酶联免疫分析检测(LH).doc

蒄薈袀羁莀薇肃膇莆薇螂肀节薆袅芅膈薅羇肈蒇薄蚇芃莃蚃蝿肆艿蚂袁节膄蚁羄肄蒃蚁螃袇葿蚀袆膃莅虿羈羆芁蚈蚇膁膇蚇螀羄蒆螆袂腿莂螅羄羂芈螅蚄膈膄螄袆羀薂螃罿芆蒈螂肁聿莄螁螁芄芀莈袃肇膆莇羅节蒅蒆蚅肅莁蒅螇芁芇蒄羀肄芃蒃肂羆薁蒃螂膂蒇蒂袄羅莃蒁羆膀艿蒀蚆羃膅蕿螈膈蒄薈袀羁莀薇肃膇莆薇螂肀节薆袅芅膈薅羇肈蒇薄蚇芃莃蚃蝿肆艿蚂袁节膄蚁羄肄蒃蚁螃袇葿蚀袆膃莅虿羈羆芁蚈蚇膁膇蚇螀羄蒆螆袂腿莂螅羄羂芈螅蚄膈膄螄袆羀薂螃罿芆蒈螂肁聿莄螁螁芄芀莈袃肇膆莇羅节蒅蒆蚅肅莁蒅螇芁芇蒄羀肄芃蒃肂羆薁蒃螂膂蒇蒂袄羅莃蒁羆膀艿蒀蚆羃膅蕿螈膈蒄薈袀羁莀薇肃膇莆薇螂肀节薆袅芅膈薅羇肈蒇薄蚇芃莃蚃蝿肆艿蚂袁节膄蚁羄肄蒃蚁螃袇葿蚀袆膃莅虿羈羆芁蚈蚇膁膇蚇螀羄蒆螆袂腿莂螅羄羂芈螅蚄膈膄螄袆羀薂螃罿芆蒈螂肁聿莄螁螁芄芀莈袃肇膆莇羅节蒅蒆蚅肅莁蒅螇芁芇蒄羀肄芃蒃肂羆薁蒃螂膂蒇蒂袄羅莃蒁羆膀艿蒀蚆羃膅蕿螈膈蒄薈袀羁莀薇肃膇莆薇螂肀节薆袅芅膈薅羇肈蒇薄蚇芃莃蚃蝿肆艿蚂袁节膄蚁羄 酶联免疫分析检测（LH）人促黄体生成素概述人促黄体生成激素（hLH）是由垂体前叶分泌的糖蛋白激素，其分子量大约为30000，由两条多肽链（即a和b亚单位）组成。LH的a亚单位由89个氨基酸残基组成，并与FSH和hGG的a亚单位的结构相同，b亚单位在上述激素之间是不同的，从而赋予各激素各自的生物及免疫特性。在女性体中，LH在卵泡期与FSH一起促进卵泡的成熟、雌性激素的合成和分泌：促进排卵和使排卵后的卵泡转变为黄体。促进间质生长。并促进黄体合成和孕激素与雌性激素的分泌。男性LH促进睾丸间质细胞增生，并促进其合成和分泌睾酮。由于LH和FSH的作用提互相协同的，故二者常同时测定。LH增高见于Klindfelter综合症，Turner综合症，性腺切除后及促性腺激素产生肿瘤；减低见于西蒙氏病，席汉氏综合症，肥胖性生殖器退化综合症，垂体性侏儒，睾丸肿瘤，卵巢肿瘤，神经性厌食及使用雌激素后。原理本公司生产的LH微孔法检测试剂盒采用双抗体夹心酶标免疫技术定性检测血清中hLH水平，这种方法应用高亲合性、高选择性、高敏感度度的单克隆及多单克隆hLH抗体配伍，快速检测出标本中hLH水平，此方法使标本、酶标抗体及固相抗体同步反应，当标本中含有hLH时，特异性的形成固相抗体抗原酶标抗体复合物，并结合在微孔壁面，洗去多余的酶标抗体，再加入酶底物显色。试剂组成1. 微孔反应板：96孔，用抗人促黄体生成激素多克隆抗体包被孔反应板，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2. 酶结合物：一瓶，5ml，含抗单克隆与辣根过氧化物酶的结合物，含有0.02%柳硫汞及蛋白稳定剂,2-8保存,有效期内稳定.3. 标准品:七瓶,每瓶1ml,含人促黄体生成激素浓度分别为0,5,10,25,50,100,200mIU/ml的血清标准品,含有0.02%柳硫汞及蛋白稳定剂,2-8保存,有效期内保持稳定.4. 显色A;一瓶,7.0ml含过氧化氢和稳定剂，2-8保存,有效期内保持稳定.5. 显色B：一瓶，7.0mL,含色素基质和稳定剂，2-8避光保存,有效期内保持稳定。6. 洗液：一瓶，25ml，10倍浓缩洗液，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存,有效期内保持稳定。7. 终止液：一瓶，7ml，含INU2SO4溶液2-8保存,有效期内保持稳定。注：病人标本无需特殊制备（前处理）操作步骤1. 将所需用量的微孔条放置在支架上：2. 在分别注明标号的反应微孔中依次加入50u标准品，质控血清，待测定标本（用微量加样器加样）；3. 每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4. 在37水浴箱或温箱中温育60分钟。5. 将各孔液体弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次冲洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸水纸上吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁 6. 每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀,在室温(18-25)下避光反应15分钟.7. 显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;8. 以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体用空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；9. 应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。结果计算1. 在普通坐标纸上，以标准品吸光度对各个标准品浓度（mIU/ml）用图，吸光度值作Y轴，浓度作X轴，画出标准曲线。2. 在标准曲线上，以各待测标本的吸光度值，查出其对应的hLH的浓度。