胆固醇不仅是食品中重要的一种营养物质.doc

胆固醇不仅是食品中重要的一种营养物质，还与食品感观品质的变坏和有毒物质的出现密切相关，因为以胆固醇为底物氧化产生突变物，致癌物和细胞毒素的作用已经被证明13。此外，它还与家畜的生长4、繁殖5等经济性状相关，而研究胆固醇与它们的关系，首要的前提条件就是能够准确地测定出胆固醇的含量。经典的测定胆固醇的方法是Liebermann- Burchard显色反应或Zlatkis 法6，另一个常用的方法是利用酶法来通过胆固醇的氧化来测定。但这些方法都是不严格的, 会受到干扰物质对胆固醇准确测定的影响。为了克服这个问题，气相色谱技术目前更适用于胆固醇的分析7。胆固醇是肉中非皂化脂部分的组分。利用色谱分析有2 种可以选择的预处理方法：第1 种是先提取总脂后皂化，然后再提取非皂化物；第2 种是直接皂化样品然后再提取非皂化的组分。目前我国国标规定测肉类中的胆固醇是用第1 种方法，但在实际的操作中, 该方法存在操作繁琐、有机溶剂消耗大，样品的测定结果回收率低和重复性差的缺点。相比之下第2 种方法则具有简便、准确，用于测定的样品量需求少的优点。但在实验研究中发现，测定不同组织中胆固醇的含量用一成不变的预处理方法是不可行的，因为其回收率和重复性会存在很大的差异，所以针对不同的组织测定方法应有所变化。此外，目前文献报道的预处理方法常是将提取液蒸干后再溶解上机，其操作复杂，影响样品的回收率和重复性，所以本研究的目的是选取人们最喜食的猪背最长肌、脂含量高难于皂化的脂肪组织和胆固醇含量最高的肝脏组织为代表, 发展一套能准确测定不同组织胆固醇含量同时又兼顾降低成本、简便易行的方法。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 样本实验用槐猪组织样（肝脏、脂肪、肌肉）采自福建省上杭县绿琪槐猪育种场，取样后立即放入液氮中保存，直到胆固醇测定。1.1.2 试剂5- 胆甾烷、丁化羟基苯甲醚（BHA）购于Sigma。胆固醇、氢氧化钾、氯化钠、异辛烷、正己烷、石油醚、乙醇都购于北京化学试剂公司为化学纯。1.1.3 试液配置内标溶液：无水乙醇配置的终浓度为200 mg/L 的5- 胆甾烷溶液。加标液：无水乙醇配置的终浓度分别为100、150、200 mg/L 的胆固醇溶液。萃取液：分别配制含0.01%(W/V)BHA 的异辛烷、正己烷和石油醚溶液。皂化液：无水乙醇（含0.125% 的BHA）与蒸馏水（5544）以此比例混合均匀，用混合液做溶剂再分别配11.5%、17.25%和23%（W/V）的氢氧化钾溶液。1.1.4 主要仪器和设备恒温水浴锅；氮气吹干仪；涡旋振荡器；移液枪；HP 6890 气相色谱仪。1.2 方法1.2.1 色谱条件HP 6890 气相色谱仪（AgilentTechnologies,Inc.）,FID 检测器，进样口温度300，Ag4ilent 19091J- 413 HP- 5 柱，30.0 m320 m0.25 m，柱温250，载气流速5 mL/min，进样量1.0 L,分流进样，分流比201。1.2.2 标准溶液的配制配制1 mg/mL 的胆固醇原液和1 mg/mL 的5- 胆甾烷原液，分别取0.25、0.5、1、1.5、2、2.5 mL 的胆固醇原液和2 mL 的5- 胆甾烷原液于10 mL 的容量瓶中定容，使胆固醇的最终浓度分别为25、50、100、150、200 mg/L 和250 mg/L,5- 胆甾烷的终浓度为200 mg/L。1.2.3 直接皂化及提取称取肝脏、脂肪、肌肉组织分别0.15、0.3 g 和1 g 装入带有聚四氟乙烯内垫的螺纹帽耐热玻璃试管中。加入1 mL 的内标溶液和7.3 mL 的皂化液。然后将试管内充溢氮气，使液体上方的空气排除。将试管置于80的水浴中皂化，每隔5 min 拿起剧烈振荡30 s 后放回，直到残留物完全消失，溶液澄清。