实验二基础培养基、细菌接种及其常用生化反应.ppt

实验二 基础培养基、细菌接种及其常用生化反应 实验目的 了解细菌常用培养基 掌握细菌的分离培养技术及纯种移种法 熟悉细菌各种生长现象 熟悉细菌常用生化反应 实验内容 操作 - 细菌接种法 分离培养法平板划线法（ 葡萄球菌/大肠埃希菌） 纯种培养法 斜面培养基接种法（葡萄 球菌/大肠埃希菌） 半固体培养基接种法 - 穿 刺接种法（大肠埃希菌/痢 疾杆菌） 液体培养基接种法 （葡萄 球菌/大肠埃希菌/痢疾杆菌 ） 示教 细菌的生长现象 液体、固体、半固体培养 基 常用生化反应 乳糖发酵试验 Indol试验 硫化氢试验 尿素分解试验 细菌生长繁殖的条件 充足的营养物质 水，碳源，氮源，无机盐，生长因子 合适的外界环境 温度 酸碱度 气体 渗透压 适合于细菌生长繁殖需要的各种营养物质 及在PH(7.27.6)条件下配制而成的基质。 培养基配成后灭菌 培养基 培养基（按物理性状分类） 液体培养基 固体培养基: 23% of agar 平板：划线分离，菌落计数，分离纯化 斜面：纯种移种 半固体培养基: 0.10.5% of agar 观察穿刺线、保存菌种 培养基（按营养组分及用途分类） 基础培养基：多数菌生长的基本营养成份 营养培养基：营养要求高的细菌生长。加入糖，血， 血清，酵母浸膏等 血平板 合成培养基：研究细菌代谢过程。特殊菌的分离培养 鉴别培养基：含有特定的作用底物 糖发酵管，葡萄糖蛋白胨水 选择培养基：在培养基中加入抑制某菌生长的物质 肠道致病菌选择培养基：SS培养基，抗生素培养基 厌氧培养基 庖肉培养基 平板划线法 注意事项 不要说话，严格无菌操作 灼烧后接种环要冷却 划线时用腕力，不要使接种环嵌 入琼脂 各个分区要分明 在培养皿底部贴标签 倒置培养防止细菌被冲散 斜面接种法 （1）用左手握住菌种管和斜面培养基管，右 手持接种环或接种针。 （2）用右手小指与手掌、小指与无名指分别 拔出两管的棉塞，将管口通过火焰灭菌。 （3）用接种环或接种针伸入菌种管内，挑取 用来接种的菌苔。 （4）伸入斜面培养管内，先从斜面底部到顶 端拖一条接种线，再自下而上蜿蜒划线。 （5）接种完成之后，用火焰灭菌培养管口， 并塞上棉塞，置于37培养。 半固体培养基接种法 （1）用左手握住菌种管和半固体培养管，右手持接种针 （2）用右手小指与手掌、小指与无名指分别拔出两管的 棉塞，将管口通过火焰灭菌。 （3）用接种针伸入菌种管内，挑取用来接种的菌苔。 （4）垂直刺入半固体中心，至近管底部，然后沿穿刺线 退出。 （5）塞回棉塞，接种针重新灭菌。接种完毕，于37培 养1824h，观察生长情况。 液体培养基接种法 （1）用灭菌接种环挑取用来接种的菌苔。 （2 ）在试管内壁与液面交界处轻轻研磨，使细菌 均匀得散落在液体培养基中。 示教：细菌在培养基中的生长情况 In liquid medium 菌膜 菌沉淀 均匀浑浊 对照 On solid medium ： 菌落菌苔 In semisolid medium ： 1、3：有动力 2：无动力 葡萄糖糖发酵试验 大肠埃希菌 产酸产气 产碱杆菌 不发酵 伤寒沙门菌 产酸不产气 Indol试验 大肠杆菌 出现红色 肖氏沙门菌 不出现红色 - 硫