3. 所有稀释的标本需乘以相应的稀释倍数来进一步推算其浓度。正常值范围 每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室正常值范围。下列正常值范围。下列正常值范围为本公司提供的参考值：儿童：2mIU/Ml男性：青春期3.4-5.0mIU/ml 成人 2.6-12.6 mIU/ml女性:卵泡期5-30 mIU/ml 排卵期25-150 mIU/ml 黄体期3-30 mIU/ml 绝经期30-130 mIU/ml技术指标:灵敏度:2 mIU/ml注意事项:1. 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2. 试剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程室温18-25。3. 定期检验移液器是否准确。4. 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5. 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6. 注意冼板时间，每次冼后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7. 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免避免仪器内有液体未发现影响结果。8. 六项指标相互关联，遇异常情况及时与临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9. 试剂使用后应及时放回冰箱。10. 显色B存取时，应避免光线直接照射。11. 未用完的微孔板放在封口袋内保存。酶联免疫分析检测（FSH）促卵泡生成激素概述促卵泡生成素（FSH）可刺激睾丸支持细胞发育，并促进产生一种能结合雄性激素的蛋白质。通过这种蛋白质 ，可使发育生殖细胞发育，并分化为成熟的精子。促卵泡生成素（FSH）对女性有促进卵泡生成、成熟，促进颗粒细胞增值、引起卵泡分泌，与LH协同作用促进排卵等作用。它是研究和判断下丘脑垂体性腺轴功能的检查方法，用于预测排卵时间、对内分泌治疗的监测，对不孕症的诊断都有重要的意义。原理本公司的促卵泡生成素试剂盒采用双抗体夹心法测定FSH。FSH由a亚基和B亚基组成。试剂盒中将抗a亚基的单克隆抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体，用辣根过氧化物酶标记抗B亚基的单克隆抗体若检测标本中含FSH，则FSH被微孔板及酶联捕获。洗去多余的酶联抗体，再加入酶底物显色。试剂组成1. 微孔反应板：96孔，用抗促卵泡生成激素单克隆抗体包被微孔反应，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2. 酶结合物：一瓶，5ml，含促卵泡生成激素单克隆抗体与辣根过氧化物酶的结合物，含有防腐剂及蛋白稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。3. 标准品：六瓶，每瓶1ml，含促卵泡生成素浓度分别为0，5，10，25，50，100mIU/ml的血清标准品，含有防腐剂及蛋白稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。4. 显色A：一瓶，7ml含过氧化氢和稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。5. 显色B：一瓶，7ml，含色素基质和稳定剂，2-8避光保存，有效期内保持稳定。6. 洗液：一瓶，25ml，10倍浓缩洗液，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7. 终止液：一瓶，7ml，含1NH2SO4溶液，2-8保存，有效期内保持稳定。注：病人标本无需特殊制备（前处理）操作步骤1. 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、在分别注明标号的反应微孔中依次加入50ul标准品，质控血清，待测标本（用微量加样器加样）；3、每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4、在37水浴箱或温箱中温育60分钟；5、将各孔液弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁;6、 每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;7、 显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;8、 以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体作空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；9、 应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。