人教版教学课件1.1DNA重组的基本工具.ppt

定向基因改造设想 设想设想 一一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮 ？ 能否让细菌能否让细菌“ “吐出吐出” ”蚕丝？蚕丝？ 设想设想 二二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等 珍贵的药物？珍贵的药物？ 设想设想 三三 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术 生物体外生物体外 基因基因 DNADNA分子水平分子水平 人类需要的基因产物人类需要的基因产物 剪切剪切 拼接拼接 导入导入 表达表达 什么叫基因工程？什么叫基因工程？ 基因工程 需要哪些基 本工具? 培育抗虫棉需要哪些工具？培育抗虫棉需要哪些工具？ 分子手术刀限制性内切酶 分子缝合针分子缝合针DNADNA连接酶连接酶 分子运输车分子运输车运载体运载体 第1节 DNA重组技术的基本工具 一、限制性核酸内切酶 思考 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一 种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实 例？ 细菌为什么不会因外源DNA的入侵而灭绝？ 识别双链识别双链DNA DNA 分子的某种分子的某种特定的核苷酸特定的核苷酸 序列序列，并且使每一条链中，并且使每一条链中特定部位特定部位的两的两 个核苷酸之间的个核苷酸之间的磷酸二酯键磷酸二酯键断开。断开。 主要是从主要是从原核生物原核生物中分离纯化出来的一中分离纯化出来的一 种酶。种酶。 40004000种。种。 1 1、来源：、来源： 2 2、种类：、种类： 3 3、作用：、作用： 4 4、结果：、结果：形成两种末端形成两种末端 一、一、 “ “分子手术刀分子手术刀” ” 限制性核酸内切限制性核酸内切 酶酶 黏性末端 平末端 内切酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平 末端是如何形成的？ 什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？ 什么叫平末端？什么叫平末端？ 限制酶存在于原核细胞中的作用是 什么？为什么限制酶不剪切细菌本身的 DNA？ 二、连接酶“分子缝合针” .作用：连接磷酸二酯键 限制酶切割后产生两种不同的末 端。那么恢复它们的连接时，所用 DNA连接酶是否可以不加选择？ E.coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 .DNA连接酶的种类 DNA聚合酶和DNA连接酶有何 相同点和不同点？ DNA连接酶DNA聚合酶 连接DNA链 连接部位 相同点 双链 单链 在两DNA片段之间形 成磷酸二酯键 将单个核苷酸加 到已存在的核酸 片段的3末端的 羟基上，形成磷 酸二酯键 都能形成磷酸二酯键 二者都由蛋白质构成 假如目的基因导入受体细胞后不能复 制将怎样？ 作为载体没有切割位点将怎样？ 目的基因是否进入受体细胞，你如何 察觉？ 如果载体对受体细胞有害将怎样？ 三、基因进入受体细胞的载体 “分子运输车” 1. 载体的必要条件 能自我复制，或能进入受体生物细胞 并在受体生物细胞内复制并表达； 有切割位点 有遗传标记基因 对受体细胞无害、容易分离 比较容易得到 能复制并带着插 入的目的基因一 起复制 有切割位点有标记基因的存 在，可用含青霉 素的培养基鉴别 。 常用的分子运输车 有哪些？ 小结 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 DNA连 接酶 连接磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工具 具备的 条件 结构简单,大小适中 能在宿主细胞中自 我复制并稳定存在 具一个多个限制酶切位点 具标记基因 质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒 1.在基因工程中，切割运载体和含有目 的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 A A 练习练习 2. 2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A A、能复制能复制 （ ） B B、有、有多个限制酶切点多个限制酶切点 C C、具有标记基因具有标记基因 D D、它是环状它是环状DNADNA D D 3. 3. 基因工程是在基因工程是在DNADNA分子水平上进行设计施分子水平上进行设计施 工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱 基互补配对的步骤是基互补配对的步骤是 （ ） A A、人工合成目的基因人工合成目的基因 B B、目的基因与运载体结合目的基因与运载体结合 C C、将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞 D D、目的基因的检测和表达目的基因的检测和表达 C C 练习练习 大肠杆菌的一种限制酶（