纤维素酶活力测定.docx_第1页
纤维素酶活力测定.docx_第2页
纤维素酶活力测定.docx_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

纤维素酶活力测定（3,5-二硝基水杨酸法）姓名：高超 年级：13级生科三班 学号：201300140020同组者：樊晓航一， 实验目的：1， 学习掌握光度计的使用；2， 学习用 3,5-二硝基水杨酸法测定纤维素酶活力二，实验原理：1、3,5-二硝基水杨酸法测纤维素酶活力的原理 纤维素酶水解纤维素，产生纤维素二糖、葡萄糖等还原糖，能将 3,5-二硝基水杨酸中 硝基还原成橙色的氨基化合物，利用比色法测定还原物生成量来表示酶的活力。 2、3,5-二硝基水杨酸法测还原糖的原理 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原成棕红 色的 3-氨基-5-硝基水杨酸。在过量的 NaOH 碱性溶液中此化合物呈橘红色，在 540nm 处有 最大吸收， 在一定的浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系， 利用比色法可以测定样 品中还原糖的含量。三，实验器材：器材; 比色管、水浴锅、电炉、分光光度计、容量瓶 100ml、烧杯、移液枪试剂 :1、3,5-二硝基水杨酸试剂,2、0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)水溶液，溶解后成胶装液，静置过夜，使用前摇匀。3、酶液（10ug/ml）四，实验步骤：1 ，标准曲线的绘制：在还原糖实验中已做曲线如下：2，.空白管的测定:取1ml酶液，沸水浴5分钟，冷却加3ml0.5%CMC，与样品管同时放入50度水浴30分钟。其它操作同样品管。3.样品的测定：取0.5%羧甲基纤维素钠溶液3ml，酶液1ml分别加入到三只比色管中标记为1，2，3，于50度水浴中糖化30分钟，取出，立即于沸水浴中煮沸10分钟使酶失活，得糖化液，冷却加入3ml显色液，再沸水浴10分钟，冷却后加水定容至25ml，混匀，550nm测OD值4，测得的实验值如下;空白管：01号管：0.4262号管：0.4033号管：0.402五，试验结果分析：由三组平行实验结果，可用0.403带入计算得0.561mg/ml,所以在30分钟内生成的还原糖为14.022mg;酶活力计算公式为：（14.022100）/30=46.74六，注意事项：1，在测定OD值过程中，绘制标准曲线时要用1号葡萄糖标准液（葡萄糖浓度为0）调零，测定样品OD值时要用样品空白液调零。从实验原理上看，这样做的目的是：无论是标准液还是样品液，都要去除葡萄糖外的其他各种成分的对
人人文库> 全部分类> 应用文书 > 事务文书

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论