结果计算1、 以标准品浓度（mIU/ml）为横坐标，OD值为纵坐标，在对数坐标纸上绘制标准曲线。2、 在标准曲线上查出待测标本浓度。正常值范围 每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室促卵泡生成素正常值范围。下列正常值范围为本公司提供的参考值： 儿童：5mIU/ml成人 男性：2.5-15mIU/ml 女性:0.6-17.2 mIU/ml 技术指标灵敏度:2 mIU/ml注意事项1、 实验室水箱温度：37，实验前必须检查。2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-25。3、 定期检验移液器是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。血清泌乳素试剂概述人体的催乳素（Prolactin）是由198个氨基酸残革组成的单链多肽激素，分子量约22000道尔顿。它是在下丘脑调节垂体前叶分泌的。在生命的头六周血清催乳素明显增高。然后，在儿童期的大部分时间内催乳素的浓度逐渐下降并保持在大约5ng/ml的平均浓度上。男女从发育期前到发育期再到成年期，催乳素浓度进行性地增高，一直达到大约20ng/ml。尽管成年女子与男子之间的浓度值有相当一部分重叠，但是通常前者比后者高。孕妇、口服避孕药或哺乳妇女高。绝经后妇女的催乳素浓度下降，低于那些正常月经周期妇女的数值。许多和垂体腺瘤无关的病理情况也可以伴随催乳素的升高。随着慢性肾功能衰竭的加剧，循环中的催乳素浓度也会发生进行性升高。但慢性疾病患本身不出现催乳素浓度的异常。有时高催乳素血症可在原发性甲状腺功能低下的病人中见到。原理 在包被有抗人PRL抗体的微孔中加入标本和酶结合物保温。洗掉未结合的组分。结合上的酶结合物通过与过氧化氢和四甲基联苯胺反应，显色的光密度与最初结合在微孔中的PRL成比例。试剂组成1、 微孔反应板 96孔2、 酶结合物 1瓶，11ml3、 标准品 7瓶，浓度分别为0，5，10，25，50，100，200ng/ml4、 底物A 1瓶，7ml5、 底物B 1瓶，7ml6、 终止液 1瓶，7ml7、 浓缩洗涤液 1瓶，25ml，10倍浓缩洗涤液，作用前用蒸馏水稀释10倍。操作步骤1、 取所需用量的反应微孔条，用加样器加入25ul标准品（0，5，10，25，50，100，200ng/ml）质控血清及待测标本。2、 每孔分别加入100ul酶结合物，充分混匀，放置37水浴中反应60分钟。3、 将各孔液弃净，用洗液或蒸馏水冲洗洗五次。4、 扣干后，每孔加1滴（50ul）显色液A，再加工厂滴（50ul）显色液B，充分混匀，在室温下避光15分钟。5、 每孔加1滴（50ul）终止液，并混匀。6、 用酶标仪在450nm波长读记吸光度，并计算出标本浓度。敏感度2ng/ml（按照WHO第一国际标准）正常参考值男性：6.44 0.94-11.94ng/ml女性:14.27 8.39-20.15ng/ml注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、 定期检验移液是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。血清睾酮试剂概述内分泌腺所合成与释放的性激素，通过血液循环传送到远距离的特异靶组织和靶器官，引起特异的生物学效应。检测这些激素有助于对男性病，特别是男性不育症综合分析。睾酮（Testo）是睾丸细胞合成，并主要由睾丸，肾上腺和卵巢分泌；其主要功能是促进男性第二性征的发育和维持。在临床上血清中障碍、类无睾症、Reifenstein综合症、女子性征异常、性早熟、性幼稚等的诊断有帮助。尤其对于完全性性早熟和不完全性性早熟症的确诊意义最大。女性多毛症患者的血清睾酮值常常高于正常值，垂体前叶功能减退时血清睾酮水平可能降低。原理本公司的睾酮试剂盒采用抗体杯竞争法测定血清中睾酮水平。试剂盒中将抗睾酮抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体，酶结合物含有用辣根过氧化物酶标记的睾酮抗原。反应过程中，若检测标本含有睾酮，则与标记抗原竞争固相抗体，形成跑龙套相抗体抗原（睾酮）或固相抗体标记抗原（睾酮）复合物，并结合在微孔壁表面，洗去多余抗原，再加入酶底物显色。试剂组成1、微孔反应板：96孔，用抗睾酮抗体包被微孔反应板，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，4ml，含睾酮与辣根过氧化物酶的结合物，含有0.02%柳硫汞及蛋白稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：六瓶，每瓶1ml，含睾酮浓度分别为0，0.2，0.6，2.0，6.0，25.0ng/ml的血清标准品，含有0.02%柳硫汞及蛋白稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。