霉变日粮中添加酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能-器官指数及血清指标的影响.doc

霉变日粮中添加酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能摘 要： 试验旨在研究酵母葡聚糖对饲喂霉变日粮肉仔鸡生长性能、血清指标及器官指数的影响。选用 180 只体重接近的 4 日龄肉仔鸡随机分成 5 组，分别为对照组（基础日粮组）、发霉饲料组（日粮中的正常玉米由发霉玉米替代）、试验组（发霉饲料+0.05%酵母葡聚糖）、试验组（发霉饲料+0.10%酵母葡聚糖）、试验组（发霉饲料+0.15%酵母葡聚糖），试验期为 21 d。结果表明：发霉玉米日粮中低剂量的霉菌毒素对肉仔鸡生长性能无影响，但可导致肝脏、心脏和脾脏肿胀，胸腺和法氏囊萎缩，血清中总蛋白、白蛋白、尿素氮浓度降低；在发霉玉米日粮中添加 0.05%0.15%的酵母葡聚糖，能降低发霉玉米中霉菌毒素对内脏器官的毒害作用，使器官指数和血清指标基本恢复到正常水平。关键词：酵母葡聚糖；霉菌毒素；肉仔鸡；生长性能；血清指标；器官指数Effects of yeast glucan added in mold-contaminated feed on growth performance,organ and serum indices of broilersAbstract：An experiment was conducted to study the effects of yeast glucan added in mold-contaminatedfeed on growth performance, organ and serum indices of broilers. 180 broiler chicks （4-day-old）wererandomly divided into 5 groups：control group （basal diet），mold-contaminated feed group (moldy cornadded in basal diet)，test group (mold-contaminated feed+0.05%glucan), test group(mold-contami-nated feed+0.10%glucan), test group(mold-contaminated feed+0.15%glucan), and the experiment last-ed for 21 days. The result showed that the growth performance of broilers fed mold-contaminated feedhad no difference; weights of liver, heart and spleen were significantly increased, and the weights of thy-mus and bursa were reduced; the contents of total protein，albumin and blood urea nitrogen in serumwere decreased. With 0.05%0.15% yeast glucan added in mold-contaminated feed, organ morphologyand serum indices returned to normal levels.Key words：yeast glucan；mycotoxin；broiler；growth performance；serum indices；organ indices霉菌污染的饲料中含有大量的黄曲霉毒素B1（AFB1）、T-2 毒素、玉米赤霉烯酮（ZEA）等毒素，霉菌的寄生和霉菌毒素的产生严重影响饲料品质，其中AFB1毒性最强。畜禽长期采食含有黄曲霉毒素 B1的日粮会导致肝脏损伤，生长性能和免疫功能降低。霉菌毒素的污染已成为全球性难题，其去毒和解毒的方法一直是人们研究的热点。国外研究表明，啤酒酵母葡聚糖对ZEA 有吸附性，可减少动物消化道中毒素的生物活性; 葡聚糖的三维空间构象有利于 ZEA 接近吸附位点，其三股螺旋结构是影响吸附过程的主要因素1。张丽霞等研究表明，酶碱法提取的葡聚糖对ZEA 具有较好的吸附效果，吸附量最大可达到2.296 g/mg 葡聚糖2。酵母细胞壁中的葡聚糖和甘露寡糖，对细菌、真菌和病毒引起的疾病可产生非特异性免疫力3，相关的研究论文不断见诸报道，而国内外关于葡聚糖对发霉饲料黄曲霉毒素去毒效果的研究报道较少。本试验采用从废啤酒酵母中提取的葡聚糖，以艾维茵肉仔鸡为试验动物，通过肉仔鸡生长性能、血清指标及器官指数的分析，研究酵母葡聚糖对发霉饲料中霉菌毒素的去毒效果，并探讨其作用机制。1 材料与方法1.1 试验材料酵母葡聚糖由武汉工业学院畜禽饲料工程技术研究中心生产，纯度达85%；霉变玉米于自然条件(温度 2832 ，湿度 86%87%) 培养制备4,将水分控制在 20%左右, 眼观有明显霉变产生，测定其中 AFB1含量为83.2 g/kg采用酶标法测定，AFB1试剂盒购自于安德珍生物技术（北京）有限公司。1.2 试验设计及日粮1 日龄商品代艾维茵肉仔鸡，正常饲料育雏 3 d后，选取 180 只随机分为 5 个处理组，每个处理组 6个重复，每个重复 6 羽，经检验，处理间无显著差异，具体分组情况见表 1。