而不再 流动时记录其时间。如超过30分钟血液仍未 凝则视为“不凝”。 5以第一管的凝血时间为对照,比较其余各管 的凝血时间有何变化。 6最后向第7管内加入10%氯化钙溶液1滴,观 察管内血液是否凝固。 实验步骤 表5-3 影响血液凝固的理化因素实验结果 序号实验条件凝血时间(min) 1干燥空白试管4分30秒 2加纱布少许4分钟 3用石蜡油润滑4分30秒 437水浴3分50秒 50冰浴14分钟 6肝素100ul不凝 7草酸钾100ul不凝,加CaCl2后10 分钟 2. 比较不同处理因素对血液凝固的影响, 结合思考题(p91)分析原因,写实验报 告。 1. 填写表5-3 实验后处理 1.实验前试管上做好实验标记、刻度标记。做好 分工(放血、接血、计相互配合好)。 2.取血前,要先将动脉插管内的血液及生理盐水 放净,再取新鲜血液进行后续试验。 3.血液加入试管后立即混匀、计时。 4.判定凝血的标准以试管倾斜45度,试管内血液 不流动为准,仔细观察结果,记录凝血时间。 5.各试管应保持基本条件(试管口径、血量、温 度)一致。不要人为地手握加温或反复摇动, 以防外部条件影响实验结果。 注意事项 红细胞渗透溶血实验 家兔动脉血2ml,按表5-4滴入红细胞悬 液1-2滴,轻轻摇匀 1 10 10支不同浓度NaCl溶液试管(低 高) 静置30分钟 实验步骤 教师示教 完全溶血 管内液体完全红色透明 部分溶血 上层红色透明 下层红色不透明(混浊) 不溶血 上层浅黄色或无色透明 下层红色不透明 记录刚开始出现部分溶血及完全溶血时NaCl溶液浓度 结果观察 下次实验: 家兔呼吸运动的调节 预习要点: 1. 掌握呼吸运动的实验方法,各种理化因素 对呼吸运动的影响及其原理。 2. 熟悉Medlab生物信号采集处理系统的实验 记录和实验结果处理方法。 预习要求 PF3 Ca2+ V 内源性凝血外源性凝血 XII XIIa 接触异物 XI XIa IX IXa PF3 Ca2+ VIII X Xa Ca2+ 组织损伤释放 X 凝血酶原激活物形成凝血酶形成 纤维蛋白形成 II IIa 纤维蛋白原 纤维蛋白 稳定的纤维蛋
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