4、 显色A：一瓶，7ml含过氧化氢和稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。5、 显色B：一瓶，7ml，含色素基质和稳定剂，2-8避光保存，有效期内保持稳定。6、 洗液：一瓶，25ml，10倍浓缩洗液，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7、 终止液：一瓶，7ml，含1NH2SO4溶液，2-8保存，有效期内保持稳定。注：病人标本无需特殊制备（前处理）操作步骤1、 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、在分别注明标号的反应微孔中依次加入50ul标准品，质控血清，待测标本（用微量加样器加样）；3、每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4、在37水浴箱或温箱中温育60分钟；5、将各孔液弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁;6、每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;7、显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;8、以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体作空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；9、 应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。结果计算1、 分别计算出各标准品，质控及病人标本的B/B0%。B=标准品、标本OD值B0=标准品“0”点OD值 2、 以标准品浓度（ng/ml）为横坐标B/B0%为纵坐标，在对数坐标纸上绘制标准曲线。3、 在标准曲线上查出待测标本浓度。正常值范围 每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室睾酮正常值范围。下列正常值范围为本公司提供的参考值：男性：青春期前0.2ngl 成人3-10ng/ml女性:青春期前0.2ng/ml成人0.2-0.8ng/ml绝经期0.35ng/ml技术指标灵敏度:0.1g/ml注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、 定期检验移液是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。血清孕酮试剂概述孕酮是一种重要的性激素，不仅在月经周期的调节中起重要作用，也是维持妊娠所必须的一种激素，由卵巢分泌，主要功能是为促进子宫内膜增厚，腺体增生，为受精卵植入作准备。血清孕酮的增高于葡萄胎，轻度妊娠高血压综合症、糖尿病孕妇，多胎、厚发性高血压、先天性17-a羟化酶缺乏症。先天性肾上腺增生、卵巢颗粒层膜细胞瘤、卵巢脂肪样瘤。孕酮的降低见于先兆流产、黄体功能不良、胎儿发育迟缓、死胎、严重的妊娠高血压综合症。原理本公司的孕酮试剂采用抗原标记竞争法测定血清中孕酮的水平。试剂盒中将抗体孕酮抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体一抗菌素原（孕酮）或固相抗体一标记抗原（孕酮 ）复合物，并结合微孔壁表面，洗去多余的标记抗原，再加入酶底物显色。试剂组成1、微孔反应板：96孔，用抗孕酮抗体包被微孔反应板，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，4ml，含孕酮与辣根过氧化物酶的结合物，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：六瓶，每瓶1ml，含孕酮浓度分别为0，0.5，2.5，10，25.0ng/ml的血清标准品，2-8保存，有效期内保持稳定。4、显色A：一瓶，7ml含过氧化氢和稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。5、显色B：一瓶，7ml，含色素基质和稳定剂，2-8避光保存，有效期内保持稳定。6、洗液：一瓶，25ml，10倍浓缩洗液，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7、终止液：一瓶，7ml，含1NH2SO4溶液，2-8保存，有效期内保持稳定。