两种中药方剂治疗系统性红斑狼疮的免疫机制的初步研究.pdf

重庆 医学 2 0 1 0年 1 2月第 3 9卷第 2 3期 论 著 两种 中药方剂治疗 系统性红斑狼疮的免疫机制的初步研究 蒋震 ， 刁庆 春 ( 重庆 市 第一人 民医 院皮肤科4 0 0 0 1 1 ) 3 2 05 摘 要 ： 目的 探 讨 中药方 1和 中药方 2对 系统性红 斑狼 疮( s l e ) 患者 外周血 单个核 ( p b mc ) 的 i f n 一 7 、 i l 一 6 、 i l - i o 及 血 清 可溶性凋 亡相 关因子 ( s f a s ) 水平 的影 响及 意义 。方 法 根 据血 清 药珲 学制备舍 药 大鼠 的血 清， 用密度 离心 法分 离 s l e患者 p b mc， 在 药物干预 下培 养 4 8 h ， 用 e l i s a法检测上清液 中 i f n一 7 、 i i 一 6 、 i l 一 1 0 、 s f a s 水平 。结果 与空白对照组比较 ， 中药方 1组 p b mc的 i l 一 1 o水平升 高， s f a s 水平 降低 。中药方 2组 p b mc的各指标无差异 。结论 中药方 1能使 体外培养的 s l e进行期 患 者 p bmc的 i l- i o升 高 ， s fa s降低 。 关键词 ： 中药方剂 ； 系统性红斑狼疮 ； 外周血单 个核 细胞 ； 7干扰素 ； 白介 素 6 ； 白介素 i 0 ； 可溶性 f a s d o i ： 1 0 3 9 6 9 j i s s n 1 6 7 1 8 3 4 8 2 0 1 0 2 3 0 2 2 中图分类号 ： r2 8 9 ； r 5 9 3 2 4 1 文献标识码 ： a 文章编号 ： 1 6 7 1 8 3 4 8 ( 2 0 1 0 ) 2 3 3 2 0 5 0 2 pr e l i m i na r y s t u d y o n i m m u no l o g i c m e c ha n i s m o f t wo ki n ds o f t r a d i t i o na l c h i n e s e m e di c i n e t r e a t m e nt f or pa t i e nt s wi t h s le j l ang zh e n， di a0一qi n g c h u n ( de p a r t me n t o fde r ma t o l o g y， th efi r s t pe o pl e s ho s pi t a l o fc h o n g q i n g， ch o n g q i n g， 4 0 0 0 1 1 ， c h i n a) ab s t r a c t ： ob j e c t i v e to i n v e s t i g a t e t h e i n f l u e n c e o f t wo l u p u s r e c i p e s t o i fn一 ， i l 一 6 ， i l 一 1 0 a n d s f a s i n p bmc o f p a t i e n t s wi t h sle m e t h o ds pbm c o f p a t i e nt s wi t h sle we r e i s ol a t e d an d i nc u ba t e d f or 4 8 h our s wi t h t h e s e r um wh i c h we r e ma d e by t wo d i f f e r e nt l upu s r e c i p es o f t r a di t i ona l c h i n e s e me di c i ne by s e r u m p ha r m a c ol og y th e i fn一 丫、 i l一 6、 i l一 1 0、 s fa s s e c r e t i on we r e me a s ur e d i n t h e s u p e r n a t a n t b y eli s a re s u l t s by c o mp a r i n g t h e l e v e l o f c o n t r o l g r o u p， t h e l e v e l o f i l 一 1 0 i n l u p u s r e c i p e 1 g r o u p a r e h i g h e r ， t h e l e v e