第 4 日龄试验开始，试验期为21 d（424 d），各处理组的日粮配方和营养水平完全相同,见表 2。经计算，发霉饲料组及试验组中 AFB1含量为 47.2 g/kg。表1 试验设计组别对照组发霉饲料组试验组试验组试验组日粮组成正常玉米日粮日粮中的正常玉米由发霉玉米替代发霉饲料+0.05%酵母葡聚糖发霉饲料+0.1%酵母葡聚糖发霉饲料+0.15%酵母葡聚糖表 2 日粮组成和营养水平原料玉米豆粕豆油鱼粉石粉磷酸氢钙食盐DL-蛋氨酸预混料营养水平代谢能(MJ/kg)粗蛋白(%)钙(%)有效磷(%)赖氨酸(%)蛋氨酸(%)含量（%）56.7031.003.505.001.340.970.300.191.0012.4121.301.010.471.140.47注：1.预混料为每千克日粮提供：VA 10 000 IU、VD32 750 IU、VE20 IU、甲萘醌 3.0 mg、硫酸铵 2.5 mg、核黄素 6.0 mg、吡哆醇2.5 mg、VB1212 g、叶酸 1.5 mg、烟酸 20 mg、泛酸 15 mg、生物素80 g、Co 300 g、Cu 16 mg、Fe 102 mg、I 1.2 mg、Mn 95 mg、Se 300 g、Zn 80 mg。2营养水平中代谢能为计算值。1.3 饲养管理采用网上平养的方式，每笼 6 只。试验前鸡舍、鸡笼进行彻底清扫，熏蒸消毒；自由采食和饮水，24 h光照，常规免疫。1.4 样品采集及处理于试验第7、14 和 21 d 清晨空腹称重，以重复为单位记录试验07 d、714 d 和 1421 d 的体增重和耗料量；试验第7、21 d 屠宰，每个重复随机选取 1 只接近平均体重的肉仔鸡，心脏采血，3 000 r/min离心10 min，分离血清，-20 冰箱保存；颈静脉放血致死，经正常屠宰，迅速打开腹腔，摘取心脏、肝脏、肾脏、胰腺、胸腺、脾脏和法氏囊，称重。1.5测定指标及方法1.5.1 生长性能指标体重（BW）、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。1.5.2 血清指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、谷氨酰转肽酶（GGT）和尿素氮（BUN），样品由武汉市第七医院采用日立 7020全自动生化分析仪检测。1.5.3 器官指数称取心脏、肝脏、肾脏、胰腺、脾脏、胸腺、法氏囊的重量，计算器官的相对重量。器官的相对重量（g/kg）=器官重量/鸡活体重。1.6 数据处理数据采用SPSS13.0 统计进行单因素方差分析，同时进行 Duncans 法多重比较，以 P0.05 为显著水平，试验数值以平均值标准差表示。2 结果与分析2.1 酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响试验分别计算了 07 d、714 d 及 1421 d 的ADG、ADFI 及 F/G，结果见表 3。由表 3 可知，发霉饲料组与对照组相比，生长性能指标在整个试验阶段均无显著差异，表明日粮中的低剂量霉菌毒素对肉仔鸡的生长性能无明显影响。3 个试验组与对照组相比，生长性能指标在整个试验阶段均无显著差异，表明酵母葡聚糖对肉仔鸡的生长性能无明显影响。2.2 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响（见表4、表 5）由表 4 可知，在试验第 7 d 时，发霉饲料组肝脏的相对重量高于其它各组（P0.05）；发霉饲料组肾脏的相对重量高于对照组（P0.05），显著高于试验组、试验组（P0.05）；心脏和胰腺相对重量各组之间差异不显著（P0.05）。试验第21 d 时，发霉饲料组肝脏的相对重量显著高于其它各组(P0.05）；发霉饲料组心脏的相对重量显著王兆钧等：霉变日粮中添加酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能、器官指数及血清指标的影响饲 养 试 验45表3酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响试验期（d）071421077141421077141421077141421对照组85.752.36282.3111.62625.2011.961 057.3346.7628.611.1148.560.8663.284.1441.112.0176.244.16121.437.021.440.081.570.091.920.19发霉饲料组85.813.75281.1410.90621.9316.251 059.3345.4327.701.1248.511.5561.155.2841.212.4676.943.31123.396.991.490.141.590.052.030.18试验组87.110.61283.1413.04614.9332.281 070.6764.3828.511.4248.473.7366.663.6542.872.7177.275.88124.138.821.500.091.590.041.860.14试验组86.690.62288.036.94633.6014.221 081.3338.4228.930.8249.391.4764.782.9143.152.7776.461.16125.184.491.490.091.550.061.940.11试验组86.500.84285.476.53609.9727.991 032.6750.5628.720.5748.681.6362.841.5142.103.1075.943.11123.875.601.470.121.560.041.970.11项目日增重（g）日采食量（g）料重比体重（g）注：同行肩标不同小写字母表示差异显著（P0.05)。 