注：病人标本无需特殊制备（前处理）操作步骤1、 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、在分别注明标号的反应微孔中依次加入100ul标准品，质控血清，待测标本（用微量加样器加样）；3、每孔加入25ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4、在37水浴箱或温箱中温育60分钟；5、将各孔液弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁;6、每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;7、显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;8、以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体作空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；9、应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。结果计算1、分别计算出各标准品，质控及病人标本的B/B0%。B=标准品、标本OD值B0=标准品“0”点OD值 2、 以标准品浓度（ng/ml）为横坐标B/B0%为纵坐标，在对数坐标纸上绘制标准曲线。3、 在标准曲线上查出待测标本浓度。正常值范围 每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室睾酮正常值范围。下列正常值范围为本公司提供的参考值：男性：0.6ng/ml女性:卵泡期0.3-1.7ng/ml绝经期250 ng/ml技术指标灵敏度:0.2ng/ml注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、 定期检验移液是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。血清雌二醇试剂概述雌二醇是雌激素中活性最强的一种，主要由卵巢产生，肾上腺皮质睾丸也能少量分泌，妊娠三个月且主要由胎盘分泌。血液循环中的雌二醇主要结合在性激素结合球蛋白上，在肝脏中代谢成水溶性的硫酸酯和葡萄糖醛酸酯，经肾脏排出体外。血清雌二醇浓度是检查丘脑下部垂体生殖腺轴功能的指标之一。主要用于青春期前内分泌疾病的鉴别和闭经或月经异常时卵巢功能评价的指标。也是男性睾丸或肝脏疾病的诊断指标之一。原理本公司的雌二醇试剂盒采用抗原标记竞争法测定血清中雌二醇的水平。试剂盒中将抗雌二醇抗体包被于微孔板上，制备成固相抗体，酶结合物含有用辣根过氧化物酶标记的雌二醇抗原。反应过程中若检测标本含有雌二醇，则标记抗原竞争固相抗体，形成固相抗体抗原或固相抗体标记抗原复合物，并结合在微孔壁表面，洗去多余的标记抗原，再加入酶底物显色。用IN H2SO4终止酶反应后，在450nm波长下测定吸光度。试剂组成1、微孔反应板：96孔，用抗雌二醇抗体包被微孔反应板，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，4ml，含雌二醇与辣根过氧化物酶的结合物，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：五瓶，每瓶1ml，含雌二醇浓度分别为0，50，200，600，1200pg/ml的血清标准品，2-8保存，有效期内保持稳定。4、显色A：一瓶，7ml含过氧化氢和稳定剂，2-8保存，有效期内保持稳定。5、显色B：一瓶，7ml，含色素基质和稳定剂，2-8避光保存，有效期内保持稳定。6、洗液：一瓶，25ml，10倍浓缩洗液，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7、终止液：一瓶，7ml，含1NH2SO4溶液，2-8保存，有效期内保持稳定。注：病人标本无需特殊制备（前处理），采用可行医用技术收集全血标本，然后将其离心，分离提取血清标本。操作步骤4、 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、在分别注明标号的反应微孔中依次加入100ul标准品，质控血清，待测标本（用微量加样器加样）；3、每孔加入25ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4、在37水浴箱或温箱中温育60分钟；5、将各孔液弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁;6、每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;7、显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;8、以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体作空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；9、应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。结果计算1、分别计算出各标准品，质控及病人标本的B/B0%。B=标准品、标本OD值B0=标准品“0”点OD值 2、 以标准品浓度（pg/ml）为横坐标，B/B0%为纵坐标，在对数坐标纸上绘制标准曲线。3、 在标准曲线上查出待测标本浓度。