随后立即置于冰上冷却后，加入适量的萃取液，涡旋振荡2 min，静置，直到观察到分离相，用移液枪将上层有机相吸出，如此重复3次，并将3 次吸取的有机相合并到一个干净的试管中，置于氮气吹干机下，干燥浓缩到适当的体积，移入上机小瓶用于气相色谱仪分析。1.2.4 定量方法（内标法） 标准曲线的制作依次取上述不同浓度的标准溶液，上机。以胆固醇/ 胆甾烷量比为横坐标x，胆固醇/ 胆甾烷峰面积比为纵坐标y，绘制标准曲线。1.2.5 计算样品中胆固醇的含量根据标准曲线拟和的线性回归方程计算样品中胆固醇的含量（mg/100 g）。2 结果与讨论2.1 样品皂化液与皂化时间的选择对于脂肪含量较少的肌肉组织用含11.5KOH 的皂化液，皂化15 min 即可; 而对于脂肪组织此浓度的皂化液无法皂化完全，用17.25KOH 皂化液需要35 min,而用23KOH 皂化液只需15 min 即可，并且用不同浓度皂化液处理后，对胆固醇的回收率和重复性无明显影响，所以对于含脂丰富的组织建议用高浓度的皂化液处理。2.2 样品萃取液选择通常我们可以采用的异辛烷、正己烷、石油醚、乙醚等作为萃取剂，但乙醚挥发性太大，实验使用不安全，所以比较了异辛烷、正己烷、石油醚的萃取效果，发现对结果影响不大，但考虑到异辛烷、正己烷成本较高，所以选用较为便宜的石油醚。2.3 萃取液用量的确定肌肉组织每次加3 mL 的萃取液，重复萃取3 次就能够达到很高的回收率，但是对于脂肪和肝脏需要加大萃取液的用量，本研究每次加5 mL 重复萃取了3 次回收效果较理想,所以根据自己实验样本的具体情况调整萃取液的用量。2.4 标准回归方程以胆固醇浓度分别为25、50、100、150、200 mg/L 和250 mg/L 和胆甾烷浓度为200 mg/L 的标准溶液重复上样（重复3 次），绘制标准曲线，回归方程为Y=0.6782X+0.0266, 相关系数R2=0.9994,说明呈线性回归，可以用于定量分析。2.5 准确度实验对3 种组织进行加标回收实验：第1 组加入1 mL 的加标液和适量的样品后进行1.2.3 步骤；第2 组加入1 mL 的加标液不加样品进行1.2.3 的步骤，结果见表1（每个浓度做4 个重复），回收率在92.58%104.68%之间，准确度较高。回收率结果表明，本方法尤其适用于肌肉组织，相反脂肪组织的回收率较低，所以对于脂肪组织可以增加萃取液的用量以达到更为理想的回收率。表1 样品加标回收率实验结果%加标平均值200 mg/L 400 mg/L 600 mg/L不加样品回收率101.5 101.3 103.0 101.9CV 3.89 1.35 0.72 1.99肌肉回收率100.56 105.74 107.73 104.68CV 5.12 4.87 3.88 4.62脂肪回收率92.37 94.12 93.75 93.41CV 5.26 3.92 4.77 4.65肝脏回收率87.11 92.53 98.12 92.58CV 7.61 6.33 3.26 5.732.6 精确度实验取3 种组织的样品，按本方法进行测定，每个组织做5 个重复（见表2）。结果表明肝脏胆固醇含量测定值的变异系数仅为1.85%，肌肉为4.89%,脂肪为5.23%,说明此方法的精密度较高，重复性好。3 结论本文对毛细血管气相色谱法测定猪不同组织中胆固醇含量的方法进行了优化，建立了一套快速、简便、准确度和精密度都较高的测定方法，适用于实验和生产中组织胆固醇含量的测定。测定胆汁胆固醇和磷脂的简捷方法南京铁道医学院附属医院外科( 21 0 0 0 9) 汤文浩上海瑞金医院外科正确测定胆汁胆固醇和磷脂含量是胆石研究中的重要手段。我们用醇醚溶剂对胆汁进行提取, 然后分别用酶法和相蓝法测定提取液中的胆固醇和磷脂含量。方法简便、实用, 提供参考。一、试剂( 1) 醇醚溶剂无水乙醇与乙醚按3 : 1 混合. (2) 总胆固醇酶法试剂盒, 上海化学试剂研究所提供。( 3) 磷脂消化剂将硫酸(A R ) 28 m l 徐徐滴加入蒸馏水50 ml 中, 混匀, 冷却, 加入高氯酸(A R , 7 0 肠) 6 . sm l , 最后补足至i o o m l。