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实验五 果蝇唾腺染色体标本 的制备与观察 n 实验目的 n 实验原理 n 实验材料与药品 n 实验方法 n实验作业 实验目的 练习剥离果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾 腺染色体标本的方法。 观察果蝇唾腺染色体的结构特点。 实验原理 n发现 1881年，意大利Balbiani在双翅目昆 虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了 巨大的“永久性染色质纽”。 1930年前后，研究表明，“染色质纽 ”实质上是特殊的染色体。 后来，其他学者又在果蝇和其它双翅 目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了 巨大染色体。 n形成原因 染色体螺旋化程度不高。 核内复制：果蝇幼虫的唾腺细胞在发育 过程中，细胞核内的DNA多次复制，但细 胞、细胞核不分裂，复制后的染色单体 DNA也不分开（核内复制），形成了多线 染色体。 体联会：同源染色体相互靠拢在一起呈 现一种联会状态，使其比一般的体细胞 染色体粗大。 n特点 巨大； 体联会现象决定了染色体看起来只有半 数； 各个染色体中异染色质多的着丝粒部分 相互靠拢形成染色中心； 横纹有深浅、数目、疏密的不同，各自 对应排列，具有种的特异性。 若有缺失、易位、倒位、重复等现象， 很容易在唾腺染色体上识别出来。 实验材料与药品 n果蝇三龄幼虫 n0.8%生理盐水 n0.2mol/LHCl n蒸馏水 n苯酚品红 实验方法 n三龄幼虫的饲养； n剥取唾液腺 在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼 虫放在其中。左手用解剖针或小镊子压住幼虫后端 1/3处，右手的解剖针按住头部黑色口器向外拉，将 头部从身体拉开，唾腺随之而出，丢弃杂质。 n解离和染色：取解剖好的唾腺于载片上，加1-2滴蒸 馏水，使之成为低渗溶液，处理8-10分钟，再经 1mol/L HCl解离1-2min后，只需要用解剖针轻轻拨 动，脂肪等杂质便会和唾液腺自动分离。轻轻吸去 酸液，用碱性品红染色10分钟（或醋酸洋红染色15 分钟或龙胆紫染色1分钟）左右。 n揉片及观察 幼虫培养的注意事项 n培养基要较稀且富含营养 n追加酵母 n幼虫密度要小 n低温培养 唾液腺 n位置：在幼虫体前约1/3处。 n形状：形如一对香蕉，上小下 大。一边常附着带状的不透明 的脂肪。 n颜色：半透明如玻璃，略带白 色，比周围的组织都透明。 实验作业 1、绘制你所观察到的果蝇唾腺 染色体。 2、剥离果蝇唾液腺时应该 注意的 问题？ 果蝇唾腺染色体 果蝇各染色体臂的形态 各臂的末端模式图 注意事项 n一定要加生理盐水，否则唾腺易干； n水不可过多，否则幼虫易漂起来并且活 跃，影响剥离；
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