正常值范围 每个实验室都应根据本实验室条件及接触的人群作出自己实验室雌二醇正常值范围。下列正常值范围为本公司提供的参考值：男性：50 pg/ml女性：青春发育期：卵泡期366.2 pg/ml,排卵期5915 pg/ml,黄体期667.3 pg/ml, 成年女性:卵泡期489 pg/ml,排卵期535181 pg/ml,黄体期23178 pg/ml, 晚期妊娠:卵泡期59 pg/ml,绝经期33.82.4 pg/ml,儿童:2318 pg/ml技术指标灵敏度:10pg/ml注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、 定期检验移液是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。生长激素试剂概述生长激素（HGH）分子量，21500道尔顿，由带有2个二硫键的191个氨基酸的单链组成。是由垂体前叶细胞合成的一种蛋白激素。在婴儿期HGH缺乏可引起低血糖，在儿童期引起身材矮小。儿童期HGH过量很少见，但如果存在，可导致超长身材或巨人症。成人HGH过量引起肢端肥大症，这可以是HGH本身产生过量，也可以是异位释放因子过量，如胰腺肿瘤。HGH受下丘脑分泌的生长激素释放因子作用，以脉冲方式由垂体释放到循环中，在慢波睡眠开始阶段HGH有一个正常脉冲。非常特异应激素也能引起HGH升高。激烈运动和一些药物刺激也会引起HGH升高。因为HGH是脉冲式释放，一个孤立的血清HGH结果通常是没有价值的。新生儿的随机HGH水平若连续超过10ng/ml时，则不存在HGH缺乏。在支端肥大症病人，若随机HGH水平持续高于10mU/L（相当于5ng/ml，可以支持诊断。原理本剂用双抗体夹心酶标免疫法，测定人血清中的HGH含量。试剂盒中使用的两个独立物异性抗体是否由HGH分子不同的抗原决定族制备而得。其中一个抗体用于包被反应板，制成固相抗体，而另一个抗体制备成酶标抗体辣根过氧化物酶结合物溶液。若检测物中有HGH，则同时与酶标抗体与固相抗体反应，形成“固相抗体抗原酶标抗体复合物，”并结合在微孔表面，洗去多余的酶标抗体，加底物显色，再加上终止液反应，用酶标仪在450nm波下测吸光度。试剂组成1、微孔反应板：2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：6瓶，浓度分别为0，2.5，5，10，25,50ng/ml，2-8保存，有效期内保持稳定。4、显色A：2-8保存，有效期内保持稳定。5、显色B：2-8避光保存，有效期内保持稳定。6、洗液：一瓶，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7、终止液：一瓶，7ml，2-8保存，有效期内保持稳定。标本采集1、 标本为人血清,血浆或再钙化的血浆.2、 血清标本须由用标准静脉穿刺技术采集的全血中分离得到。3、 标本中含水有导致实验结果不一致。分析前须将标本澄清。4、 含有大量的脂血、溶血或浑浊的血清不能使用。5、 若24小时内进行实验，血清可存放于2-8，若不需及时实验，血清应在-20条件下保存，避免反复冻融。注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、 定期检验移液是否准确。4、 严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、 每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、 注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、 酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、 六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、 试剂使用后应及时放回冰箱。10、 显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。操作步骤1、 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、反应孔中依次加入50ul标准品和待测标本；3、每孔加入50ul酶结合物，轻轻振，充分混匀；4、在37水浴箱或温箱中温育30分钟；5、将各孔液弃尽，用洗液冲洗五次,并拍干;6、每孔加1滴显色液A及1滴显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;7、每孔加1滴终止液,并混匀;8、用酶标仪在450nm波长下读记吸光度；9、反应终止液后的30分钟内记录各反应孔OD值。结果计算1、 在普通坐标纸上，以标准品吸光度对各个标准品浓度作图，吸光度值作Y轴，浓度作X轴画出标准曲线。2、 在标准曲线上查出待测标本浓度。3、 所有稀释的标本需乘以相应的稀释倍数来进一步推算其浓度.正常值范围 每个实验室都应根据测定的方法及人群体间的差异建立自己的正常值范围。以下正常值为本公司提供的参考值：一般成人HGH10ng/ml，女性平均较男性偏高。