( 4 ) 显色剂钥酸钱( A R ) 0 . 25 9 , 无水醋酸钠(A R ) 0 . 829 溶于蒸馏水至10 om l。临用时取该液9 份与新配制的10 %抗坏血酸( A R )1 份混合而成。(5 ) 胆固醇标准液Zm g / m l。( 6 ) 磷标准液0 . lm g / m l。二、方法先提取胆汁中的胆固醉和磷脂。吸取胆汁20rn l 于具塞离心管中, 加醇醚溶剂4 m l, 混匀lm in , 37 ,C 水浴中温育15 m i n , 30 0 o r p m 离心sm in . 取试管A , B Z 支各加上清lm l, 85 蒸干, 冷却, 分别用于测定胆固醇和磷脂.1 . 胆汁胆固醇测定另取一试管加入胆固醇标准液( Zm g / m l) 20 拌l, 连同待测管(A ) 各加l , 4 稀释的酶试剂1. sm l, 37 水浴温育15 mi n , 酶试剂空白管校零, s o o n m 比色。计算: 胆汁胆固醇(m m ol / L )一瓮火0.0 2 x Z 火器磊碧号备2. 胆汁磷脂磷测定另取一试管加入磷标准液( 0 . lm g / m l) 50 拜l, 连同待测管( B ) 各加磷脂消化剂0 . 2m l, 将试管置于l0 0 0w 电炉上消化10 15 m in , 见消化管中液体由白变棕黑色, 然后冒烟最后变成无色透明。冷却, 各加显色剂Zml , 混匀, 置6 0 水浴l o m in , 取出, 加水sm l 混匀, 7 0 0 n m 比色,空白校零。计算: 胆汁磷脂磷( m m ol / L )一瓮又。 。s x 。 1 又浸斋吴踢三、结果( 1) 线性: 胆固醇线性范围4 8 0 科g ; 磷2 1 0 拌g 。( 2) 回收率胆固醇9 2. 7 5 10 7 . 45% ( 平均1 0 0 . 36 土5. 38 环) ; 磷9 2. 0 7 %111 1 肠( 10 1 58 士6 4 6 环) 。( s ) 精密度胆固醇交9 . 24 , C V 10 . 6 5% , 磷又13. 5 6 , C V 2. 19 % 。四、讨论用醉醚提取液可使胆固醇和磷脂完全从脂蛋白颗粒中释出. 胆固醇用酶法测定的优点已被公认, 同样适用于胆汁。用硫酸高氯酸高温消化, 使磷脂变成无机磷而测其磷, 回收率好, 结果满意。8超速离心高效液相色谱准确测定血清脂蛋白(a) 胆固醇国汉邦1 , 董军1 , 李红霞1 , 满永1 , 王抒1 , 陈文祥1 ,2(1. 卫生部北京医院,北京老年医学研究所, 北京市100730 ; 2. 卫生部北京医院, 卫生部临床检验中心, 北京市100730)关键词 生物化学; 脂蛋白; 胆固醇; 超速离心法; 高效液相; 色谱法; 动脉粥样硬化摘要 目的建立血清脂蛋白(a) 胆固醇的准确测定方法。方法血清与含脯氨酸的溴化钠溶液混合,使背景密度为1. 044 ,超速离心;用含22巯基乙醇的溴化钠溶液将底部组分的密度调节至1. 040 , 再次超速离心,高效液相色谱测定顶部组分胆固醇即为脂蛋白(a) 胆固醇。结果用22巯基乙醇使脂蛋白(a) 解离,使成为不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白(a) ,脂蛋白(a) 解离前后存在明显密度分界区域,使脂蛋白(a) 的分离和测定成为可能。测定脂蛋白(a) 胆固醇的批内和总变异系数分别为1. 84 %2. 17 %和2. 85 %4. 29 %。结论建立新的血清脂蛋白(a) 胆固醇测定方法,方法精密、可靠,可望在脂蛋白(a) 测定标准化中发挥作用。脂蛋白(a) 是由类似于低密度脂蛋白(low densi2ty lipoprotein , LDL) 的脂蛋白和载脂蛋白(a) 组成的一种特殊脂蛋白1 。大量研究显示,脂蛋白(a) 升高是动脉粥样硬化性心血管病的重要危险因素2 。