实验针灸学基本研究方法.ppt

针灸推拿教研室 陈静 实 验 针 灸 学 第一章 实验针灸学的研究思路与科研设计 一、研究思路与科研设计 二、研究方法 三、常用研究技术 一、实验针灸学的研究思路与科研设计 选 题 文献检索立题 设计 实施 1、选 题 概 念 选题（立题）：即确定研究工作的内 容和对象，也就是确定准备探索的课题。 实验针灸学的科研选题：在中西医学基本 理论指导下，采用科学的研究方法而确定 的某一个准备研究的针灸学课题。 选题的意义 u选题是科研的起点，是整个科学研 究带有方向性的关键决策。 u 选题能集中体现研究者的科学思 维、学术水平、学科信息及实验能力 等综合水平。 1基础研究选题 根据中医针灸基础理论+研究现状 针灸学科发展的前沿开展重点基础研究。 2临床研究选题 常见病、多发病及严重危害人民健康的疾 病 深入开展防治规律、方案、手段的 研究。 (一)选题的范围 种类类研究目的研究特点成果表现现形式 基础础研究 解决针针灸学中未 知领领域的理论问论问 题题，探索针针灸学 中带带有全局性的 一般规规律。 不以具体应应用为为 目的，探索性强， 自由度大，风险风险 高， 其成果常常对对整 个中医针针灸领领域 甚至可能对对生命 科学产产生深刻的 影响。学术论术论 文 或理论专论专 著 应应用研究 以应应用为为目的， 对针对针 灸临临床中的 某一具体问题进问题进 行研究，并提出 解决方案和方法 实实用性强，在课课 题设计题设计 上要求技 术术路线线清晰，方 法具体可行 学术报术报 告书书、学 术论术论 文、临临床方 案 开发发研究 物化研究为为目的 用基础础+应应用研 究的成果，研制 出针针灸诊疗诊疗 新产产 品或对针对针 灸技术术 工艺进艺进 行改进进 采用较较成熟的理 论论和技术进术进 行产产 品研究，未知因素 较较少，风险风险 低， 成功率高 为为直接转转化为为生 产产力的知识识形态态 和物质质形态态的产产 品（专专利） (二)选题的种类 需求性 创新性：选题的先进性和新颖性，体现 了科学研究的最大特点。 科学性 可行性：选题实施的可能性：实施的条 件人力、物力、财力、信息四大要素。 (三)选题的原则 、文献检索 科研的初始想法往往是研究者的一个粗浅 和局限的认识。 u是否具有创新性? u在这个方向上其他人是否曾作过研究? u如何把初始意念深化并建立假说? u目前存在的关键问题是什么，解决问题的 方法和前景如何。 u 依据已掌握的理论和事实形成一个解决 问题的设想或猜测，这就需要建立假说。 u 假说：是根据一定的科学事实和科学理 论，对未知的自然现象及其规律提出的一 种推断或试探性解释。 、假说建立 (一)假说的特性 来源的科学性：科学的假说建立在真实 的事实材料之上； 说明的推测性：假说是一种推测性说明 ； 解释的系统性：系统的解释与假说有关 的主要事实； 结论的可验证性：假说的科学价值可被 重 复和验证。 (二)假说的形成、建立及检验 假说的形成、建立 u 初始意念 u 建立假说 u 完善假说 假说的检验：逻辑分析、实践检验：切 忌片面 (三)假说的作用 1假说决定了医学研究的具体目的和方向 2假说促进了医学理论的建立和发展 四、立题 u 立题：研究因素 研究对象 实验效应 针刺百会、神门、水沟对 VD患者 脑葡萄糖代谢的影响 u要求：能反映出研究因素、研究对象及实验效 应这三个主要环节及它们之间的联系。 要素简简明具体新颖颖醒目 要求20-25字内容、方法、 目的、水平、 创创新性文字 传传神 五、设计 u设计：就是制定完成选题目标实施方案； u目的：使该项研究能达到预期而又可靠的 结果，同时避免在研究实施过程中人力、 物力、财力和时间的浪费； u设计是关键和核心； u宗旨：前瞻性研究。 (一)实验针灸学研究的主要环节 1研究对象 u研究对象：人或动物；可以是正常的，也 可以是异常(病理)的。 