实验限度1、 HGH酶免检测试剂盒仅用于测定血清、血浆或再钙化的血浆标本。2、 实验操作中冲洗不充分可能影响实验结果，因此在每一遍冲洗前彻底甩干微孔中残留的洗液3、 本实验结果仅供临床医生参考，不能作为诊断的唯一依据。质控血清参考值L-I 5.0(4.0-6.0)ng/mlL-25.0(20.0-30.0)ng/mlHCG定量（ELISA）使用说明书概述人绒毛膜促进激素（HCG）是由人胎盘中的滋养层合体细胞分泌的一种激素正常未孕女性血清中不出现。当受精卵在子宫内膜着床后，胎盘形成开始发育时，绒毛膜滋养层细胞开始分泌HCG，它是维持正常妊娠生理过程的重要因素。HCG是一种糖蛋白激素，是由a及B两个亚单位组成，分子量36700。a亚单位与其它糖蛋白激素（如：LH、FSH、TSH等）的a亚单位一级结构相似，但B亚单位则不同。故测定血清或尿中HCG-B亚单位的浓度，比测定HCG更特异。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫分析法定量测定血清（或尿）中HCG水平。分别与HCG分子上不同抗原决定簇发生反应。用一株单抗包被微孔板，制成固相抗体，用酶标记B-HCG单抗，制成标记抗体。向被单抗的微孔中加入HCG（标准或待测样品）及标记抗体，特异性地形成“固相抗体抗原标记抗体”复合物，显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），从标准曲线上计算待测样品的浓度。试剂组成1、包被微孔板：2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：7瓶，浓度分别为0，5，10，25,50，100，200mIU/ml，2-8保存，有效期内保持稳定。4、显色液A、B及终止液：各1瓶，2-8保存，有效期内保持稳定。5、浓缩洗涤液：1瓶，使用前，用蒸馏水稀释至10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。6、标本稀释液：1瓶。用于所测标本预期值高于200mIU/ml时可将标本稀释后再测定。标本采用静脉取血分离血清。若不能立即分析，应将其置于-20下冷冻保存，严重溶血的标本不能使用。操作步骤1、 在分别注明标号的包被微孔板中依次按标准品（0，5，10，25，50，100，200mIU/ml），待测标本的顺序加入50ul血清。2、 每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡，充分混匀。3、 37温育30分钟。4、 弃去液体，用浓缩洗涤液洗五次，而后拍干。5、 每孔加1滴显色液A，再加1滴显色B，充分混匀，在室温下避光反应。15分钟，而后加1滴终止液，混匀。6、 以显色A、B、终止液各式各样滴做空白，用450nm波长在终止反应后30分钟内读取各反应孔的吸光度。结果计算1、 在普通坐标纸上，以吸光度作纵轴，标准品浓度作横轴，画出标准曲线。2、 在标准曲线上，以各标本的吸光度，查出其对应的HCG渡。3、所有稀释的标本需乘以相应的稀释倍数来进一步推算其浓度.临床意义1、 血清HCG浓度超过25mIU/ml，即可诊断为妊娠。2、 正常妊娠及有滋养叶细胞肿瘤时节，HCG浓度可以很高。故应先对标本做适当的稀释。3、 一些非滋养叶细胞的恶性肿瘤，如胚胎细胞癌、畸胎癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、直肠或肠癌、肺病及黑色素癌等，病人血中HCG也可以增加。注意事项 1、 不要混淆试剂瓶盖，不要混用不同批号的试剂及包被微孔板，不要加使用过期的试剂盒。2、 实验加样完毕后，应注意；轻摇包被微孔板，一定要充分混匀。3、 在冲洗过程中，一定要冲洗干净，并扣干包被微孔板中残余液体。若冲洗不充分将降低精确度，造成吸光度增高的假象。4、 实验完毕后，应及时将试剂盒贮存在2-8冰箱中。5、 使用包被微孔板应注意干燥保存，避免受潮。6、 贮存的使用显色B时应避免日光直接照射。人免疫球蛋白IgE概述抗体是在抗原物质刺激下产生的，存在于血清和组织液中并能与特意性结合的免疫球蛋白。免疫球蛋白约占人体血清总蛋白的20-25%。免疫球蛋白质分五种，既IgG，IgA，IgMIgD和IgE。IgE分子量为190000道尔顿，含糖量12%正常血清中浓度为0.001mg/ml(1IU=24ng).IgE与肥大细胞结合会引起I型变态反应,并能与巨噬细胞和K细胞结合.变态反应性疾病、寄生虫感染、IgE骨髓瘤、SLE、急性或慢性肝炎、类风湿关节炎、患者血清IgE含量升高。实验原理在包被有抗人IgE抗体的微孔中加入标本和缓冲保温。洗掉未结合的血清组分，加入酶结合物通过过氧化氢和四甲基联苯胺反应显色，显色的光密度与最初结合在微孔中的IgE成比例。试剂组成1、 微孔反应板：96孔用抗IgE抗体包被。2、 标准品：7瓶分别为0，20，50，100，250，500，1000IU/ml3、 质控血清：2瓶分别曾L-I，L-4、 缓冲液：1瓶磷酸盐缓冲液PH7.0-7.25、 酶结合物:一瓶10.5mlIgE单克隆抗体与辣根过氧化物酶的结合物,含蛋白稳定剂6、 显色A:一瓶7.0ml含过氧化氢和稳定剂7、 显色B:一瓶7.0ml含色素基质和稳定剂8、 浓缩洗液：一瓶50ml使用前用蒸馏水稀释。