下表同。表4 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响（g/kg）试验期（d）721721721721对照组33.520.83a23.561.69a9.451.00abc7.330.778.351.486.230.40a3.530.102.110.20发霉饲料组38.172.56b26.502.41b10.781.32c7.840.538.760.997.270.78b3.580.242.320.21试验组34.781.95a22.051.37a9.120.56ab7.580.838.170.796.680.34ab3.500.372.190.23试验组34.953.29a22.993.14a10.220.81bc7.260.728.100.846.130.88a3.570.182.240.12试验组32.772.57a21.291.92a8.501.49a7.310.768.220.186.090.33a3.620.382.180.22项目肝脏肾脏心脏胰腺高于对照组、试验组、试验组（P0.05）；发霉饲料组肾脏和胰腺相对重量有升高趋势，各组之间差异不显著（P0.05）。由表5 可知，试验第 7 d 时，发霉饲料组脾脏的相对重量显著高于其它各组（P0.05）；胸腺和法氏囊相对重量各组之间差异不显著（P0.05）。试验第 21 d 时，发霉饲料组法氏囊相对重量低于对照组（P0.05），显著低于试验组（P0.05）。2.3 酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响（见表 6）由表 6 可知，试验第 7 d 时，发霉饲料组 TP 含量、ALB 含量低于对照组（P0.05），显著低于试验组（P0.05）；发霉饲料组血清尿素氮（BUN）含量低于对照组（P0.05），显著低于试验组（P0.05）；其它指标各组之间差异不显著（P0.05）。试验第21 d 时，发霉饲料组 AST 有升高趋势，各组之间差异不显著（P0.05）；发霉饲料组 TP 浓度低于对照组（P0.05），显著低于试验组（P0.05）；发霉饲料组BUN 含量显著低于对照组（P0.05）。3 讨论表5 酵母葡聚糖对肉仔鸡免疫器官相对重量的影响(g/kg)试验期（d）721721721对照组0.690.09a0.810.123.920.774.460.702.010.302.560.43ab发霉饲料组0.950.18b0.940.143.740.334.070.521.750.342.010.35a试验组0.710.13a0.840.173.500.354.310.652.000.282.330.66ab试验组0.710.12a0.850.224.510.604.330.612.250.512.710.83ab试验组0.620.08a0.850.274.120.874.220.882.160.333.231.06b项目脾脏胸腺法氏囊王兆钧等：霉变日粮中添加酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能、器官指数及血清指标的影响饲 养 试 验46表6酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响试验期（d）721721721721721721对照组3.250.432.600.49223.2514.18231.224.928.801.7914.402.6127.521.54ab31.730.77ab11.500.48ab13.130.390.360.07ab0.360.07a发霉饲料组3.400.553.000.00215.5023.29246.6030.389.201.1017.802.4924.943.19a28.780.57a9.981.45a12.961.080.280.06a0.290.03b试验组3.500.502.670.52225.405.90236.2038.809.200.4515.602.8826.462.29ab29.751.43a11.221.00ab13.000.640.360.07ab0.270.06b试验组3.250.433.00.000209.2014.52238.226.438.800.8417.401.1427.220.58ab31.873.04ab11.300.81ab13.631.430.420.10b0.270.05b试验组3.200.453.000.00207.2518.87226.4010.927.801.7915.802.5928.823.70b33.745.06b11.921.72b13.401.570.360.04ab0.270.03b项目丙氨酸转氨酶（U/l）天门冬氨酸转氨酶（U/l）谷氨酰转肽酶（U/l）总蛋白（g/l）白蛋白（g/l）尿素氮（mmol/l）3.1 酵母葡聚糖对肉仔鸡生长性能的影响研究表明，在自然条件下污染粮食及饲料的黄曲霉毒素主要有B1、B2、G1、G2等，其中以 B1最多，毒性最强5。