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文档简介

1、培养基:按物理状态分为 固体 和 液体 培养基,其中 固体 培养基需加琼脂;按用途分为 选择 和 鉴别 培养基。2、菌落:所用培养基是 固体 (物理状态分),所属生命系统层次 种群 。3、微生物的营养包括那几类:4、培养乳酸菌时需要在培养基中添加 维生素 ,乳酸菌在细胞结构上与酵母菌的本质区别是 有无核膜包被的真正的细胞核,新陈代谢类型是 异养需氧型 。5、培养霉菌时需将培养基的PH调到 酸性 ,培养细菌时需将培养基的PH调到 中性或微碱性 ,培养厌氧细菌时需要提供 无氧 条件。6、获得纯净培养物(目的微生物)的关键-防止外来杂菌的入侵,在无菌技术中常用的消毒方法及对象有哪些?常用的灭菌方法及对象有哪些?如对培养基应选择什么方法?消毒方法:1.煮沸消毒法2.巴氏消毒法3.使用化学药剂消毒:用75%的酒精擦拭双手灭菌法:1灼烧灭菌:微生物的接种工具,如:接种环 接种针2.干热灭菌:能耐高温的 需要保持干燥的物品,如:玻璃器皿吸管.培养皿等 3高压蒸汽灭菌:培养基及一些仪器7、制备培养基的过程:计算 称量 溶化 灭菌 倒平板8、平板倒置的原因:1防止皿盖皿盖冷却水倒流入培养基污染培养基2.使培养基保持一定湿度9、大肠杆菌:细胞类型?鉴别方法?异养兼性厌氧型伊红美蓝溶液:菌落呈深紫色并带金属光泽10、常用接种方法:18页接种方法名称平板划线法稀释涂布平板法概念通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。最终目的形成由单个细胞繁殖而来的菌落形成由单个细胞繁殖而来的菌落过程操作关键连续划线 划完灭菌稀释度足够高应用-统计菌落的数目对照设置菌液和无菌水前后自身对照11、菌种保藏方法: 临时保藏 法(温度 4 ), 甘油管藏 法(温度 20 )12、土壤中的一些细菌因为能合成 脲 酶而能分解尿素,反应式: CO(NH2)2+H2O-CO2+2NH3 分离土壤中能分解尿素的细菌用 选择 培养基(用途),氮源 尿素(唯一的),主要的碳源是 葡萄糖 。对分离土壤中能分解尿素的细菌的鉴别方法: 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,指示剂变为红色。13、测定微生物数量最常用的方法 活菌计数法 ,特点 统计的是活菌数 关键是 稀释度足够高,计数方法是在菌落数稳定时,选择菌落数在 30-300 的平板计数,至少对 3 个平板进行重复计算求平均值,至少 3 个平板的菌落数接近才能说明稀释操作比较成功。计算公式是 C*M/V ;另外一种常用的方法是 显微镜直接计数法 ,其特点是 统计的是全部菌落 。14、目的菌的分离:24页目的菌稀释倍数培养温度培养时间细菌104 105 10630-371-2d放线菌103 104 10525-285-7d真菌102 103 10425-283-4d15、果胶的基本单位是 半乳糖醛酸 ,分布在 植物细胞壁及胞间层 ;果胶酶的种类有 多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 果胶酯酶 。16、酶活性的表示方法 单位时间内.单位体积中反应物的减少量 及 产物的增加量 影响酶活性的因素有 温度 、 ph 、 酶的抑制剂 17、探究温度和PH多酶活性的影响:实验步骤,因变量?1搅拌器搅拌苹果泥2将分别装有苹果泥和果胶酶的试管在恒温水浴中保温3加入果胶酶反应一段时间4过滤果汁18、胡萝卜素:分类,应用,性质,分布;提取方法,步骤,试剂;鉴别方法,试剂,对照设计,结果分析;注意事项:干燥温度、时间、?温度不能太高,干燥时间不能太长。为什么?温度太高,干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。干燥方法?烘箱.热风吹 萃取温度、时间、加热方法?为什么?冷凝装置的用途?温度高时间长,水浴加热。有机溶剂都是易燃物,直接使用明火加热容易引起燃.爆炸。滤纸的两边不能 接触 点样操作的要求?点样应快速.细致,注意保持滤纸干燥。19、果酒、果醋制作的比较:果酒制作果醋制作菌种菌种名称酵母菌醋酸菌生长条件及分布糖度高的环境 土壤酸性 变酸的酒面来源葡萄变酸的酒面结构特点真核原核生殖方式有性和无性无性代谢类型异养兼性厌氧性异养需氧型制作原理(反应式)有氧:C6H12O6+6O2-6CO2+6H2O氧气和糖源充足:C6H12O6-3CH3COOH无氧:C6H12O62C2H5OH+2CO2缺少糖源:C2H5OH+O2-CH3COOH+H2O原料糖类糖类或酒精条件控制温度18-2530-35氧气先通后封充足PH酸性酸性时间10-12d7-8d检验初步嗅味或品尝嗅味或品尝进一步显微镜观察测反应前后的ph加入酸性重铬酸钾溶液是否呈现灰绿色显微镜观察实验流程挑选葡萄-冲洗-榨汁-酒精发酵-果酒挑选葡萄-冲洗-榨汁-酒精发酵-醋酸发酵-果醋操作注意事项发酵装置及应用10、常用接种方法:接种方法平板划线法稀释涂布平板法概念通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养最终目的数次划线后培养获得单个菌落涂布稀释度足够高的菌液可以获得单个菌落过程18-19页接种环灭菌-酒精灯旁沾取菌液-划线-接种环灭菌-划线.用灭菌的移液管进行系列稀释-涂布器灭菌-酒精灯旁沾取菌液-涂布操作关键不要将最后一区的划线与第一区相连菌液稀释度足够高应用-活菌计数对照设置重复划3个平板-一个不接种,在相同条件恒温箱中培养接种不同稀释度的菌液的多个平板-未接种的平板在相同条件恒温箱中培养19、果酒、果醋制作的比较:果酒制作果醋制作菌种菌种名称酵母菌醋酸菌生长条件及分布20左右含糖高,偏酸性30-35来源葡萄皮上的野生型酵母菌可从变酸的葡萄酒表面获得菌膜,再培养分离结构特点真核细胞(有细胞壁和液泡)原核细胞生殖方式有性生殖,无性生殖(出芽生殖、孢子生殖)二分裂(无性生殖)代谢类型异样兼性厌氧型异养需氧型制作原理有氧(反应式):氧气和糖源充足:糖直接分解成醋酸无氧(反应式):缺少糖源:乙醇乙醛醋酸(总反应式):3页原料果汁果汁或果酒条件控制温度18-2530-35氧气有氧条件下进行有氧呼吸,大量繁殖无氧条件下进行酒精发酵充足的氧气PH酸性酸性时间10-12d7-8天检验初步酒味(嗅、品尝)观察菌膜的形成、嗅味、品尝进一步酒精(酸性条件下加重铬酸钾-灰绿色)比较PH变化(PH试纸)镜检酵母菌数量镜检醋酸菌实验流程3页操作注意事项及原因1、先洗后去枝梗-防止葡萄皮破损造成污染2、勿反复冲洗-防止果汁流

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