CART培训课件.pptx

主讲人: 张爽 2015-4-16 CAR-T细胞治疗的介绍 目 录 1 2 3 4 5 6 相关概念介绍 文献研究 未来展望 CAR结构 T细胞活化 CAR-T细胞治疗的流程 1. 相关概念介绍 CAR-T细胞治疗:利用基因工程修饰外周血T细胞，使其表达嵌合抗原受 体来特异性的识别肿瘤相关性抗原的方法。 MHC：由一群紧密连锁的基因群组成，定位于动物或人某对染色体的特定区 域，呈高度多态性。其编码的分子表达于不同细胞表面，参与抗原递呈，制 约细胞间相互识别及诱导免疫应答。 T细胞：胸腺依赖性淋巴细胞是淋巴细胞的主要组分，它具有多种生物学 功能，如直接杀伤靶细胞、辅助或抑制B细胞产生抗体，对特异性抗原和促 有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等，是身体中抵御疾病感染、肿瘤 形成的“斗士”。 2. T细胞活化 TCR CD 3 MHC 共刺 激 因 子 细胞因 子刺 激 CA R CART细胞 治疗 的思 路 承担T细胞识别抗 原的重任，结构 T细胞 第一信号 3. CAR结结构 识别肿瘤表面抗原的单链抗体（scFv）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序构成。 目前, CAR的信号域已从第一代的单一信号分子发展为包含CD28、CD137等共刺激分子的多信号 结构域(第二、三代), 临床应用广泛。 嵌合抗原受体的演化 第一代CAR：由识别肿瘤表面抗原的单链抗体（scFv）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序（通称为CD3 ）组成。缺点：T细胞增值时间短，细胞因子分泌率低。 第二代、第三代CAR：引入了共刺激的双信号序列。目的：提高T细胞的细胞毒活性、增值性与存活时间、 促进细胞因子的释放。 CAR-T细胞治疗优势 1. 治疗更精准 应用基因修饰病人自体的T细 胞，利用抗原抗体结合的机 制，能克服肿瘤细胞免疫逃 逸，让肿瘤细胞无所逃遁； 2. 多靶向更精 准。 CAR既可以利用肿瘤蛋白质 抗原，又可利用糖脂类非蛋白 质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点 范围。CAR-T细胞作用过程 不受MHC的限制 。 3.杀瘤范围更 广 鉴于很多肿瘤细胞表达相同 的肿瘤抗原，针对某一种肿 瘤抗原的CAR基因构建一旦 完成，便可以被广泛利用； 4. 杀瘤效果更 持久 促进T细胞增殖与活化的基因 序列，能保证T细胞进入体内 后还可以增殖。 免疫记忆功能，可以长期在体 内存活。 4. CAR-T细胞治疗流程 CAR-T细胞治疗过程和自体骨髓干细胞移植相似 (Annu.Rev.Med,2014) 文献介绍 研究病人的基线特征 方法 自体T细胞结合CD19靶向的嵌合抗原受体慢病毒载体 （CTL019 ） 复发或难治性 ALL患者(30名患者) (0.76106-20.6106 CTL019 cells/kg ) 免疫应答 毒性效应扩增数持久性 CTL019 T cells 注入 检测 CTL019细细胞生存率 Figure 1.图A注入CTL019细胞后在6个月期间的 无事件生存率为67%，完全生存率为78% (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) CTL019细细胞的持续续性 Figure 2. CTL019持久性 图 A.： 流式检测外周血样中CTL019-阳性 T 细胞（1-25号儿童和26-30号成年人） 图 B ：通过KaplanMeier curve曲线检测外周血和骨髓， 6个月时，患者获得CTL019持续性 的概率为68% (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) CTL019细细胞的扩扩增 Fig. 2C 通过实时定量PCR检测CTL019细胞在体内增殖，并可在响应患者的血液、骨髓和脑脊液中检 测到高水平的增值。 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 不良反应应 Figure 3. B细胞发育不全 无复发患者B细胞发育不全的概率为73% 。延迟性B细胞再生障碍 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 不良反应 Figure 4. 相关的细胞因子释放症 CTL019 细胞 注入病人28天后，IL-6大量 释放。所有患者都有细胞因子释放综合症 ，其中27%的患者症状较严重，这与输注 之前疾病负荷较高相关，这种症状经抗白 细胞介素6受体抗体塔西单抗有效治 愈。 (The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014) 结论结论 1. 嵌合抗原受体抗CD19修饰的T细胞疗法对 治疗复发和难治型ALL是有效的。 研究中30位接受此类治疗的急性淋巴细胞白血病病人中，有27位 病人其癌症迹象消失，完全缓解率达到90%,多数持续性长达24 个月，6个月无症状生存率未67%，2例在脑脊液中检测到肿瘤 细胞的中枢神经系统（CNS）疾病患者在CART治疗后疾病消 除，重要的是该组患者无复发。 2. CTL019和高缓解率有关，即使是干细胞移植失 败的患者也有效。 02 01 细胞因子风暴 T细胞在杀死其它细胞，会释放很多细胞因子，炎症反应。 由于CAR-T杀癌细胞太快，在局部产生超大量的细胞因子， 如白介素6，引发起剧烈的免疫反应。 脱靶效应 CAR修饰的T细胞对靶抗原具有高亲和力，识别并且 结合这部分抗原，导致对正常组织的异常免疫反应， 造成器官损害。 CAR-T疗法的临床风险 诱人的应用前景 寻找其他分子 靶点 提高CAR有效性 和安全性 CAR修饰的T细胞肿瘤免疫治疗理 论上的优势和临床前期实验结果 寻找肿瘤特异性抗原作