本试验研究表明，日粮中低剂量的霉菌毒素对肉仔鸡的生长性能无明显影响，这可能是由于饲料中霉菌毒素含量较低的原因。本试验在发霉饲料日粮中添加0.05%0.15%的酵母葡聚糖，对肉仔鸡的生长性能无明显影响，这与张敬等6的试验结果相一致。3.2 酵母葡聚糖对肉仔鸡器官相对重量的影响肝脏是黄曲霉毒素作用的靶器官，但不是唯一受损器官。肉仔鸡采食黄曲霉毒素后，首先会出现肝损伤，长时间采食会导致其它器官也受到不同程度的损伤。Raju 等研究表明，畜禽采食黄曲霉毒素后，肝脏、肾脏的相对重量升高7。研究表明，霉变玉米可显著提高肉鸡肝脏、心脏、肾脏、脾脏的相对重量8-9。本试验中，发霉饲料组肝脏在试验第7 d 和 21 d 时明显肿胀，心脏在第 21 d 时明显肿胀，肾脏和胰腺也有升高趋势，可见霉变玉米对内脏器官造成了损伤。此外，黄曲霉毒素可诱发免疫抑制，使免疫器官发育受阻，引起脾脏肿大，法氏囊、胸腺萎缩。本试验结果表明，试验第7 d 时霉变玉米引起仔鸡脾脏明显肿大，第 7 d 和21 d 时胸腺和法氏囊出现萎缩，与 Chang C F 等10的试验结果基本一致。研究表明，葡聚糖可增强肝细胞抗氧化能力，起到肝损伤的保护作用11。据报道，在日粮中添加 -葡聚糖，21 日龄时肉仔鸡免疫器官的相对重量都有增加的趋势，即法氏囊相对重量显著增加12。本试验在发霉饲料日粮中添加0.05%0.15%的酵母葡聚糖，使内脏器官肿胀和免疫器官萎缩现象得到了缓解，添加0.15%的酵母葡聚糖显著提高了法氏囊的相对重量，并使其高于对照组水平。结果表明，酵母葡聚糖能在一定程度上降低黄曲霉毒素对内脏的毒害作用，并促进了免疫器官的发育，但其作用机制还有待进一步研究。3.3 酵母葡聚糖对肉仔鸡血清生化指标的影响正常情况下，天门冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶及谷氨酰转肽酶主要存在于肝细胞中，当肝脏受损时，细胞膜通透性增强，导致胞内酶外流增加，使血清中酶活明显升高，因此，这些酶可作为反映肝脏功能的重要指标13。研究表明，发霉日粮可显著提高肉仔鸡血清中 AST、ALT、GGT 活性14-15。本试验结果表明，在试验21 d 时，发霉日粮组仔鸡血清中的 AST、ALT、GGT 活性略高于对照组，但差异不显著（P0.05）。血清总蛋白和白蛋白水平的高低是反映肝脏蛋白合成能力的一项重要指标，当肝脏严重受损时，其蛋白合成能力将受到影响9。徐雪梅报道，发霉玉米的添加使肉仔鸡血清中TP、ALB 浓度显著降低16。Aravind 报道，饲喂自然污染日粮可显著降低血清中BUN 浓度17。本试验结果表明，发霉饲料组仔鸡血清中TP 和 ALB 含量降低（P0.05）,第 21 d 时，BUN 浓度显著降低（P0.05），添加 0.15%的酵母葡聚糖提高了血清中ALB 浓度，显著提高了血清中 TP 的浓度（P0.05），相对而言，以添加量 0.15%的效果最好。说明酵母葡聚糖能够一定程度地降低发霉玉米中霉菌毒素对肉仔鸡的毒害作用，但其作用机制有待于进一步研究。参考文献1 Yiannikouis A, Francois J, Poughon L. Alkali Extraction of -D-Glucans from saccharomyces cerevisiae cell wall and study of theiradsorptive properties toward Zearalenone J. J. Agric. Food Chem.,2004, 52: 3666-3673.2张丽霞,周剑忠,黄开红,等.HPLC 测定啤酒酵母 -D-葡聚糖吸附玉米赤霉烯酮(ZEA)的含量J.江西农业学报，2009，21（3）：147-148.3 崔立，谢爱纯免疫促进剂酵母细胞壁J饲料工业，1999，20（9）：44-464 胡兰饲料黄曲霉毒素的研究进展J饲料工业，2001，22(3)：21-225 李凯年编译 用 MOS 吸附降解黄曲霉毒素 J 中国动物保健，2005，10：47-486 张敬，潘振亮，李鹏，等.酵母源 -葡聚糖对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响J.天津农业科学，2008，14（6）：5-8.7 Raju M V L N, Devegowda G. Influence of esterified-glucomannanon performance and organ morphology, serum biochemistry andhematology in broilers exposed to individual and combinedmycotoxicosis (aflatoxin, ochratoxin and T -2 toxin) J. BritishPoultry Science, 2000, 41: 640-650.8侯然然,郑姗姗,张敏红,等葡甘露聚糖对饲喂黄曲霉毒素 B1 日粮肉仔鸡生长性能、血清指标及器官指数的影响J动物营养学报，2008，20（2）：146-1519 夏枚生,胡彩虹,许梓荣,等酸活化坡缕石对肉鸡日粮中黄曲霉毒素 B1 的去毒效果J中国兽医学报，2005，25（1）：107-11010 Chang C F, Hamilton P B. Increased severity and new symptomsof infectio