l o f s fa s i n l u p u s r e c i p e 1 g r o u p a r e l o we r by c o mp a r i n g t h e l e v e l o f c o n t r o l g r o u p ， t h e l e v e l o f i fn一 ， i l 一 6 ， i l 一 1 0 a n d s f a s i n l up us r e c i pe 2 a r e no d i f f e r e n c e s co nc l u s i o n lup us r e c i pe 1 c a n pr ob ab l y i n c r e a s e pr od uc t i on of i l一 1 0， a n d de c r e a s e pr od uc t i o n of s fa s i n pbm c ke y wor ds ： t r a di t i on a l c hi ne s e me di c i ne； sle； pbm c； i fn一 ； i l- 6； i l- 1 0； s fa s 系统性红斑狼疮 ( s l e ) 是多 因素性 自身免疫性 疾病 ， 进行 免疫学方面 的治疗研 究是 目前 的重 要研究 方 向。多数学 者认 为淋 巴细 胞凋 亡失 衡是 s l e发病 的核 心 。本 研究 针对 s l e 进行期和缓解期提 出两种 中药 方剂 ， 研 究两 种方剂 对 s l e患 者外周血单个核细胞 ( p b mc ) 部分 凋亡相关 因子 的影 响 ， 初 步 探讨 中医药治疗 s l e的免疫学机制 。 1资料与方法 1 1 一般资料选择本 院门诊及 住院部 收治 的 s l e患者 ， 诊 断经临床及辅助检查证 实 ， 符合美 国风湿 病学会 1 9 9 7年制定 的 s l e诊 断标准_ 1 。均 已使用 糖皮 质激 素 ， 但 未使 用免 疫抑 制剂 。按 s l e d ai 评分标准口 ： 9 分 为进行期 。进 行期患 者 年龄 1 7 3 9岁 ， 病 程 2个月至 1 5年 ， 予泼尼松 l 5 6 0 mg d 。 缓 解 期 患 者 年 龄 1 5 4 9岁 ， 病 程 1 4 d至 2 o年 ， 予 泼 尼 松 5 4 0 m g d ， 其 他资料见表 1 。 1 2实验动物和试剂 1 5月龄 s d雄性 大 鼠 3 o只 ( 重 庆大 坪医院动物实验中心) ， 体 质量 ( 2 0 0 l o ) g 。淋 巴细胞分 离液 ( 天津 灏洋生物公司) 及人 i f n 一 7 、 i l - 6 、 i l 一 1 0 、 血 清可溶性 凋亡 相关 因子 ( s f a s ) e l i s a试剂盒( 南京凯 基生物公司) 等 。 1 3方 法 1 3 1 中药制备 中药方 l ( 生 药共 计 1 9 5 g ) ： 水 牛角 、 黄 芩 、 生地 、 丹皮 、 紫草 、 白花蛇 舌草 、 半枝 莲 、 忍 冬藤 、 防风 、 秦艽 、 威 灵仙 、 鸡血藤 、 甘草 。中药方 2 ( 生药共计 2 7 0 g ) ： 熟 地黄 、 山茱 萸 、 山药、 北沙参 、 麦 冬 、 玄 参 、 生 地 黄、 双花 、 丹皮 、 丹 参 、 益母 草 、 丝瓜 络 、 菟丝子 、 白芍 、 党参 、 甘 草 。两组 方剂 各 2副 ， 煎 煮 浓缩至 2 0 0 ml， 4保 存备用。 1 3 2 含药动 物血 清制备将 3 o只大 鼠随机分 为 5组( 空 白 对照组 1 o只， 其 他各 组 5只) ， 每 天灌 胃 1次 ， 中药 方 1组 予 2 1 4 2 g k g ( 按生药重量计 算 ) ， 中药 方 2组予 2 8 3 5 g k g ， 泼 尼松 1组予 1 2 o o mg k g ， 泼 尼松 2组 予 6 0 0 mg k g ， 空 白对 照组予生理盐水 2 5 0 ml， 均 用双蒸水调整至 2 5 0 ml 。灌 胃 7 d后 采 血 ， 分 离 血 清 ， 一 2 o冻 存 。 1 3 3 分 离培 养 p b mc取 s l e患者晨 起静 脉血 4 ml， 用 密度 离心法分离 p b mc。用 r p mi 1 6 4 o培养 液调 整 p b mc至 1 1 0 ml。每组取细胞悬液 1 ml， 加入 0 1 ml对应 的含药 大 鼠血清 ， 培养 4 8 h 。将培养物离心 ， 取上清液用 e l i s a法检 测 i f n 一 、 i l6 、 i l _ 1 0 、 s f a s 等 。 