u要求:研究对象具有代表性和一定数量， 以尽可能地反映群体的情况，这就是研究 的“重复性”原则。 2研究因素 uA.概念：也称受试因素或处理因素。 u广义的研究因素：是指自然存在的，或 受试者本身所具有的，或自外界给予研 究对象的各种因素。 u狭义的研究因素：则是指研究者所要研 究的、作用于研究对象身上可能产生效 应的因素。 单单因素研究 （只观观察一 个类别类别 的作 用） 单单因素单单水 平 电针对电针对 阿片肽肽的影响 单单因素多水 平 电针电针 不同频频率对对阿片肽肽的影响 多因素研究 （同时观时观 察 多个类别类别 的 作用） 多因素单单水 平 针针刺和电针电针 刺激足三里穴对对家 兔免疫功能的影响 多因素多水平 针针刺和电针电针 刺激百会、水沟、神 门门对对VD患者脑脑葡萄代谢谢的影响 B. 研究因素的类别 C、研究因素的确定要注意几点 u要选择最能反映“假说”的被试因素。 u注意多个被试因素之间的交互作用，包括 增效作用、减效作用和等效作用。 u注意处理因素的强度，同一处理因素，其 强度不同，效应不同。 u处理因素应保持标准化和稳定性。 标标准化 构成研究因素的诸组诸组 分均应应有明确的规规定 针针灸的疗疗效评评价中，穴位 的选选用、刺灸方法、针针具 规规格、补补泻情况、刺激时时 间间、疗疗程等 稳稳定性 构成研究因素的诸组诸组 分及有关条件在研究 过过程中的恒定性 同一组别组别 的不同个体，其 研究因素应该应该 一致（观观察 指标标、处处理方式等） 3实验效应 uA概念：是研究因素作用于研究对象所呈现 的结局，或是研究对象在研究因素作用下产生 的反应。 uB. 效应指标应具有的特性： (1)关联性：选用的指标关键是否有明确的关 联性，能否反映被试因素引起的效应（假说） 。 (2)客观性：选择具有能被客观度量或检测、 有数值表述的指标。 三伏灸对变应性鼻炎患者的临床疗效观察 （3)精确性：（重复） 准确性：反映观测值与真实值接近的程度； 可靠性：表示观测同一现象时，多次观测结果 取得一致或接近一致的程度。 (4)灵敏性：灵敏性高可以提高观测结果的阳性 率，但要注意，过高的灵敏性容易造成假阳性 。 (5)特异性：反应病症及效应的专属性，且常不 易受其他因素干扰。 n 判别性指标：对疾病的诊断。 n 评价性指标：临床试验的疗效评价。 n 预测性指标：可能性的估计以及疾病的发生 或预后状况的事前估测。 (二)设计的基本原则 1.对照的原则 (1)对照的概念和意义： nA概念：对照(control)指的是在调查研 究或实验研究的过程中，确立可供相互比 较的组别。 nB意义：对照是实验设计中首要的基本 原则。使实验组和对照组的非处理因素， 都必须遵循“齐同对比”的原则，使实验 误差得到相应的抵消或减少到可认同的程 度 nC作用：基线特征具有均衡性。 对照的方法 空 白 对 照 实 验 对 照 标 准 对 照 自 身 对 照 相 互 对 照 配 对 对 照 历 史 对 照 安 慰 对 照 空 白 对 照 造 模 组 西 药 治 疗 组 针 刺 组 假 针 组 电 针 组 实验对照：指与实验组相同操作条件的对照 ，可控制实验操作中的干扰因素影响。 相互对照：各实验组互为对照组（中药、针 灸、针药结合组）。 配对对照：将条件基本相同的两个对象配成 一对，分别接受二种处理(异体配对)。或对同 一对象作二种处理(自身配对)。 历史对照：又称文献对照或回顾对照。 安慰对照：是空白对照的特殊类型，目的在 于克服对照组病人由于心理因素所造成的偏倚 。 （伦理委员会审核） 2随机的原则 (1) 随机的概念与意义 nA概念：指被研究的样本是从总体中任意抽取的， 每个观察单位都有同等的机会被抽取或分配到某一 组中去。使每一个体在实验中都有同等机会，随机 分组或处理，使样本的生物差异均衡地分配各组中 去，而不受研究者或研究对象主观意愿所左右。 