脂蛋白(a) 胆固醇Lp (a) cholesterol , Lp (a)2C测定的困难在于没有简便、可靠的血清脂蛋白(a) 的分离方法,近年发展的方法有植物凝集素法、超速离心法和P或琼脂糖凝胶电泳法3 ,4 等, 其共同的缺点是操作烦琐,技术要求高,精密度较差。鉴于上述情况,本研究探索用超速离心分离脂蛋白(a) ,用高效液相色谱( high performance liquid chromatography , HPLC) 测定其胆固醇,建立Lp (a)2C 的准确测定方法。1 材料和方法1. 1 仪器、试剂和血清样品XL290 超速离心机、CentriTube 离心管切割器(Beckman Coulter , 美国) ,HP 1100 高效液相色谱仪(Hewlett Packard , 德国) ,MicroLab 500 稀释器(Hamil2ton , 美国) 和7170A 型自动生化分析仪(Hitachi ,日本) 。用于配制标准溶液的胆固醇为本室研制的标准物质GBW 09203a ,内标物豆甾醇和22巯基乙醇(22Mercaptoethanol , ME) 为美国Sigma2Aldrich 产品,色谱纯乙腈、异丙醇和正己烷为美国Fisher Scientific产品,其他化学试剂均为国产分析纯试剂。所用血清样品为收集自北京医院和同仁医院检验科的新鲜血清标本和美国疾病控制预防中心(CDC) 质控血清AQ18 (冰冻) 。新鲜血清分析前- 80 冰冻保存。1. 2 超速离心密度液配制配制含0. 2 molPL 脯氨酸的溴化钠溶液,调节溴化钠浓度,使20 密度为1. 080 (密度液) ,此密度液(0. 4 mL) 与0. 4 mL 血清混合, 给出背景密度1. 044 kgPL ;配制含0. 1 molPL 22巯基乙醇(22Mercap2toethanol , ME) 的溴化钠溶液,调节溴化钠浓度,使20 密度为1. 033 (密度液) ,此密度液(0. 4 mL) 与第一次超速离心后的0. 4 mL 底部组分(密度约为1. 047) 混合后给出背景密度1. 040 kgPL 。1. 3 标准溶液和内标溶液配制配制胆固醇乙醇溶液,使浓度为0. 323、0. 646、1. 293、2. 586 mmolPL 和5. 172 mmolPL ,用作第二次超速离心后顶部组分胆固醇( top fraction cholesterol ,TFC) 测定的标准溶液。配置豆甾醇乙醇溶液1. 293mmolPL ,作为胆固醇测定的内标溶液。1. 4 超速离心分离脂蛋白(a)超速离心采用Type 25 转头和厚壁聚碳酸酯离心管(1 mL ,8 mm 51 mm) 。用校准过的加样器精密吸取0. 4 mL 血清到离心管中,加入0. 4 mL 密度液, 混匀,在20 和23 krPmin 下离心18. 5 h。用离心管切割器在离心管中液体的中间位置切割离心管,将离心管底部组分(bottom fraction , BF , 0. 4 mL)转移到另一新离心管中,用0. 4 mL 密度液洗涤底部离心管3 次并全部转移到新离心管中,混匀,在20 和23 krPmin 下离心18. 5 h。用离心管切割器在离心管中液体的中间位置切割离心管,测定顶部组分胆固醇。1. 5 顶部组分胆固醇测定胆固醇测定参考文献 5 ,6 采用HPLC 法。高效液相色谱分析采用Nova2Pak C18 色谱柱(5 (m ,3. 9 mm ( 150 mm) ,流动相为乙腈异丙醇(9010) ,流速1 mLPmin ,紫外(250 nm) 检测。取上述样品,用0. 2 mL 流动相溶解,进样10L 。将标准溶液浓度对胆固醇P内标峰高比进行线性回归,将样品顶部组分胆固醇P内标峰高比代入回归方程,计算样品胆固醇浓度。1. 6 其他分析脂蛋白a 质量测定用日本协和医药公司的免疫比浊法;采用试剂说明书中的样品试剂比例、温育温度及时间和空白方式, 在全自动生化分析仪上进行分析。1. 7 统计分析用微软Excel 程序进行统计分析。2 结果2. 1 解离前后脂蛋白(a) 在脂蛋白密度谱中的分布血清的密度在1. 0061. 