表 1 s l e患者一般资料 * 基金项 目： 重庆市卫生局课题( 2 2 0 4 一 b - 1 6 ， 2 0 0 7 1 7 ) 。 通讯作者 ， e ma i l ：q c h d i a o v i p s i n a c o rn。 3 2 06 表 2 s i e患者各检测指标水平 ( p g ml) 重庆医学 2 0 1 0年 1 2月第 3 9卷第 2 3 期 ：p (o 0 5 ， 与泼尼松 1 组 比较 ； ： p0 0 5 ， 与空 白对照组比较。 1 4 统计学处 理 应 用 s p s s 1 3 0统 计软 件进 行数 据分 析 ， 配伍设计采用 检验 ， 以 p 0 0 5 为差异有统计学意义 。 2结 果 见 表 2 。 3讨 论 中医认 为 s l e进行期 属 于热毒炽 盛 、 风湿 内蕴证 。症 见 自觉 内热 ， 面部蝴蝶形红斑 ， 光敏感 ， 或 面红充血 ， 或暗红斑 点 ， 口渴多饮并喜冷饮 ， 时有咽干 咽痛 、 目赤眼 涩、 关节 疼痛 、 心烦 急躁 、 少眠 多梦等 。中药 方 1中水 牛角为 清热凉血 的要药 ， 辅 之以生地黄凉血 ， 合用丹皮凉血而不 留淤 ； 紫草凉血 活血 ， 合用 清解血分毒热的 白花蛇舌 草、 半 枝莲清热 解毒 ； 防风 、 秦艽 、 威 灵仙祛 风除湿 ； 黄芩解毒清肺热 ， 泄 皮毛之邪 ； 忍冬藤清热解毒 通络 ， 鸡血藤养血通络 ， 二 者合 用祛 邪而不伤正 ； 甘草解毒调和 众药 。药理学认 为方 中药 物 具有 兴 奋垂 体一 肾上腺 皮 质 系统 ( 水牛角) ， 对抗糖皮质激 素对垂体一 肾上腺 的抑制 ( 生地) ， 升高 外周 t淋巴细胞 、 巨噬 细胞 、 n k 细胞 ( 水 牛角 、 黄芩 、 生地 黄、 白花蛇草、 鸡血藤 、 丹皮 、 甘草 ) ， 增 强 i ak淋 巴因子活化 杀伤 细胞( 鸡血藤 ) ， 抑制体液免疫 ( 甘草) ， 抑制胸 腺增 生( 忍冬藤 ) ， 抗炎 、 抗过敏 ( 紫草 、 防风 、 秦艽) 等作用 。 s l e缓解期 属于肝肾 阴虚 、 气 虚血淤证 。症 见时有腰 酸 ， 面部红斑 ， 头晕 ， 五 心烦热 ， 或 长期低 热 ， 自汗 盗汗 。中药方 2 用北沙参 、 麦冬 、 玄参 、 生地黄 、 熟地黄滋阴养血 ， 党参 、 山药 、 菟 丝子 、 山茱萸健 脾补 肾 ， 使 阴血生 化有 源 ； 久病 成 淤 ， 丹参 、 丹 皮 、 益母草养血活血 ， 兼使众 药滋 而不腻 ； 双花 、 丝瓜络合 用解 毒通络 ； 甘草健脾和 中 ， 兼 能调和众 药 ， 共 奏滋 阴养血 、 健 脾补 肾、 解 毒通 络之功效 。药理学认 为方 中药物有 提高体液 免疫 、 降低细胞免疫 ( 北沙参 、 山茱萸) ， 增强细胞免疫 、 抑制体液免疫 ( 甘草 、 生地) ， 抑制多种免疫细胞因子产生( 丹参 ) ， 促进细 胞因 子 的产生( 双花 ) ， 提 高巨噬细胞功能( 北沙参 、 熟地黄 ) ， 增 强非 特异免疫( 北沙参 、 熟地黄 、 双 花、 菟丝子) ， 抑制 l ak( 山茱萸) 等作用 。 i f n 一 与 s l e活动 性 的相关 性报 道 尚存 在争论 ， 曾 惠琼 等嘲认为 i f n 一 与 s l e活动性指数 ( s i e d ai ) 评分 和 s l e疾 病 活动性呈 正相关 。其他研究 则认 为只有少部分 的 s l e患者 i f n 一 升高， 其他患者的 i f n 一 无变化， 这可能与 i f n 抗体 存在及诱导基 因的多态性有关 _ 4 。本研究发现 ， 中药方 1 、 2组 i f n 一 与对照组之 间均无 差异 。由于机体 对 i f n 一 7存在 多靶 点调节作用 ， 而本研究 只是体外 分离 培养了 p b mc， 因此 还不 能确定中药方 1 、 2对 i f n 一 是否有调节作 用 。但 i f n 一 7的升 高与 s l e肾脏损 害密切 相关 ， 中药方 1 、 2均 未使 i f n一 7升 高 ， 推n-者均不会加重 s l e肾脏的损害 。 i l 一 6 是一种 b细胞刺激 因子 ， 可 以刺激 p b mc产生抗 d s d na， 抗 d s dn a又刺激 p b mc分泌 i l - 6 ， 两者形 成一种 恶性 循 环 ， 导致病情进展迅 速 ， 与疾病 活动度呈 正相关 。本 研究 发现 ， 进 行期 和缓解 期泼 尼松 组 i l 一 6均 高于对 照组 ， 与 伍丽 等 的研究结果 不 同。