家兔血浆中北豆根碱的高效液相色谱法测定及药动学研究

精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 1 / 7 家兔血浆中北豆根碱的高效液相色谱法测定及药动学研究 作者：朱孝芹，臧亚如，张欢，刘翠哲 【摘要】 目的 建立家兔血浆中北豆根碱（ 对 注给药在家兔体内药动学过程进行分析研究。方法采用乙腈、二氯甲烷沉淀蛋白质并提取药物，采用 谱柱为 18 柱（ 50 5 m ）；流动相为乙腈 水 磷酸 =1684(VVV) ；检测波长 208 温为室温；流速 ml1；动物实验使用家兔 6 只，采用静脉注射给药（ 10 mgk 进行血药浓度测定和药动学参数计算。结果家兔血浆内源物质对药物测定无干扰，在血药浓度 mg1 范围内，浓度对峰面积有良好的线性关系， r= 8，提取回收率大于 85%，方法回收率在 % %之间；日内、日间精密度 0%（ n=5）。北豆根碱在家兔体内的血药浓度 论该法准确、简便、灵敏，可用于北豆根碱在兔体内药动学的研究。 【关键词】 北豆根总碱； 高效液相色谱法； 家兔； 药动学 of in in 精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 2 / 7 in V 08 684), at a ml1. We of in 10 mg1)be r= 8) mg1, 5%, %, 0%(n=5). of in be to is It is of in 豆根为防己科植物蝙蝠葛 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 3 / 7 的干燥根茎，有清热解毒、祛风止痛作用，其有效部位是生物碱，现已知北豆根中含有近二十种生物碱，总碱含量可达1%以上，其中含量最高的生物碱为 含量约占总生物碱的 50%左右 1。临床及实验均证实 2。此外，北豆根碱还有抑制动脉血栓形成 3、抗氧化 4、抗肿瘤等 5作用，具有广泛的应用前景。本实验采用单剂量静脉注射给药的方法，检测北豆根碱在 家兔体内的血药浓度，应用 3 1 仪器与试药 80型台式离心机； 型离心机； 全自动涡流混合器； 效液相色谱仪（ 外 泵， 谱工作站，日本）；北豆根饮片，市售，承德产，经鉴定为蝙蝠葛；北豆根碱，对照品，自制（含量 %）；无水甲醇、磷酸为分析纯；甲醇、乙腈为色谱纯。 2 方法与结果 色谱条件 色谱柱为 18 柱（ 50 5m ）；流动相为乙腈 水 磷酸 =1684(VVV) ；检测波长 208 温为室温；流速 ml1。 对照品储备液精密称取北豆根碱对照品 (60 干燥至精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 4 / 7 恒重 ) 25 量瓶中，用流动相溶解并定容，作为对照品储备液。 样品处理方法 6 精密吸取家兔血浆 1 乙腈 氯甲烷 4 涡混合 5 3 000 r1 离心 15 有机相转入 10 心管 中，剩余水相再加入二氯甲烷 2 法萃取并离心，合并 2 次萃取液， 40 水浴， 渣用流动相 分溶解后， 16 000 r1离心 5 上清液 20 l 进样。 标准曲线的制备取空白血浆 1 离心管中，加入北豆根碱对照品溶液，使其浓度分别为， mg1，按“ 样品处理方法 ” 项下操作，以 M 血药浓度进行回归，其回归方程为： Y = 108X + 103 ， r = 8(n=7) ，线性范围为 mg1。 血浆样品 典型色谱图见图 1 3。 回收率测定分别取空白血浆 1 确加入北豆根碱对照品溶液，配制高中低 3 个浓度的血浆样品，按 “ 样品处理方法 ” 项下操作，使其最终浓度为， mg1，同时配制相同浓度的北豆根碱对照品水溶液进行测定，每个浓度测精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 5 / 7 定 5 次。计算提取和方法回收率。结果见表 1。表 1 浆样品回收率壹（略） 精密度测定将高、中、低浓度的对照品血浆分别进行日内精密度和日间精密度测定。结果见表 2。表 2 浆样品的日内和日间精密度（略） 家兔血浆样品测定健康家兔 6 只，雌雄兼用， 雌兔无孕，体重 () 于耳缘静脉注射给予北豆根碱，剂量为10 mg1。于给药前和给药后 2， 5， 10， 20， 30， 45，60 ， 2， 4， 6， 8， 12 h 在另一侧耳缘静脉采血 ,置肝素化离心管中， 3 000 r1 离心 15 离血浆，贮存备用。血浆样品照 “” 项下处理，测定。将实验结果绘制血药浓度 所示。应用 3 拟和优度（ r）为判别指标，确定血药浓度为二室模型。结果 相关药动学参数见表 3。表 3 药动学参数（略） 3 讨论 家兔静脉注射 10 mg1 北豆根碱后，药物自中央室向周边室分布很快， 约为 5 物从中央室消除也较快， 约为 1 h， 明北豆根碱因脂溶性强而在体内广泛分布。 精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 6 / 7 有文献报道 7 8，北豆根碱口服给药，在大鼠和狗体内存在着胃肠循环， 线明显存在着双峰现象。狗大剂量 (50 mg1)口服给药时，药物消除为非线性， ，重要参数显著改变。但由于种属差异的问题，在兔体内是否也存在这一现 象，尚需进一步研究。 在本实验中，从高效液相色谱图上可以看出，在给定的实验条件下，血浆中杂质不干扰测定，说明本实验的样品处理方和色谱条件可行，通过 3 动学软件处理数据，北豆根碱在家兔体内符合二室模型，可做为人体药动学研究的参考。 【参考文献】 1徐国钧，徐珞珊，何宏贤，等中国药材学 M 国医药科技出版社， 1996. 2 L,D,J. on of in J 1997， 18： 384. 3刘俊田，邱培伦，高小利山豆根碱对实验性血栓形成的影响 J 1991， 12(1)： 33. 4何丽娅，李立中，吴基良，等 J 1997， 28（ 8）： 479. 精品文档 2016 全新精品资料 文范文 独家原创 7 / 7 5叶祖光，王金华，孙爱续，等粉防已碱、甲基莲心碱、蝙蝠葛碱增强长春新碱诱导人乳腺癌 药耐药细胞凋亡 J 2001， 36（ 2）： 96. 6顾世芬，师少军，陈 汇蝙蝠葛苏林碱在