9、 终止液：一瓶，含INH2SO410、 以上2-8保存有效期内保持稳定注意事项:1、 实验室水箱温度:37,实验前必须检查.2、 实剂从冰箱取出后，放室温平衡15分钟，实验过程中室温18-203、定期检验移液是否准确。4、严格按说明书操作，不同批号试剂不得混用，不要混肴试剂瓶盖。5、每次实验必须带1-2个质控血清，加样后轻摇微孔条，一定要充分混匀，实验结果必须是质控血清在质控范围内，方可发报告。6、注意洗板时间，每次洗后需拍干后再洗杜绝连续冲洗；无洗板机时，最好用振荡器洗板，确保质量，若冲洗不净会影响结果。7、酶标仪测定前需提前预热，经调“0”重复结果后再测定样品，最好每次测一空板，避免仪器内有液体未被发现时影响结果。8、六项指标相互关联，遇异常情况及时临床联系，查询病员是否服药等特殊情况。9、试剂使用后应及时放回冰箱。10、显色B存取时，应避免光线直接照射。11、 未用完的微孔板放在封口袋内保存。标本采集1、 仅用于人血清，血浆或再钙化血浆。2、 血清应用可行穿刺技术采集的全标本制得。3、 若标本不立即测定应放入2-8如果储存时间超过三天，样品必须冷冻于冰箱。但注意不要反复冻融标本。4、 含沉淀的标本会产生不一致的结果分析前离心去掉沉淀。5、 不要使用有过量脂血，融血，浑浊的标本。操作步骤1、 将所需用量的微孔条放置在支架上；2、在分别注明标号的反应微孔中依次加入25ul标准品，质控血清，待测标本（用微量加样器加样）；3、每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀；4、将各孔液弃尽，用洗液（或蒸馏水PH=7.00.5）冲洗五次,每次洗应将水分弃尽,最后一次冲洗后将微孔支架倒置在吸尽残余水分,切勿擦拭反应微孔内壁;5、扣干后，每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡微孔支架，充分混匀后的室温（20-25）反应20分钟；6、将各孔液体弃尽冲洗五次7、每孔加1滴(50ul)显色液A,再加1滴(50ul)显色液B,充分混匀;在室温(18-25)下避光反应15分钟;8、显色反应15分钟后,每孔加1滴(50ul)终止液,并混匀;9、以显色液A、B、终止液（各1滴）的混合液体作空白孔，用微孔型酶标仪在450nm波长下依次以空白、标准品，标本的顺序读记吸光度；10、应在加终止液后的30分钟内读取吸光度。计算1、 计算每个标准品和病人血清的平均吸光度（OD450mm）2、 在坐标纸上以标准品吸光度对浓度（ng/ml）用作图吸光度值为Y轴，浓度为X轴3、 根据每一个标本的吸光度值在标准曲线上找出其对应的Ferritin敏感度本试剂盒最低检测IgE浓度为10IU/ml正常参考值各实验室应根据本地区病人群和自己的测定技术建立自己的正常值。实验限度1、 IgE酶免试剂盒仅用于测定血清，血浆或再钙化的血浆标本2、 实验操作中冲洗不充分可能影响实验结果，因此在每遍冲洗前彻底甩干残留的洗液。3、 本实验仅供于临床医生参考不能作为临床诊断的唯一依据。L-I 100（80-120）IU/mlL-II 250（200-300）IU/ml促甲状腺激素概述促甲状腺素TSH是垂体前叶分泌，分子量为30000的一种糖蛋白激素。由a和B两个亚基组成。A亚基与FSH、LH的a亚基结构相似，而与HCG的a亚基结构略不同。B亚基为激素特异性，结构各不相同。原发性甲状腺功能低下时血清中TSH升高。TSH升高可确定因总T4或游离T4值低诊断的明显（overt）甲低。仅的测定总T4或游离T4难以诊断甲状腺功能低下，因为总T4或游离T4可在正常值范围内。这些情况下测定TSH特别有利于诊断，因为TSH水平升高。在甲高时T3和T4升高而TSH受抑制。血清中TSH是研究下丘脑垂体甲状腺轴之间相互关系的主要指标。用于鉴别诊断原发性和继发性甲状腺功能低下、诊断甲亢、甲状腺肿、甲状腺癌等甲状腺疾病以及术后和疗效监测。原理本公司的促甲状腺素试剂盒采用双抗夹心法测定人血清TSH。将抗一a亚基的单克隆抗体包被于微孔板上，用辣根过氧化物酶标记抗一B亚基的单克隆抗体为示踪物。若检测标本中含有TSH，则在反应板中形成a亚基单抗TSHB亚基单抗*HRP；再加入底物后显色。人血清中TSH的浓度与OD值成正比。试剂组成1、微孔反应板：48孔，2-8干燥保存，有效期内保持稳定。2、酶结合物：一瓶，2-8保存，有效期内保持稳定。3、标准品：6瓶，浓度分别为0，0.5，1.0,5,15,30uIU/ml(1stIRP 68/38)IuIU/ml(1stIRP68/38)=1uIU/ml(2ndIRP80/558),2-8保存，有效期内保持稳定。4、显色A：2-8保存，有效期内保持稳定。5、显色B：2-8避光保存，有效期内保持稳定。6、洗液：一瓶，使用前用蒸馏水稀释10倍，2-8保存，有效期内保持稳定。7、终止液：一瓶，2-8保存，有效期内保持稳定。操作步骤 1、 在反应孔中依次加入50ul标准品及待测标本。2、 每孔加入100ul酶结合物，轻轻振荡，充分混匀。3、 在