有研 究证 明 ， i l6升高 与幽 门螺 杆菌 感染 、 消化道溃疡 、 高血糖 、 骨质疏 松均有 密切联 系， 这些 恰好 也是糖皮质激素的不 良反 应 ， 本实验 发现 的 i d6异常 升高是 否与糖皮质激 素 的不 良反应 有关 ， 值 得进一 步探 讨 。中药方 1 、 2 组 的 i l 一 6与对 照无差异 ， 提示 中药方 1 、 2 不 易产生相应 的 不 良反 应 。 i l - 1 0同时具有抗炎和致 炎作用 ， 抑制参 与炎症过 程的大 多数介质 的生成 ， 抑制细胞免疫过程 ， 抑制单核巨噬细胞 ， 减轻 慢性炎症过程 中正常组织 的破 坏 。s l e患者 的 i d1 0高于正 常人 ， y i n等 认 为 i l 一 1 o 通 过下 调致病性 th l 类 因子的反应 性对淋 巴细胞起保 护作用 ， 王静等 发现在 治疗 s l e的同时 会使 i d1 0升高 ， 提示 i l l o可能具有有益作用 。有研究发现 ， 用抗 i l l o单克隆抗体治疗 n z b wf 1小 鼠( 自发性 肾小球 肾 炎小 鼠) ， 出生后立 即给予治疗对肾有保护作用 ， 而 出生 4周再 进行治 疗则加重 病情 ， 提示在疾 病 的不 同时期 ， i l - 1 0的作 用可能完全相反 。本研究发现 ， 泼 尼松 l 组大于 中药方 1 组大 于空 白对 照组 ， 推测 i d1 0可能是作 为 s l e患者体内的“ 有益” 因子反应性升高 ， 在进行期 主要发 挥其 抗炎 、 保护机体的作用 。 中药方 1和激素均可通过提高 i l 一 1 o抑制 体内炎症反应 ， 而 中 药方 1 组患者 i d1 0高于泼尼松 1组 ， 提示 中药方 1 抑制进行 期炎症反应 的作用强 于泼尼松 。中药方 2组及泼 尼松 2组对 缓解期 i i ， 1 o 无 明显调节作 用。 s l e患者 f a s 基因缺失 6 3个碱 基 ， 形成 f a s 蛋 白的可 溶 性形式 s f a s 。s f a s 与 f a s 竞争结合 f a s l ， 但不转运凋亡信号， 抑制 f a s f a s l介导 的细 胞凋亡 ， 产生 自身抗 体和释放炎症 细 胞 因子 。有研 究 显 示 ， s l e血 中 s f a s升 高 ， 与 疾 病 活 动性 、 s i e d ai 等呈正相关 ， 且 多为进 行期_ 1 。本研究 发现 ， 中药 方 1 组 s f a s 较空 白对照组降低 ， 中药方 2 组 、 泼尼松 2 组 与空 白对 照无 明显差异 ， 从侧面反映 s f a s与进行期 关系更为密切 ， 推测 中药 方 1能降低 s f a s ， 减少 自身抗体 和炎症 因子的产生 ， 对稳 定进 行期 病情 起到一定 作用。 中药 方 1以清热、 祛风湿 为主 ， 药理学证 明中药方 1大多 数药 物均有增强 细 胞免 疫 ， 特 别是 增强 t 细胞 免 疫 的作 用。 中药方 2以养 阴 、 滋 补为主 ， 药理学证 明其部分药物 均有增强 体液免疫 、 抑制细胞免疫作用 ， 另一部分也有增强细胞免疫 、 抑 制体液免疫作用 。本研究 发现 中药方 1对 s l e进行期 的 i l _ 1 0 、 s f a s 有影响 ， 而 中药 方 2各项 指标 均无 差异 ， 从 某方 面证 明了中 、 西 医的相通之处 ， 推测在 s l e进行期 应增强 t细胞功 能 ， 抑 制体 液免疫 ， 抑 制组 织炎症 ； s l e缓 解期应 维持免 疫 的 平衡 ， 抑制组织 炎症 。 综上所述 ， 本研 究推测 中药方 1通过 升高 s l e进 行期患 者体外培养 p b mc i d1 0 ， 降低 s f a s 水 平 ， 控制 s l e进行期并 发的炎症反应 ， 对机体起 到保护作用 。中药方 2 对缓解期患者 体外培养 p b mc暂束发现 明确调节作用 。 参考文献 ： e 1 3 ho c h b e r g mc up d a t i n g t h e ame r i c a n c o l l e g e o f r h e u ma t o l o g y r e v i s e d c r i t e r i a f o r t h e c l a s s i f i c a t i o n o f s l e - j 3 a r t h r i t i s r h e u m， 1 9 9 7 ， 4 0 ( 9 ) ： 1 7 2 5 ( 下转第 3 2 0 9页) 重庆医学 2 0 1 0年 1 2月第 3 9 卷 第 2 3期 合蛋 白： 研究发现 k c衰老 的基 因表 达改变 明显 ， 首 先 ， g蛋 白 亚单位 的活性和构成有变化 ， 然后 通过 p k c、 p t k等信号传导 途径 ， 最后 影响 k c的增殖 和分化 。