需氧革兰阳性杆菌检验.ppt

第13章 需氧革兰阳性杆菌 芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌 李斯特菌属产单核李斯特菌 丹毒丝菌属红斑丹毒丝菌 加特纳菌属阴道加特纳菌 第一节 炭疽芽胞杆菌 引起动物和人类炭疽病 是人类历史上第一个被发现的病原菌，俗 称炭疽杆菌 一、临床意义 1.致病物质 荚膜 抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散 炭疽毒素 保护性抗原、致死因子、水肿因子 2. 所致疾病 炭疽病： 传染源：患病食草动物及其 制品或被污染物 传播途径：接触皮肤炭 疽 食用肠炭疽 吸入肺炭疽 可并发败血症，死亡率极高 3. 免疫力 持久性免疫力 二、生物学特性 形态与染色 致病菌中最大的G+粗大杆菌，两端平切 、排列呈竹节状 有毒株有荚膜 芽胞在有氧条件下形成，呈椭圆形，小 于菌体，位于菌体中央 无鞭毛 培养特性 需氧 营养要求不高 在普通培养基中生长旺盛 菌落直径2mm4mm 灰白色、无光泽、不透明、 扁平、边缘不整齐的粗糙型 在低倍镜下观察菌落边缘呈 “卷发状” 在液体培养基中呈絮状沉淀生长 明胶培养管371824h表 面液化成漏斗状，由于细菌沿穿 刺线向四周扩散形成“倒松树状 ”。 抗原性 细菌性抗原 菌体多糖抗原 荚膜多肽抗原 芽胞抗原 炭疽毒素 保护性抗原 致死因子 水肿因子 抵抗力很强 耐高温 干燥土壤、皮毛中存活数年至几十年 对碘和氧化剂敏感 对青霉素等敏感 三、微生物学检验 检验程序 见图13-2 标本的采集与处理 皮肤炭疽：病灶深部标本/分泌物 肺炭疽：痰、血液 肠炭疽：粪便、呕吐物 脑血炭疽：脑脊液、血液 其它：内脏、耳、舌尖、淋巴结、污染物等 标本直接检查 1、直接镜检 2、荚膜荧光抗体染色 荧光显微镜 3、核酸检测 PCR、核酸杂交 分离培养与鉴定 1、分离培养 血琼脂平板 普通琼脂平板 2、鉴定 形态学特征 生化反应 见表13-1 噬菌体裂解试验 串珠试验 青霉素串珠试验：炭疽杆菌在含微量（0.05 0.5U/ml）青霉素的培养基上， 37 6h，细胞 壁合成受阻，细胞膜受胞质压力膨出，其形态 变异为大而均匀的圆球形，呈串珠状排列。 类炭疽无此现象 青霉素抑制试验 炭疽芽胞杆菌一般在含5U/ml的青霉素平 板上仍能生长，在含10、100U/ml青霉素 的平板上受到抑制而不生长。 串珠和青霉素抑制联合试验 荚膜肿胀试验等 荚膜肿胀试验 1 ） 待测菌 待测菌 2）炭疽荚膜抗血清 兔血清 3） 1%亚甲蓝 1%亚甲蓝 4）加盖玻片，湿盒，室温510min 5）镜检：蓝色细菌周围可见厚薄不等、 边界清晰的环状物为阳性 主要引起食物中毒 以夏秋季最为多见 引起的食物中毒有两型：腹泻型和呕吐型 一、临床意义 第二节 蜡样芽胞杆菌 二、生物学特性 1、形态染色 革兰阳性大杆菌，两端较钝圆 多呈链状排列 可形成芽胞 引起食物中毒的菌株多为周毛菌 不形成荚膜 2、培养特性 营养要求不高 形成较大、灰白色、粗糙似毛玻璃状或白蜡状 的菌落 在血琼脂平板上呈溶血 三、微生物学检验 检验程序 见图13-5 标本采集 排泄物、呕吐物和可疑食物 标本直接镜检 分离培养与鉴定 1、活菌计数 涂布法 倾注平板法 细菌数大于105个/克或大于105个/毫升，即 有 发生食物中毒的可能 2、分离培养 普通琼脂平板 血琼脂平板 3、鉴定 依据形态、染色、菌落特点、生化反应、 血 清学试验等 药敏试验 第四节 阴道加特纳菌 一、临床意义 在正常妇女阴道内也可检出 可引起细菌性阴道病 也能引起新生儿败血症和软组织感染 二、生物学特性 革兰染色性视菌株 和菌龄不同而异 易呈多形性 营养要求较高 形成圆形、光滑、 不透明，针尖大小 的菌落 三、微生物学检验 1、检验程序 见图13-8 2、标本采集 阴道分泌物 3、标本直接检查 湿片镜检、染色镜检、pH测定、胺试验 4、分离培养与鉴定 5、药敏试验 第三节 产单核细胞李斯特菌和红 斑丹毒丝菌 一、产单核细胞李斯特菌 1、临床意义 传染源：健康带菌者 传播途径：粪-口途径、胎盘、产道、直接接触 致病物质：溶血素、菌体表面成分 引起疾病：传染性单核细胞增多症、脑膜炎、 菌血症、食物中毒 2、生物学特性 革兰阳性短小杆菌，成双排列，有鞭毛 营养要求不高，菌落小，呈灰白色 耐盐、耐碱，对酸、热、消毒剂敏感 3、微生物学检验 检验程序 见图13-6 标本采集 血液、脑脊液、分泌物、咽喉拭子、羊水和动 物内脏等 直接镜检 分离培养与鉴定 药敏试验 检验结果分析与报告 二、红斑丹毒丝菌（俗称丹毒杆菌） 1、临床意义 是猪和其他动物的致病菌，人接触感染动物或皮 革而感染。主要感染疾病为类丹毒（是一种急性 的但进展缓慢的皮肤疾病），常发部位：手部。 有时可引起关节炎、急性败血症、心内膜炎和食 物中毒。 2、生物学特性 革兰阳性细小杆菌，成单、成对或小丛状 排列。 在固体培养基上可形成光滑型和粗糙型两 种菌落。 3、微生物学检验 检验程序 见图13-7 标本采集 病灶渗出液、血液、关节滑膜、心瓣膜等 直接镜检 分离