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文档简介

触酶试验(1)原理:触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。(2)方法:取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3H2O2 1滴,立即观察结果。(3)结果:若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。(4)应用:大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性,故常用此试验来鉴定。此外,金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验,结核分枝杆菌为阴性,戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。注意事项:3H2O2溶液要新鲜配制。不宜用血琼脂平板上生长的菌落,因红细胞含有触酶,可致假阳性反应。取对数生长期的细菌。氧化酶试验(1)原理:氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。 (2)试剂:1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺。 (3)方法:常用方法有三种; 1)菌落法:直接滴加试剂于被检菌菌落上。 2)滤纸法:取洁净滤纸一小块,沾取菌少许,然后加试剂。 3)试剂纸片法:将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片,取菌涂于试剂纸上。 (4)结果:细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色,为阳性。为保证结果的准确性,分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。 (5)应用:主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别,前者为阴性,后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。2.3 耐酸性染色法(萎倪二氏法)2.3.1 石炭酸品红染色液碱性品红 0.3g 95%乙醇 10mL5%酚水溶液 90mL将品红溶解于乙醇中,然后与酚溶液混合。2.3.2 3%盐酸乙醇 浓盐酸 3mL 95%乙醇 97mL2.3.3 复染液吕氏碱性美蓝染色液。美蓝0.3g;95%乙醇 30mL;0.01%氢氧化钾溶液 100mL;将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。2.3.4 染色法2.3.4.1 将涂片在火焰上加热固定,滴加石炭酸品红染色液,徐徐加热至有蒸气出现,但切 不可使沸腾。染液如因蒸发减少时,应随时添加。染5min,倾去染液,水洗。 2.3.4.2 滴加盐酸乙醇脱色,直至无红色脱落为止(所需时间视涂片厚薄而定,一般为13min),水洗。2.3.4.3 滴加吕氏碱性美蓝染色液,复染30s1min,水洗,待干,镜检。2.3.5 结果:耐酸性细菌呈红色,其他细菌、细胞等物质呈蓝色。抗酸染色一般步骤1)初染用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。2)脱色3%盐酸酒精脱色30秒1分钟;用水冲洗。3)复染用碱性美兰溶液复染1分钟,用水冲洗后用吸水纸吸干。苯酚、美蓝、盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺、双氧水欢迎您下载我们的文档,后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用致力于合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网

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