本研 究结 果显示 ， 随着年 龄 的增长 kc中 g蛋 白逐渐高表达 。 3 3 参与 细胞骨架 蛋 白的构建a n n e x i n a2 ： 其 参与 细胞骨 架 的胞 内信号传导 ， 故在 维持 正常上皮细胞 的形态及肿瘤发生 中起着重要 的作用 。本 研究 结果 表 明随 着年 龄 的增长 a n n e x i n a2的表达降低 ， 与 以往 的研 究结 果一 致 。ac t b： 本研 究发现在 同一年 龄段 中非 曝光 部位 高表 达 ， 而 曝光 部位 低表 达 。p r o v o s t 等 证实细胞骨架 与细 胞 的收缩 有关 ， 研究 显示 uva照射导致 了肌动蛋 白的解 聚， 细胞 骨架的变形 。在长期 的 uva暴露 中最终会导致细胞功能 的衰竭 ， 提示与 光老化有 关 。并可能最终导致表皮肿瘤 的形成 。 3 4 调控细胞 的生长 、 增殖 、 分化谷 胱甘肽 s 一 转移酶 ( g l u t a t h i o n e s t r a n s f e r a s e s ， gs ts ) ： gs ta2在曝光 部位皮 肤 的表达 量较低 ， 可能与老化 的表皮 自我保 护能 力的降 低 、 氧化和 抗氧 化的失衡 密切 相关 。uv b照射可导 致 kc产 生大量 的活 性氧 及 自由基 ， 损伤细胞的多种成分 ， 引起 细胞的凋亡 、 皮肤肿 瘤的 产 生 。 3 5 参 与细胞的凋亡、 免疫调控p 2 1 ( c d knl a) ： 有研究 结 果表 明， uvb照射正常人 kc后 ， p 2 1蛋 白表达增 强 。本研 究 结果显示 p 2 1 既随 年龄增 长 高表 达 ， 也在 同一 年 龄段 曝光 组 高表 达。因此 ， p 2 1与 自然老化及紫外线 照射后 引起 的光 老化 可能 都 密 切 相 关 。hs p ： 本 研 究 检 测 到 两 种hs p 2 7和 hs p 7 0 ， 都在曝光部 位 高表 达 。j e a n等l 8 用 e d na 芯 片检 测 发现在给予单一剂 量 uv a 后黑 素细 胞 的 3个编 码应 激反应 蛋 白( hs p 7 0 、 hs p 4 0 、 hs p 8 6 ) 的基因表达增加 ， 表 明单一剂 量 uva 即 可 诱 导 黑 素 细 胞 多 种 hs p 基 因 表 达 增 加 ， 其 中 hs p 7 0表现最为 明显且水平持续增 高。与本研究 结果一致 。 本研究建立 了人表皮 组织 的双 向电泳技术 ， 获 得 了清晰 、 重复性高的双 向电泳 图谱 ， 检 测 自然成 长人 不 同年 龄段 、 不 同 部位 kc存在差异表达 的蛋 白； 经分 析 和鉴定 的 2 1种 蛋 白质 与皮肤的 自然老化和( 或 ) 光老化关系密切 ， 为进一步研究表皮 细胞 在光老化过程 中的 作用及 分子机 制奠定基 础 。但所 鉴定 3 2 09 出的差异蛋 白在皮肤 自然老 化和 ( 或 ) 光 老化 中的确切 功能有 待进 一步验证 。 参考文献 ： e l i j e n k i n s g mo l e c u l a r me c h a n i s ms o f s k i n a g e i n g j me c h agi ng de v， 2 002， 1 23： 801 2 e 3 4 5 6 e 7 8 李 艮平 ， 魏莲枝 ， 周 建荣 高 低分 化喉 癌组织 的二 维 电泳 图谱 的建立 及质谱分析e j 重庆 医学 ， 2 0 0 8 ， 3 7 ( 2 ) ： 1 4 9 gar t e l a ， ra dha k r i s hn a n s los t i n t r a ns c r i pt i o n： p2 1 r e p r e s s i o n ， me c h a n i s ms ， a n d c o n s e q u e n c e s j c a n c e r re s ， 2 0 0 5 ， 6 5 ( 1 0 )： 3 9 8 0 s a n o t， ku me t， f u i i mu r a t， e t a 1 l o n g t e r m a l t e r a t i o