181 之间的33 种背景密度下和不同条件下底部组分胆固醇分布见图1。结果发现,当密度 1. 11 时,乙二醇存在时底部组分胆固醇与22巯基乙醇存在时底部组分胆固醇基本相同,当密度为1. 05 左右时,BFEGC与BFMEC 之差最大,提示解离后的不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白密度不完全与LDL 重叠,可能与脂蛋白(a) 存在密度分解点。图1. 22巯基乙醇和乙二醇存在下,血清在不同背景密度超速离心底部组分胆固醇比较2. 2 解离后的脂蛋白(a) 在密度1. 05 附近的分布实验不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白在其分界密度1. 05 附近的分布情况7 ,取脂蛋白(a) 300 mgPL 的混合血清一份,在1. 052 的密度下超速离心,制备底部组分含大部分脂蛋白(a) ,将底部组分用含22巯基乙醇和不含22巯基乙醇的密度液分别调节背景密度至1. 032、1. 034、1. 036、1. 038、1. 040、1. 042、1.044、1. 048 和1. 050 ,再次进行超速离心,测定顶部组分胆固醇。22巯基乙醇存在时TFC (TFME( + ) C)与22巯基乙醇不存在时TFC (TFME(2) C) 及两者之差在1. 0361. 048 密度范围内基本保持不变,超出此范围则出现降低,提示不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白密度一般小于1. 0367 。2. 3 超速离心分离脂蛋白(a) 和高效液相色谱测定脂蛋白(a) 胆固醇方法的建立不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白和脂蛋白(a) 之间有明显的密度分界区域,在此区域内基本上既无不含载脂蛋白(a) 的脂蛋白,也无脂蛋白(a) ,由此可实现脂蛋白(a) 的超速离心分离,建立超速离心HPLC 测氯仿P甲醇匀浆测定肝脏甘油三酯含量曾涛谢克勤1 张翠丽于丽华朱振平山东大学公共卫生学院毒理学研究所,济南250012关键词:肝脏甘油三酯氯仿甲醇中图分类号:R322147 R575104 文献标识码:A作者简介:曾涛,男,博士研究生,E2mail :zengtao1311 yahoo. 1 通讯作者:谢克勤,男,理学博士,教授,博士生导师,研究方向:神经毒理学肝脏组织中甘油三酯(TG) 的测定是判断药物对脂肪肝有无作用的重要指标。然而,肝组织的匀浆方法报道不一,导致评价预防和治疗脂肪肝的药效受到怀疑。目前测定肝组织中的TG,归纳起来可以分为两类:一是用生理盐水或者磷酸盐缓冲液等匀浆1 ,2 ;二是用有机溶剂主要是氯仿和甲醇匀浆35 。为了比较两种方法的可靠性,本文建立了酒精性脂肪肝模型,采用2 种匀浆方法测定肝脏甘油三酯含量。1 材料与方法111 材料健康雄性昆明小鼠由山东大学实验动物中心提供;甘油三酯测定试剂盒购自中生北控生物科技有限公司;无水乙醇由天津广成化学试剂有限公司提供;DY892 电动玻璃匀浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司;UV2120202 紫外P可见分光光度计, 日本岛津公司; 多功能冷冻水平离心机, 德国Heraeu Biofuge Stratos 公司。112 方法11211 急性酒精性脂肪肝模型的建立参考保健食品检验与评价技术规范(2003 年版) ,健康雄性昆明小鼠16 只,随机分为2 组,对照组和模型组。模型组给予体积分数为50 %的乙醇12mlPkg ,对照组给予等体积的蒸馏水。两组动物禁食16h 后处死,取肝脏备用。11212 氯仿P甲醇肝匀浆测甘油三酯含量1121211 标准曲线的测定按试剂盒说明配置的1ml 工作液中(试剂R1 中加入10ml 试剂R2) ,加入10l 氯仿P甲醇(21)混合物后,分别加入5、10、15、20、25、30 和35l 甘油三酯标准品,震荡混匀,37 孵育10min 后,6000rPmin ,离心10min ,取上清505nm测定吸光度(A) 。