微生物学实验技术考试大纲.doc

微生物学实验技术考试大纲一、指导思想 检查学生对微生物学基本实验技术的掌握和运用的熟练程度，督促学生复习和巩固实验技能，为进一步学习专业课和从事微生物科研、教学和生产打下扎实的实验基本功。 二、考试方式 实际操作三、考试范围1、 三大类群微生物细菌、放线菌和霉菌的制片观察技术；2、 微生物细胞的大小测定；3、 微生物细胞的显微计数。四、评分批准（附后）第一题 细菌革兰氏染色 评分标准类别项目分值标准扣分1点酒精灯5取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分2取载玻片5从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。不盖瓶盖者扣2分，在灯上长时间烧片扣2分3加蒸馏水5取一滴蒸馏水滴加在载玻片的中央。取量太多者扣1分45取菌涂片10一手拿试管，一手拿接种环，拔取棉塞，接种环经火焰灭菌后，伸入管内，冷却后，开始取一环菌。塞上棉塞。将所取菌均匀涂成一薄层后，将接种环灭菌后放于盒中。棉塞放于桌子上者扣5分。接种环不灭菌取菌者扣5分。接种环灭菌后不冷却直接取菌者取5分。不在无菌圈内进行操作者扣5分。根据所涂片质量酌情扣分。接种环不灭菌放入盒中，扣1分。乱扔于桌子上扣1分。6干燥5风干或在酒精灯上方烤干若离酒精灯太近进行干燥者扣2分7固定5将干燥后的载玻片在酒精灯火焰上固定3次，每次1-2秒。若涂片面朝下在酒精灯上进行固定者扣5分。8初染5加结晶紫覆盖涂片，进行初染1分种，水洗视情况酌情扣分9媒染5加碘液媒染1分钟，水洗视情况酌情扣分10脱色5用95%的酒精脱色30秒，水洗视情况酌情扣分11复染5用番红复染1分钟，水洗视情况酌情扣分12干燥5风干或在酒精灯上方烤干或用吸水纸吸干用吸水纸吸干时若有搓动者，扣2分；在火焰上干燥时，离火焰太近者扣2分13镜检10先用低倍镜，后用高倍镜，再加香柏油，用油浸镜观察。也可直接用油镜进行观察拿低倍镜或高倍镜当油镜用时，扣5分，转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。14结果15正确者得全分不正确者该项不得分15显微镜保养15擦去香柏油沾二甲苯擦擦去二甲苯（重复3次），加罩衣，登记每缺1步扣5分注：每超1分钟扣1分第二题 霉菌制片观察 评分标准类别项目分值标准扣分1点酒精灯5取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分2取载玻片5从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。不盖瓶盖者扣2分，在灯上长时间烧片扣2分34加棉兰取菌40在载玻片的中央滴加一滴棉兰。一手拿平板，一手拿接种针，接种针经火焰灭菌后，伸入平板内，冷却后，开始取菌。根霉挑取菌丝即可。青霉和曲霉需带一点培养基出来。将接种环灭菌后放于盒中。平板拿法不规范者扣5分。接种针不灭菌取菌者扣5分。接种针灭菌后不冷却直接取菌者取5分。不在无菌圈内进行操作者扣5分。取菌不符合规定者，扣5分。接种针不灭菌放入盒中，扣3分。乱扔于桌子上扣3分5加盖玻片5取菌后，用镊子或手取一盖玻片，盖上盖玻片。盖玻片下有气泡扣1分6镜检20用低倍镜或高倍镜观察。转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。7结果15正确者得全分（结合显微镜判断）不正确者该项不得分 缺1个特征扣5分。8显微镜保养10加罩衣，登记每缺1步扣5分注：每超1分钟扣1分第三题 微生物细胞大小测定 评分标准类别项目分值标准扣分1校正30显微镜使用符合标准低倍镜校正结果正确高倍镜校正结果正确转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。每个校正结果不正确，扣2分2点酒精灯5取火柴等点燃酒精灯。灯帽倒扣在桌上。灯帽乱扔扣2分，火柴棒乱丢扣2分3取载玻片5从广口瓶中取出载玻片，盖上瓶盖，烧去片上的酒精。不盖瓶盖者扣2分，在灯上长时间烧片扣2分4加菌悬液5操作正确加量过多扣5分，5加盖玻片5取菌后，用镊子或手取一盖玻片，盖上盖玻片。盖玻片下有气泡扣1分6镜检30用低倍镜或高倍镜观察。测量5个菌体转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。7结果10正确者得全分不正确者该项不得分8显微镜保养10加罩衣，登记每缺1步扣5分第四题 血球计数板法显微计数 评分标准类别项目分值标准扣分1镜检计数板20显微镜使用符合标准转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。2加样品10在计数板上加盖玻片，从其边缘加菌悬液加量过多扣5分，3计数30显微镜使用符合标准镜检5个中格。计数正确转换物镜时，不用转换器者扣2分，调焦时上下移动扣5分，压破载玻片者，该项不得分。