n i n t h e e x p r e s s i o n o f k e r a t i n s 6 a n d 1 6 i n t h e e p i d e r mi s o f mi c e a f t e r c h r o n i c uvb e x p o s u r e j ar c h d e r ma t o l re s ， 2 0 0 9， 3 0 1 ( 3 ) ： 2 2 7 pa we l e t z c， or ns t e i n d， rot h m ， e t a 1 los s o f a nne x i n 1 c o r r e l a t e s wi t h e a r l y o ns e t o f t umo r i ge n e s i s i n e s o pha ge a l a n d p r o s t a t e c a r c i n o ma j- j c a n c e r re s ， 2 0 0 0 ， 6 0( 2 2 ) ： 6 29 3， pr o v os t n ， m or e a u m ， le t ur q ue a， e t a1 ul t r a vi ol e t a r a d i a t i o n t r a n s i e n t l y d i s r u p t s g a p j u n c t i o n a l c o mmu n i c a t i o n i n h u ma n k e r a t i n o c y t e s j am j p h y s i o l c e l l p h y s i o l ， 2 00 3， 28 4： c51 b l a c k a， gr a y j ， s h a k a r j i a n m ， e t a 1 di s t i n c t e f f e c t s o f u l t r a v i o l e t b l i g h t o n a n t i o x i d a n t e x p r e s s i o n i n u n d i ffe r e n t i a t e d a n d d i f f e r e n t i a t e d mo u s e k e r a t i n o c y t e s j c a r c i n o g e n e s i s ， 2 0 0 8 ， 2 9 ( 1 ) ： 2 1 9 j e a n s， bi d e a u c， be l l o n l， e t a 1 th e e x p r e s s i o n o f g e n e s i n d u c e d i n me l a n o c y t e s b y e x p o s u r e t o 3 6 5 n m uva： s t udy by c dna a r r a ys a nd r e al ，t i m e qu a nt i t a t i v e rt， p c r j b i o c h i m b i o p h y s ac t a ， 2 0 0 1 ， 1 5 2 2 ： 8 9 ( 收稿 日期 ： 2 0 1 0 0 6 1 3 修 回 日期 ： 2 0 1 0 0 7 1 3 ) ( 上接第 3 2 0 6页) 2 曾惠琼 ， 叶志中 ， 汪迅 ， 等 s l e患者外周 血 i f n t水平与 3 4 5 6 7 疾病活动 性 的相 关 研究 j 现 代免 疫 学 杂 志 ， 2 0 0 7 ， 2 7 (1 )： 6 9 bomb a r d i e r c， gl a d ma n dd ， ur o wi t z m b， e t a 1 de r i v a t i o n o f t he s le： a d i s e as e a c t i v i t y i nd e x f o r l u pu s p at i e n t s the c o mmi t t e e o n p r o g n o s i s s t u d i e s i n s l e j a r t h r i t i s rhe u m ， 1 99 2， 3 5( 6)： 6 30 ba e c h l e r ec， ba t l i wa l l a fm ， ka r y pi s g，e t a 1 i nt e r f e r on i n d u c i b l e g e n e e x