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文档简介

总糖的含量的测定（蒽酮法）一、 实验目的掌握蒽酮比色法测定糖的原理与方法。二、 实验原理蒽酮比色法是一个快速而简便的测定糖方法。蒽酮可以和游离的己糖或多糖中的己糖基、戊醛糖及己糖醛酸起反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620 nm处有最大吸收。蒽酮可与其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当样品中存有含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈红色。对于以上特定的糖类反应较稳定。三、 实验器材1. 吸管2. 试管3. 分光光度计4. 水浴锅5. 电炉6. 电子分析天平四、 实验试剂1 蒽酮试剂：取2 g蒽酮溶于1000 ml体积分数为80 %的硫酸中，当时配制使用。2 标准葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：100 mg葡萄糖溶于蒸馏水并稀释至1000 ml（可滴加几滴甲苯作防腐剂）。3 6 mol/l HCl溶液。4 10 % NaOH溶液：称取10 g NaOH固体，溶于蒸馏水并稀释至100 ml。五、 实验操作1. 制作标准曲线取干净试管7支，按下表进行操作。表 蒽酮比色法测定糖含量的标准曲线制作管号步骤 0123456标准葡萄糖溶液/ml00.10.20.30.40.50.6蒸馏水/ml1.00.90.80.70.60.50.4置冷水中5 min蒽酮试剂/ml4.04.04.04.04.04.04.0沸水浴中准确煮沸10 min，取出，用自来水冷却，室温放置10 min，在620 min比色。A620nm2. 样品的处理（见实验四）取上述实验四的水解液，冷却后用10 % NaOH溶液中和至pH呈中性，然后用蒸馏水定容至100 ml，过滤，取滤液10 ml，用蒸馏水定容于100 ml成稀释1000倍的总糖水解液，用于糖含量的测定。测定时取1 ml总糖水解液测定还原糖的含量（同标准曲线）。样品中糖含量的计算：100%CVw糖的质量分数（%）；C从标准曲线上
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