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文档简介
再分化 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合 1.概念: 是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程。又叫细胞杂交 融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信 息的单核细胞,称为杂交细胞。 不同DNA的 两个细胞 融合 有丝分裂 两个完整的杂 交细胞 灭活的病毒 ? 这是什么? ? 用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程 2.过程: .原理: 细胞膜的流动性。 .诱导方式: 物理法:振动、离心、振动、离心、电激电激 化学法:聚乙二醇(聚乙二醇(PEGPEG) 生物法:灭活的病毒 使远缘杂交成为可能; 主要用途:制备单克隆抗体制备单克隆抗体 3.意义和应用: 二、单克隆抗体 1.传统制备抗体的方法 向动物体 内反复注 射某种抗 原 动物 产生 抗体 从动物 血清中 分离抗 体 特点:产量低、纯度低、特异性差 2.制备过程: 诱导其融合的方法有哪些 融合后培养液中有哪几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞,杂交 瘤细胞有何优点 注射抗原的目的是什么 为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测,多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法 4、优点: 特异性强、灵敏度高 、可大量制备 三、单克隆抗体的应用 、可用于作为诊断试剂 、可用于疾病治疗和运载药物 1、动物细胞融合过程 2、单克隆抗体制备过程 存在两次筛选:第一次用选择培养基选出杂交 瘤细胞 第二次筛选能产生抗体的杂交 瘤细胞 1、只能使动物细胞融合的常用诱导方法是( ) APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心 2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合, 得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗 体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞 3、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列 实验步骤中错误的是( ) A将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B 淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细 胞 C用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交细胞,并从中选出能产生所需抗体 的细胞群,培养后提取单克隆抗体 4. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融 合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D 注射抗原的目的是什么? 使小鼠产生免疫反应,获得相应的B淋 巴细胞 物理方法:离心、振动、电刺激 化学方法:聚乙二醇(PEG) 生物方法:灭活的病毒 最常用的方法是:灭活的病毒诱导 最常用的试剂是:聚乙二醇 融合后培养液中有哪几
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