nB目的（意义）： 一是保证对实验结果有影响的未知与无法控制的因 素同等机会地分配到实验组与对照组中去，使抽取 的样本能更好的代表总体及保证组间的均衡性与齐 同性，以减少抽样误差。 二是保证实验资料可以进行统计学处理，因为 随机化是数理统计的先决条件。 类别类别方法特点 简单简单 随机化 抽签签、随机数字表 简单简单 、最常用 区组组随机化 根据进进入研究时时 间间先后顺顺序，将 其分成内含相等例 数的若干区间间。 有利于保持组间组间 的可 比性。如非双盲，可 导导致选择选择 性偏倚。 分层层随机化 根据对对疾病的转转 归归等有关因素或 临临床特征将受试试 者分若干层层，层层 内再随机分组组。 适用于样样本量在 100200间间，有23 个重要影响因素，每 个因素又有23个水 平时时。 (2)常用随机分配的方法 3重复的原则 (1)重复( replication)的概念和意义： n A概念：即要求研究样本对于相应的总 体具有代表性，它包含研究样本应具有与 相应总体的同质性和足够的样本含量两个 条件。 n B意义：随机抽取样本，是以足够的重 复数(样本例数，样本含量)为前提的，只 有达到足够的样本含量，才能样本均数逼 真，使标准差稳定，这是统计推断正确的 前提。 (2)临床研究实施重复原则的常用措施 严格按照研究目的规定研究对象的性质 与范围：主要涉及诊断标准、纳入标准和 排除标准等几个方面。 保证临床研究足够的样本含量。 诊断标准：1997年中华医学会中华耳鼻喉科学 分会、中华耳鼻咽喉科杂志编辑委员会“ 变应性鼻炎诊断标准及疗效评定标准”制定标 准 。 纳入标准：符合上述诊断标准；自愿参加 临床观察，服从医生安排，配合治疗和随访， 并签署知情同意书者。 排除标准：严重心脏病或肝肾功能不全者、 高热或急性上呼吸道感染者、孕妇；有皮肤 溃疡、接触性皮炎等皮肤疾患者；对天灸药 物过敏者；对天灸胶布过敏者。 (3)动物实验研究实施重复原则的措施 选用相同的动物：包括品系、性别、周 龄、体重、清洁度、饲养条件及产地等。 保证造模相同：选用相同的动物、试剂 、造模时间、造模步骤、饲养条件等。 尽可能给予类似的治疗或刺激 ：如治疗 组大鼠需要接受电针刺激而进行一定的固 定，则模型对照组大鼠也应该进行相同的 固定 ，但不作治疗。 4盲法的原则 (1)盲法(blind method)的概念和意义： nA概念：指临床研究过程中，指标的观 测、数据的收集和结论的判断，应在不知 道研究对象的分组前提下进行。 nB意义：为了克服可能来自研究者或受 试者的主观因素所导致的偏倚。 (2)盲法的实施 盲法的种类 种类类研究者受试试 者 优优缺点 单单盲 法 知情不知情 可避免受试试者主观观因素 所致的偏倚；但无法避免 研究者方的偏倚。 双盲法 不知情 不知情 很大程度减少了双方主观观 因素所造成的偏倚。 实施双盲方法的具体要求 首先是治疗方面(如药物剂型与给药方 法)：实施双盲方法要求各组的药物在外 观的形状、大小、颜色及给药的途径、方 法、次数上保持一致。 若实验药与对照药的剂型不一样： 实验药+与对照药剂型一样的安慰剂 对照药+与实验药剂型一样的安慰剂 并分别编上密码，称之为“双盲双模拟”法。 双盲方法的管理： u实施双盲法过程中，需要有“局外” 的管理、监督者：仅参与设计、药 物编码的控制与保密和资料的保管 分析等，并不直接参加临床研究的 观测和数据收集。 u临床研究结束并完成数据分析时， 密码控制者予以“揭盲”，“揭盲”时 应有主要研究人员在场。 基于PET研究针刺后三里治疗AD模型大鼠的机制 第二节、实验针灸学的研究方法 古今文献研究 临 床 研 究 实 验 研 究 一、文献研究 资料收集资料阅读 资料积累 分析 文献研究 表述(综述) 确定相关 检索内容 泛读+精读 记摘要 记重点 文题 摘要 前言 正文 总结 参考文献 查阅中英 文文献 二、临床研究 (一)临床研究的对象和特点 u1对象：患者为对象，以临床疗效观察、分析 或对比为主，研究者通过科学构思和严密设计 ，严格控制各种因素，按预先确定的诊断指标 选定对象，施以标准化的处理(预定治疗)方法 ，在预定的时间内，按预定的疗效判断标准进 行疗效评估、分析或比较。 