1121212 氯仿P甲醇比例对甘油三酯提取量的影响称取适量肝脏组织,放入玻璃匀浆管中,分别用体积比为2P1、1P1、1P2和1P3 的氯仿P甲醇混合液制备10 %的肝脏组织匀浆,倒入具塞玻璃管中,室温下抽提24h 后,取有机溶剂层,根据甘油三酯测定试剂盒说明对甘油三酯含量进行测定,比较氯仿P甲醇不同比例对于甘油三酯抽提的效果。1121213 氯仿P甲醇(21) 肝脏匀浆液的制备及甘油三酯含量测定称取适量肝脏组织,放入玻璃匀浆管中,加入三倍体积的甲醇,1500rPmin 电动匀浆5min ,倒入具塞离心管中,再加入6 倍体积的氯仿,漩涡混合器混匀,制备10 %的组织匀浆。将匀浆分别抽提6、12 和24h 后,小心抽取下层有机溶剂层10l加入到1ml 工作液中, 37 分别孵育10、15 和20min 后,6000rPmin离心10min ,根据甘油三酯测定试剂盒对甘油三酯含量进行测定,比较不同提取时间和孵育时间对测定结果的影响。11213 生理盐水肝脏匀浆测甘油三酯含量称取适量肝组织,放入玻璃匀浆管中,加入9 倍体积的生理盐水,1500rPmin电动匀浆5min ,制备10 %的组织匀浆。3000rPmin 15min ,小心去除上层白色油脂后,取上清液根据试剂盒说明书测定甘油三酯的含量。113 统计学处理用SPSS 1310 统计软件进行统计学分析, P 0105 认为具有统计学差异。2 结果211 标准曲线的测定标准管(1ml 工作液中加入10l 甘油三酯标准品) 的吸光度为01126 , 各测定管的吸光度的标准曲线方程为: Y =010056 X + 010093 , R2 = 019963。1ml 工作液中加入10l 的氯仿P甲醇(21) 对于其测定结果无影响。212 氯仿P甲醇提取体系的比例对甘油三酯抽提效果的影响同一小鼠肝脏(为保证结果准确,共选用8 只小鼠肝脏)用不同比例的氯仿P甲醇提取液抽提24h 后,加入到1ml 工作液中,孵育20min ,其吸光度见表1。由表1 所见,氯仿甲醇比例在1221 之间时,其吸光度随着氯仿比例的增加而增加;当氯仿甲醇比例为31 时,测定的吸光度较2P1 时下降,表明氯仿甲醇比例为21 时,对甘油三酯的抽提较为完全。表1 氯仿P甲醇比例对甘油三酯抽提效果的影响( A)氯仿P甲醇1 # 2 # 3 # 4 # 5 # 6 # 7 # 8 #31 01198 01092 01185 01146 01201 01157 01189 0112221 01214 01111 01265 01185 01206 01287 01215 0119911 01196 01097 01160 01176 01154 01139 01208 0118512 01080 01095 01094 01082 01099 01101 01153 01100213 不同孵育时间对吸光度的影响同一小鼠肝脏(共8 只动物) 氯仿甲醇(21) 提取液,加入到1ml 工作液后,分别孵育10、15 和20min , A 值分别为01220 01034、01223 01033 和01223 01030。214 氯仿P甲醇不同提取时间对测定吸光度的影响同一小鼠肝脏(共8 只动物) 用氯仿甲醇(21) 分别抽提6、12 和24h , A 值分别为(01205 01036) 、(01220 01034) 和_(01220 01031) 。215 两种匀浆方法对测定结果比较由表2 可见,生理盐水匀浆两组比较未见统计学差异,氯仿P甲醇(21) 匀浆抽提12h 后,两组比较可见乙醇组甘油三酯含量明显升高( P 0101) 。表2 两种匀浆方式测定结果的比较(.x s) mgPg匀浆方式组别甘油三酯生理盐水对照组8102 1. 77乙醇组9102 1. 36氯仿P甲醇对照组8184 2. 06乙醇组33176 5.