u2特点：具有较详细的临床资料，相对统一的 诊断和疗效判定标准，较固定的治疗方案，并 对有关资料、治疗结果进行统计分析，得出符 合事实的结论。 分类类概念特点质质量控制 1、前瞻 性临临床研 究 研究者根 据选题选题 和 设计设计 的要 求而进进行 的研究。 明确的研究目的， 周密的研究计计划， 合理的观观察指标标， 按设计设计 要求详细记详细记 录临录临 床资资料，通过过 对这对这 些资资料的整理 归纳归纳 、统计统计 。 主要取决于事先 的选题选题 、设计设计 以及实实施；常与 研究者的研究方 法、条件、设备设备 等因素有关。 2、回顾顾 性研究 属文献研 究的范畴 。 对对已有的临临床资资料 按统统一的标标准进进行 整理分析。 资资料是否翔实实、 全面，统计统计 方法 是否正确。 (二)临床研究的分类 3、循证医学：近年来，循证医学 (Evidence Based Medicine，EBM)方法在 临床研究中也得到一定的使用。它重视从 系统研究中获取依据，使研究的结论建立 在具有说服力和充分证据的基础上，从而 使临床的诊疗手段或方法更具有效性和安 全性。 u特点：多中心、大样本、统一标准、数据 统一处理。 （三）针灸临床研究的题材 种类类举举例特点 穴位的疗疗 效观观察 穴位的效应应性 治法的疗疗 效观观察 长长强穴穴位埋线线治疗疗 前列腺患者60例疗疗效 观观察 一般为为多种方法组组合 新技术术或 新仪仪器的 应应用 某种新技术术方法或新仪仪 器治疗疗某些疾病的疗疗效 观观察与评评价 经验总结经验总结 研究 欧阳群教授穴位埋线经线经 验选验选 集 名老针针灸医生临临床经经 验验的总结总结 和应应用研究 。 （四）临床研究论文的结构特点 引言 阐阐述临临床研究课题课题 的目的和意义义，以及与本课题课题 研 究相关的背景资资料 临临床 资资料 病例来源，病例数，性别别，年龄龄，病程，中西医诊诊 断及分型（分期），临临床表现现，实验实验 室或特殊检查检查 方法 观观察方法（观观察内容、观观察指标标、观观察条件和仪仪器 ）、治疗疗方法（针针灸取穴、使用针针具、针针刺手法、 治疗时间疗时间 、刺激参数）及疗疗效判定方法（国际际或全 国统统一标标准） 结结果 将各种观观察结结果用文字、表格、图图片等形式完整、 真实实的表现现出来 讨论讨论 研究者对临对临 床研究结结果的进进一步说说明和分析。 注意事项 u 临床研究选题要尽量具体明确。 u 论文写作时还应重视论文素材的真实性 。 u 另外，为了提高临床研究的质量，应遵 守 课题设计的基本原则，设立对照组，有 比较才有鉴别。 u 还应注意临床研究报道中，不仅可总结 成功的经验，也可报道失败的教训。 三、实验研究 1概念： 实验研究(experimental research)是根据 课题研究目的，利用仪器和设备对研究对 象进行积极的干预，人为地变革、控制或 模拟研究对象，以便在最有利的条件下对 其进行观察，从而获得经验事实的一种方 法。 (一)针灸学实验研究的对象 针灸学实验研究的对象包括两类，一 是人，二是动物。 1. 对人的研究除临床研究中观察针灸对疾 病状态下人体一些客观指标(实验室检查) 的影响外，亦可主要观察不同的针灸方法 、不同腧穴、不同针灸处方对正常人体生 理参数的调节和影响，以指导针灸的临床 应用。 B动物实验研究：是医学研究中最常用 的研究方法之一，它能弥补临床研究之不 足，能进行许多在人身上不能进行的研究 (特别是创伤性研究)，获得许多人体研究 中无法取得的信息和认识，有助于研究向 纵深发展。 针刺对糖尿病大鼠海马和杏仁核C